תרביות קו-תרביות ספרואידים תלת-ממדיות מודפסות ביולוגית: שיטה לגידול משותף של תאים סרטניים ופיברובלסטים
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 4:41 דק׳ • April 30th, 2023
- בתרביות תלת-ממדיות מגנטיות מודפסות ביולוגית, סוגי תאים מרובים יוצרים מבנים תלת-ממדיים או ספרואידים בהשפעת שדות מגנטיים. כדי להגדיר את התרבית, ראשית, להכין תרחיפים חד-תאיים של תאים סרטניים ופיברובלסטים בתווך המתאים להם. לאחר מכן, הוסף ננו-חלקיקים מגנטיים תואמים ביולוגית לשני המתלים. ננו-חומרים אלה מכילים שאריות פולי L-ליזין טעונות חיובית, המאפשרות קשירה לא ספציפית של חלקיקים מגנטיים לקרום התא באמצעות אינטראקציות אלקטרוסטטיות.
לדגור כדי להשיג מגנטיזציה מקסימלית של תאים סרטניים ופיברובלסטים. לאחר מכן, מערבבים את שני מתלי התאים ביחס הרצוי. העבירו את תרחיף ננו-חלקיקי התא הזה לצלחת תרבית דוחה תאים, הממוטבת במיוחד למניעת היצמדות תאים. הרכיבו מערך זה על כונן מגנטי ודגרו. כוחות מגנטיים מנחים את הצבירה או ההדפסה הביולוגית של תאים סרטניים ממוגנטים ופיברובלסטים למבנים ספרואידים תלת-ממדיים בתחתית הבאר.
ברגע שהספרואידים נוצרים, הסירו את המגנט ואפשרו לתרביות התלת-ממדיות לגדול לנפח הרצוי. בפרוטוקול זה, נדגים את היצירה של ספרואידים תלת-ממדיים מתרבית משותפת מתאי סרטן הלבלב ומתאי פיברובלסט המופעלים על ידי PS1 באמצעות טכניקת הדפסה ביולוגית מגנטית.
שימוש בטכניקת תרבית רקמה אספטית סטנדרטית, תרבית את התאים הסרטניים והפיברובלסטים המעניינים בצלוחיות T75 במצע הגידול המתאים. כאשר התאים מגיעים למפגש של 70%
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים