בדיקת שטף חוץ-תאי בספרואידים תלת-ממדיים: שיטה למדידת הפעילות המטבולית של ספרואידים של גידולי לבלב

- תאי סרטן הלבלב מתקשרים עם פיברובלסטים הקשורים לסרטן במיקרו-סביבה של הגידול או TME. אינטראקציות אלה מווסתות את הפעילות המטבולית של התאים הסרטניים ומשפיעות על התקדמות הסרטן.

ספרואידים הם הצברים התאיים שמחזירים את ה-TME במבחנה. לכן, אנו יכולים להשתמש בספרואידים אלה כדי לבחון את השינויים בתפקודים המטבוליים של הגידול על ידי בדיקת שטף חוץ-תאי. בדיקה זו מודדת את הריכוז החוץ תאי של חמצן ופרוטונים כדי לקבוע מטבוליזם אירובי וגליקוליטי, בהתאמה.

התחל על ידי נטילת ספרואידים 3D בגודל מתאים שנעשו על ידי גידול משותף של תאי סרטן הלבלב עם פיברובלסטים הלבלב. כעת, העבירו את הספרואידים לצלחת ניתוח שטף וכסו אותה במחסנית חיישן המכילה תרופות בדיקה. הפעל את הבדיקה במנתח שטף חוץ-תאי.

Flux analyzer מזריק באופן פניאומטי תרופות בדיקה ממחסנית החיישן ללוחית הניתוח בנקודות זמן ספציפיות. בתגובה לתרופות הבדיקה, תאים משחררים פרוטונים וחמצן לתוך תא המיקרו של הצלחת והפלואורופורים הנמצאים בבדיקת החיישן מודדים רמות אלה. לבסוף, באמצעות תוכנה מתאימה, לנתח את הפונקציונליות של spheroids.

בפרוטוקול הבא נדגים שיטה למדידת התפקוד המטבולי של תאי הגידול בלבלב הנמצאים בכדורידים תלת-ממדיים באמצעות בדיקת שטף חוץ-תאי.

יום לפני הבדיקה המטבולית, לחות את מחסנית הבדיקה עם 200 מיקרוליטר של כיול הבדיקה לכל באר בצלחת השירות שסופקה לדגור א