יצירת שחזורי עור מלא אורגנוטיפיים: הליך לביסוס מודל עור תלת ממדי באמצעות דגימות עור אנושיות

העור מורכב בעיקר משכבת אפידרמיס עליונה ושכבת עור תחתונה. תאי האפידרמיס מרובדים למספר שכבות, החל מהתאים הכי פחות ממוינים הנמצאים בבסיס ועד לתאים המתמיינים מאוד בפריפריה. כדי לגדל רקמת עור המחקה את ההיבטים המורפולוגיים והביוכימיים של עור רגיל, אנו יכולים ליצור מודל עור אורגנוטיפי.

כדי להתחיל, לקחת צלחת רב באר עם תוספת קרום. הוסיפו פיברובלסטים עוריים מעורבבים עם קולגן לעלון. יש לדגור כדי להקל על התמצקות מטריצת הקולגן כדי להטמיע את הפיברובלסטים ולחקות את תא העור של העור.

לאחר מכן, להוסיף תרחיף תא keratinocyte על שכבת העור. לדגור על הצלחת כדי לאפשר keratinocytes להיצמד לתא העור. להשלים את התרבית עם מדיום אפידרמליזציה כדי ליזום התפשטות קרטינוציטים והיווצרות של שכבת אפידרמיס.

לבסוף, מעבירים את התוספות לצלחת טרייה מרובת בארות. הוסף אמצעי ריבוד כך שיכסה רק את בסיס המבנה, ובכך יוצר ממשק אוויר-נוזל. עם הדגירה, ממשק אוויר-נוזל מאפשר התמיינות של קרטינוציטים לאפידרמיס רב-שכבתי מרובד.

בפרוטוקול הבא, ניצור שחזורי עור אורגנוטיפיים תלת-ממדיים בעלי מקבילים עוריים ואפידרמליים מתאי עור אנושיים מבודדים.

כדי ליצור את המקבילה העורית של שחזורי העור, הניחו תוספות קרום בגודל 8 מיקרומטר בגודל נקבוביות בצלחת תרבית תאים של 24 בארות. עבור כל תוספת, יש להשהות מחדש 100,000 פיברובלסטים בתמיסת נטרול ג'ל. לאחר מכן, מ