אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 4:24 דק׳ • April 30th, 2023
- גנגליון השורש הגבי או DRG הם נוירונים חושיים המעבירים מסרים מהפריפריה למערכת העצבים המרכזית. לעומת זאת, נוירונים מקלעת myenteric מעורבים תנועות פריסטלטיות של המעיים.
במצבים סרטניים כגון סרטן הלבלב, נוירונים אלה משתנים מורפולוגית ותפקודית. כדי לחקור את השינויים במורפולוגיה העצבית, זרעו את התאים העצביים על כיסויים המצופים מראש בחלבון למינין, הונחו בצלחת מרובת בארות, ומעל התאים בתווך הבסיסי העצבי.
חלבון למינין מקדם צמיחת נוירוטים. לדגור על התאים במשך הלילה. לאחר מכן, הוסף את מדיה תמצית רקמת סרטן הלבלב לשלוש הבארות הראשונות ואת רקמת הלבלב בריאה לחלץ מדיה לשלוש הבארות הבאות. דוגרים על הצלחת. כעת, בצעו צביעה אימונוהיסטוכימית באמצעות סמני נוגדנים ספציפיים לנוירונים, אשר נקשרים לנוירונים. הניחו את הכיסוי על מגלשת הזכוכית והניחו את המגלשה מתחת למיקרוסקופ הפוך. מדוד את צפיפות העצבים באמצעות התוכנה.
נוירוני DRG בתרבית בתמצית רקמת סרטן הלבלב מראים בדרך כלל צפיפות עצבית גדולה יותר מאשר בתמצית רקמת לבלב בריאה. לעומת זאת, נוירונים מקלעת מיינטרית יוצרים נוירוטים ארוכים יותר מאשר בתמציות רקמת לבלב בריאות. בפרוטוקול הבא, נבצע בדיקת נוירופלסטיות חוץ גופית על נוירוני DRG ומקלעת מיינטרית של עכבר שזה עתה נולד.
- כדי להכין את התאים לתרבית, השתמש בהמוציטומטר כדי להעריך את המספר הכולל של נוירונים וגליה.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים