מידול Xenograft הנגזר מהמטופל: טכניקה ליצירת מודלים של עכברי מלנומה

- במודלים של xenograft או PDX שמקורם בחולה, תאים סרטניים או מקטעים מחולים אנושיים מושתלים בעכברים מושתלים מדוכאי חיסון. מודלים של PDX מדמים את המאפיינים הביולוגיים והמולקולריים של מיקרו-סביבת הגידול האנושית. כדי לפתח מודל PDX של מלנומה, ראשית, לקצור רקמת גידול מחולה מלנומה. הסר את הרקמה הנמקית מהגידול. לטחון את הגידול כדי לקבל slurry. לאחר מכן, הכינו עכבר מושתל מורדם במצב נוטה. בצע חתך כירורגי קטן על העור הגבי. חתכו בעדינות את הקרום הפאשיאלי או את שכבת רקמת החיבור הרופפת ממש מתחת לעור. זה מפריד את העור משכבות השרירים שמתחתיו ועוזר ליצור כיס להשתלת גידול.

מעבירים בעדינות את תרחיף הגידול לכיס. כעת, יש להכניס מטריצה חוץ-תאית מלאכותית לכיס כדי לייצב ולאבטח את תאי הגידול המושתלים. מהדקים בניתוח את הפצע ומאפשרים לעכבר להתאושש. עקוב אחר העכבר המושתל מדי שבוע כדי לבחון את הצמיחה של גידול xenograft. בפרוטוקול הבא נדגים השתלה תת-עורית של תאי גידול מלנומה שמקורם במטופל בעכבר NSG מדוכא חיסון כדי ליצור מודלים של קסנוגרפט שמקורם בחולה מלנומה.

- כדי להשתיל כריתה כירורגית או רקמת ביופסיה כירורגית, ראשית, יש לגלח שיער מהגב התחתון של עכברים מורדמים בני שישה עד שמונה שבועות והותיר אזור של כ-1.5 עד 3 סנטימטרים ללא שיער. הכינו גושי גידול וחלקו את תרחיף הגידול בצלוחית פטרי לתלוליות בודדות להשתלה כירורגית. באמצעות להב אזמל, בצע חתך באורך של כ -5 מ"מ במרכז גב העכבר. בעזרת זוג מלקחיים אחד, הרימו את העור בצד החתך מול המפעיל. עם מספריים ביד השנייה, מפרידים את העור משכבת השריר על ידי חיתוך עדין של קרום הפשיזם עם חתכי מספריים קטנים, ובכך יוצרים כיס לרקמת הגידול.

השתמש בלהב אזמל כדי להרים גוש גידול אחד, כמו גם תלולית בודדת אחת של רקמת גידול והכנס בעדינות את הרקמה לכיס שנוצר. לאחר מכן, להוסיף 100 מיקרוליטר של מטריצה תאית מלאכותית על תלולית רקמת הגידול בכיס. בעזרת שני זוגות מלקחיים, משכו את החתך בשני קצותיו כך שקצוות הפצע יתקרבו זה לזה. לאחר מכן, החל קליפס פצע אחד או שניים כדי לסגור את הפצע. תת עורית להזריק 1-5 מיליגרם לק"ג של משכך כאבים. כאשר הריפוי הושלם, לאחר כ -7 ימים, להסיר את קליפסים הפצע.