הכנת בלוק רקמת עור קפואה: פרוטוקול לשימור דגימות מלנומה עורית מהעור הגבי של מורין

- תאי גזע של מלנוציטים שקטים, בתגובה לקרינת UV או להסרת שיער, מופעלים. תאי גזע מלנומה פעילה יכולים להוביל למלנומה עורית - סוג של סרטן העור. כדי לחקור מלנומה, אנו מכינים בלוקים של רקמת עור קפואה כדי לשמור על המבנים המקוריים של DNA וחלבונים במהלך הליך הקיבוע.

התחילו בהנחת עכבר מלנומה שעבר המתת חסד על מיטת ניתוח והסירו שיער מהאזור הגבי של העור מעל הזנב. הבלו על העור ומכסים אותו בנייר פילטר. לאחר מכן, השקיעו את נייר הסינון המכיל רקמת עור בפורמלין חוצץ ניטרלי למשך הזמן הרצוי. פורמלין חודר לרקמת העור ונקשר לחומצות האמינו, מה שגורם להצלבה של חלבונים, ובכך מוביל לקיבוע רקמות.

הסר את רקמת העור מהנייר וחתוך את הרקמה כדי להשיג חתיכות בגודל הרצוי. כעת, הטמיעו את חלקי הרקמה במאונך בקריומולד מלא בתווך OCT והניחו את הקריומוולדים על קרח יבש. OCT היא מטריצת דגימות המתמצקת בעת הקפאה ויוצרת שכבה ג'לטינית סביב דגימת הרקמה המחזיקה אותה במקומה. השתמש בלוקים קפואים עבור בדיקות היסטולוגיות נוספות. בפרוטוקול הבא, נכין בלוקים של רקמת עור קפואה מהעור הגבי של מורין לחקר מלנומה של העור.

- כדי לבודד את דגימות העור, השתמשו בגוזם חשמלי כדי להסיר כל שיער מאזור העור הגבי של העכברים המוקרנים שהורדמו והברישו קלות את העור החשוף ברקמה נטולת סיבים כדי לנקות את האזור. בצע חתך קטן עם מספריים חדים ממש מעל בסיס הזנב והכנס מ