מודל עכבר אורתוטופי פלואורסצנטי: השתלת GFP המבטא תאים סרטניים בעכבר להערכת התקדמות הגידול ב- Vivo
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 5:08 דק׳ • April 30th, 2023
- תאים סרטניים המבטאים חלבון פלואורסצנטי ירוק או GFP מאפשרים מעקב אחר צמיחת הגידול וגרורות באמצעות הדמיה אופטית לא פולשנית. בדרך כלל אנו משתילים תאים אלה במודל אורתוטופי, המאפשר יצירה מחדש של המיקרו-סביבה של הגידול ומחקה את האינטראקציה של תאי הגידול עם סביבתם.
התחל על ידי הנחת עכבר מורדם על כרית חימום חם. כעת, הכניסו את אפו למסכת אף כדי לספק חמצן ואיזופלורן, חומר הרדמה. באמצעות מספריים, לעשות חתך קטן לחתוך את הרקמה. משכו בעדינות את הטחול יחד עם הלבלב ואתרו את זנב הלבלב.
לטעון מזרק עם תאים סרטניים פלואורסצנטי תרחיף להזריק אותו בעדינות לתוך זנב הלבלב. במקום ההזרקה מופיעה בועה שטחית המאשרת השתלה מוצלחת. החזירו את האיברים לחלל הגוף והשתמשו בתפר סטרילי כדי לסגור את החתך. עכשיו, להחזיר את העכבר לכלוב ולפקח עליו עד ההתאוששות.
לאחר משך הזמן הרצוי, מקם את העכבר בתא הדמיה וצלם תמונות. קרן האור פוגעת בתאים הסרטניים ומעוררת את ה-GFP, שבתורו מייצר פלואורסצנטיות ירוקה. בפרוטוקול הבא נבצע השתלה כירורגית של תאי סרטן לבלב המבטאים GFP במודל עכבר מורין אורתוטופי.
כדי להשתיל את התאים, ראשית, יש למרוח משחה על עיניו של עכבר מורדם ולהניח את בעל החיים על כרית חימום מכוסה בשפכטל סטרילי. לאחר מכן, לחטא בעדינות את האגף של החיה עם שלושה פילינג יוד ואחריו שלוש שטיפות אתנול 70%. לאחר אישור חוסר תגובה לצביטת הבו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים