אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 3:21 דק׳ • April 30th, 2023
- החלק האקסוקריני של הלבלב מכיל תאים אצינאריים ותאים דוקטליים. תאי אצינר מסנתזים ומפרישים אנזימי עיכול לתוך הלומן שלהם. תאי הצינור מצפים את הצינור המעביר אנזימים אלה למעי הדק. כדי להסתגל לעקה גנטית וסביבתית, תאי אצינר עוברים המרה מורפולוגית ותפקודית לתאים דמויי צינור, המכונים מטאפלזיה אצינארית לדוקטלית, או ADM.
לעיתים, ADM עלול להוביל להופעת סרטן הלבלב. כדי לגרום ל-ADM ex vivo, הכינו תרחיף תאי קולגן מקורר על ידי שילוב תאי אסינאר ראשוניים עם ג'ל קולגן שנשמר על קרח כדי למנוע התמצקות מטריצה. טפל בהשעיה עם ממריץ ADM בדיקה או מעכב עניין.
מפזרים את התרחיף לצלחת תרבית ודגרים כדי להקל על התמצקות הקולגן ומטמיעים את התאים בתוכה. לאחר מכן, פיפטה נפח נוסף של מדיה המכילה את הבדיקה ADM ממריץ או מעכב עניין על שכבת תאי קולגן מוצק.
דוגרים על הצלחת למשך זמן מתאים. עם אינדוקציה של מטאפלזיה אצינארית לדוקטלית, תאים אצינאריים ראשוניים בצורת פירמידה מתמיינים ליצירת תאים עם מורפולוגיה דמוית תא צינור. בפרוטוקול הבא, נדגים את האינדוקציה ex vivo של מטאפלזיה אצינארית לדוקטלית בתאי אסינר מורין ראשוניים באמצעות TGF אלפא כממריץ.
- להכנת ג'ל קולגן, ערבבו 7 מיליליטר של קולגן זנב חולדה מסוג 1, 700 מיקרוליטר של פי 10 מהבינוני של Waymouth, ו-466.6 מיקרוליטר של נתרן הידרוקסידי מולארי 0.34 בצינור של 50 מיליליטר על קרח
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים