אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 6:26 דק׳ • April 30th, 2023
- בפלישת הגידול, תאי הגידול ההיקפיים עוברים מעבר אפיתל למזנכימלי או EMT, וכתוצאה מכך פירוק מקומי של המטריצה החוץ תאית או ECM. אנו יכולים לחקור את האינטראקציה של תאי גידול עם ECM במבחנה.
כדי לחקור אינטראקציות אלה, העבירו ספרואיד מוכן שמקורו בתאי גידול בלבלב לצלחת המכילה פיגום קולגן יחד עם בדיקות נותבות פלואורסצנטיות משובצות ואמצעי תרבית. ספרואיד הגידול משחרר פרוטאזות, אשר מפרקים קולגן ומפחיתים את קשיחות ECM, וכתוצאה מכך תנועה חופשית של בדיקות נותבות ב- ECM.
דוגרים על הצלחת למשך הזמן הרצוי. התבוננו בדגימה תחת מיקרוסקופ אור כדי להסתכל על רשת נקודות הדגימה בפיגום הקולגן ולהקליט מהן נתוני וידאו. האזור של המטריצה ליד הספרואיד מראה פירוק קולגן מקסימלי. לכן, הוא הגביר את תנועת הגשוש. לעומת זאת, האזור המרוחק יותר מהספרואיד מראה פחות פירוק קולגן, וכתוצאה מכך תנועה מוגבלת של מולקולות בדיקה.
טכניקה זו של בחינת התכונות הריאולוגיות של ECM על ידי מדידת מסלוליהם של חלקיקי נותב ידועה בשם מיקרו-ריאולוגיה עוקבת חלקיקים או PTM. בפרוטוקול הבא, נבצע בדיקת היווצרות כדור כדי לזהות תאי גזע סרטניים בלבלב ולהעריך את ההשפעה של מטפורמין.
כדי להתחיל, להכין תחנת עבודה בתוך מכסה מנוע זרימה למינרית עם שני בקבוקונים 2 מיליליטר. בקבוקון 1 יכיל את ספרואיד הגידול, ובקבוקון 2 יהיה בקרה ללא תאים. הכינו תערובת מדוללת של
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים