השתלת איי לבלב: שיטה להשתלת איי לבלב לתוך החדר הקדמי של עין העכבר להדמיית In Vivo

- איי הלבלב מכילים תאי בטא המפרישים אינסולין. בחולי סוכרת מסוג 1, תאי בטא המייצרים אינסולין הופכים לבלתי מתפקדים. השתלת איים בחולים כאלה מציעה פוטנציאל למתן שליטה גליקמית. כדי להעריך את יעילות ההשתלה, אנו משתמשים במודלים של בעלי חיים כגון עכבר שחדר העין הקדמי שלו הוא אתר אופטימלי להשתלה ולהדמיית in vivo.

להשתלת איונים, מניחים עכבר מורדם על כרית חימום חמה ומזריקים buprenorphine, משכך כאבים כדי להקל על הכאב, תת עורית בחלק האחורי של העכבר. לאחר מכן, הכנס את אפו של העכבר לתוך מסכת אף לאספקה רציפה של חמצן ואיזופלורן הרדמה.

קבע את ראש העכבר במחזיק הראש כדי לחשוף את העין ומשוך בעדינות את העפעף באמצעות מלקחיים קהים כדי להוציא את העין החוצה. טען צינורית עם איים מסומנים פלואורסצנטית. מכניסים את חצי קצה הצינורית לקרנית. הרימו את הקרנית, שחררו בעדינות את האיונים, הסירו את הצינורית ומרחו ג'ל עיניים.

לאחר משך הזמן הרצוי, הניחו את העכבר מתחת למיקרוסקופ של שני פוטונים וצלמו. ניתן לצפות בכלי דם היוצרים רשת כלי דם לאורך השתל. בפרוטוקול הבא נבצע השתלת איון לבלב אנושי בחדר העין הקדמי של העכבר.

כדי להתחיל, הניחו את העכבר על כרית חימום חמה, מקמו אותו במחזיק הראש ושימו את מסכת האף. השתמש באגודל ובאצבע המורה כדי להרים מעט את הראש. הדקו אותו עם חתיכות מתכתיות בצדדים, וודאו שהאוזניות מקבעות את הראש ישירות מתחת לאוזניים. תת עורית, להזריק את הפתרון buprenorphine לתוך החלק האחורי של העכבר. בעדינות, משכו את עפעפיים של העין להשתלה באמצעות מלקחיים קהים. הוציאו את העין החוצה וקבעו אותה באופן רופף בעזרת זוג פינצטה מכוסה בשפופרת פוליתן.

לאחר העברת האיים לצלחת פטרי עם PBS, לאסוף כ 20 עד 30 איים בתוך צינורית העין. בעזרת מחט של 25 מד, משופעים כלפי מעלה, מכניסים בזהירות את הקצה לקרנית ומבצעים חתך רוחבי יחיד. בזהירות להרים את הקרנית עם צינורית טעון מראש עם איים ולשחרר לאט את האיים לתוך העין. לאט לאט למשוך את הצינורית ולמרוח ג'ל עיניים על העין.

לאחר 10 דקות, הסירו את המלקחיים המחזיקים את העפעף והחזירו את העין למקומה הרגיל. להדמיה של איים אנושיים מושתלים במיקרוסקופ של שני פוטונים, הניחו את משטח מחזיק הראש מתחת למיקרוסקופ והניחו ג'ל עיניים על העין כנוזל טבילה בין הקרנית לעדשה. מקם את העין מתחת למטרה וצלם את האיים האנושיים המושתלים כמתואר בכתב היד של הטקסט.