שימור רקמות משובצות פרפין קבוע פורמלין (FFPE): שיטה לחקר מורפולוגיה של רקמות

- ראשית, הניחו פרוסת טישו על נייר סינון ספוג PBS כדי למנוע התכווצות או נפיחות של התאים על ידי איזון האוסמולריות. מעבירים את הרקמה לקלטת היסטו. סגור והנח את הקלטת בפורמלין חוצץ ניטרלי, פתרון NBF. NBF מכיל פורמלדהיד הנקשר לקבוצות אמינו של חומצות אמינו ומונע היווצרות חומצה פורמית היוצרת פיגמנטים של הרקמה. השאירו את הקלטת למשך הלילה בטמפרטורה נמוכה, המונעת התפרקות חומצת גרעין ומקבעת את הרקמה. לייבש את הרקמה עם שטיפות מרובות של אלכוהול.

מניחים אותו בפרפין נוזלי ולוחצים אותו לתחתית התבנית. הסר את המשקל והנח את החלק התחתון של קלטת היסטו על הרקמה. יוצקים פרפין נוזלי על ההרכבה. הניחו להתקנה להתמצק על צלחת קרה. פרפין אינו מסיס במים, ולאחר הכניסה לרקמה המיובשת הוא מתקשה ומסייע בחתך. מעבירים את בלוק הרקמה על מיקרוטום. גזור ואסוף חלקים דקים של הרקמה בשקופית. אם החלק עבה מדי, חמצן וחומרים מזינים אחרים אינם יכולים להתפזר על פני הפרוסה וליצור שיפוע נמק מזויף. אם הקטע דק מדי, אז הוא נוטה להתכרבל. סרטון הפרוטוקול בוחן ביטוי סמנים ביולוגיים וכדאיות תאים מרקמות FFPE של סרטן ריאות.

- כדי להתחיל לקבע את הפרוסה הרצויה, מעבירים אותה בזהירות בעזרת מלקחיים לצלחת של 10 ס"מ המכילה נייר פילטר ספוג מלא ב-PBS של 2 עד 3 מיליליטר ונותנים לה לצוף. לאחר מכן הרימו את נייר הסינון בעזרת זוג מלקחיים והניחו אותו בקלטת הי