בידוד תאי אצינר ראשוני: שיטה לבידוד תאי אצינר מלבלב עכבר

- תא אצינר לבלב הוא תא אקסוקריני המכיל מגוון אנזימי עיכול. לפעמים, בתגובה לאיתות אונקוגני, התא האסינארי הופך לתא דוקטלי. תא צינורי זה יכול מאוחר יותר להפוך לסרטני. לכן, חיוני לבודד את תאי acinar כדי לחקור את תפקידם בהתקדמות סרטן הלבלב.

התחל על ידי בידוד הלבלב מעכבר המתת חסד. מוסיפים את הלבלב לסירת שקילה המכילה תמיסת מלח מאוזנת בתוספת אנטיביוטיקה. טוחנים את הלבלב לחתיכות קטנות באמצעות מספריים ומוסיפים את רקמת הלבלב לצינור. לאחר מכן, להוסיף פתרון collagenase לחתיכות הלבלב בצינור.

Collagenase מעכל את הקולגן שמחזיק את הרקמה יחד כך שהרקמה נשברת לחתיכות עדינות. כעת, הוסיפו מדיה המכילה סרום לצינור והניחו את הרקמה על קרח. זה עוזר לעצור את הפעולה של collagenase.

סנן את הרקמה ואת המדיה פעמיים, והקטנת גודל הרשת של המסנן בהדרגה בכל פעם כדי לקבל תרחיף רקמה עדין. לבסוף, צנטריפוגה את המתלה שנוצר כדי לאסוף את התאים acinar בכדור. הסר את supernatant ולאחסן את התאים acinar לניתוח נוסף. בפרוטוקול הבא נבודד תאי אצינר מהלבלב של עכבר שעבר המתת חסד.

- כדי לנתח את הלבלב מעכבר שעבר המתת חסד, יש להצמיד תחילה את כפות העכבר למכסה הפוליסטירן, לכוון אותו כך שהזנב יפנה אל החוקר, ולרסס את הבטן באתנול 70%. השתמש במלקחיים autoclaved להרים את הפרווה והעור בקו האמצע, ועם מספריים autoclaved, לבצע חתך דרך הפרווה והעור מ