מודל ניסיוני של עכבר מלנומה גרורתי: פלטפורמה לחקר הפוטנציאל הגרורתי של תאי מלנומה בריאות

- מודלים ניסיוניים של גרורות מסייעים להעריך את הפוטנציאל של תאי הגידול להתרבות ולהתרבות באתרים מסוימים לאחר הזרקה תוך וסקולרית. כדי להתחיל, להכין תרחיף חד תאי של תאי מלנומה בריכוז הרצוי באמצעות מדיום מתאים. טוענים את המתלה לתוך מזרק.

לאחר מכן, לרסן עכבר בתא ולאבטח אותו כך זנבו נגיש. סובב את העכבר 90 מעלות כדי לדמיין את הווריד הרוחבי שלו. השתמש במנורת חום כדי להגדיל את טמפרטורת הסביבה כדי להרחיב את וריד הזנב. כעת, הכניסו את המחט לכיוון הקצה הדיסטלי של הזנב והזריקו את תרחיף תאי המלנומה המוכן לווריד המורחב.

תאי הגידול הגרורתיים המוזרקים נודדים דרך מערכת הדם. בסופו של דבר, חלק מהתאים האלה יוצאים ממחזור הדם לאיברים מרוחקים כמו הריאות. תאי גידול אלה מסתגלים למיקרו-סביבה החדשה שלהם כדי להתרבות ולהקים מוקדים גרורתיים ניסיוניים.

בפרוטוקול הבא נדגים את הזרקת וריד הזנב של תאי מלנומה B16-BL6 למודל עכברי כדי לחקור את הפוטנציאל הגרורתי שלהם.

- לאחר שכל מתלי תאי B16-BL6 הוכנו, בחר עכבר. מחזיקים אותו בזנב, מנחים את החיה, מאחור תחילה, לרסן. כאשר פלג גופו העליון של העכבר נמצא בחדר הראשי וזנבו מחוץ למנגנון, המשיכו למשוך את החיה לקראת קצה הרסן.

לאחר מכן, הכנס את הבוכנה המעצורה והמשך ללחוץ על הבוכנה עד שהעכבר מאובטח. ברגע שהחיה נמצאת במקום, סובב את העכבר 90 מעלות כך שאחד מוורידי הזנב הרוחביים פונה כלפי מעלה. לאחר מכן, השתמש כרית אלכוהול כדי לנקות במרץ את הצד של זנב העכבר שבו הווריד גלוי ביותר.

כדי להתכונן להזרקה, ראשית, לאסוף 300 מיקרוליטר של 0.5 מיליון תאים לכל מיליליטר תרחיף לתוך מזרק. לאחר מכן, הוציאו בועות מהמזרק על ידי היפוכו, הזזת צידו ודחיפת הבוכנה. לאחר הסרת הבועות, הוציאו את תרבית התאים כדי להניב נפח סופי של 250 מיקרוליטר במזרק.

המשך להאריך את זנב העכבר ביד הלא דומיננטית. החזיקו אותו כך שהאצבע מעלה את הקצה הפרוקסימלי של הזנב והאגודל מדכא את החלק הדיסטלי. בעזרת היד הדומיננטית, מחדירים את המחט לווריד לכיוון הקצה הדיסטלי של הזנב, בזווית דקה כלפי מטה. לאחר מכן, הכנס את המחט עוד יותר, להתאים אותו כך שיתאים לזווית של וריד הזנב.

לאחר החדרת המחט, כסנטימטר אחד לווריד הזנב, מתחילים לדחוף את הבוכנה תוך החזקת המזרק יציב. עצור כל דימום על ידי החזקת גזה נגד אתר הכניסה. לאחר שתרחיף התא נפלט, הסר את המחט מהווריד והשלך אותה. לאחר מכן, הסר את הבוכנה מן הרסן והנח את העכבר בכלוב הנמען.