אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 3:02 דק׳ • April 30th, 2023
- במודלים ניסיוניים של עכברי סרטן, הסרטן המושרה בחיה דומה לסרטן אנושי בפנוטיפ. הם מספקים פלטפורמה יעילה להערכת היעילות של טיפולים פוטנציאליים. כדי לגרום למודל מסרטן עור דו-שלבי, ראשית, הכינו עכבר מורדם מדוכא חיסון במצב נוטה. יש לגלח את פרוותו כדי לחשוף את העור שמתחתיו. בשלב הראשון, יש למרוח חומר יוזם גידול רב עוצמה על העור הגבי החשוף.
זקיקי שיער אלה בשלב המנוחה או הטלוגן, מכילים בלוטות חלב לא פעילות. חוסר זרימת החלב הנובע מכך מאפשר הצטברות של התרכובת בתוך זקיקי שיער אלה. התרכובת מתפזרת לתוך התאים הסובבים אותה וגורמת למוטציה בגן המטרה, בעיקר בתאי גזע של זקיק השערה או בתאי גזע ראשוניים של קרטינוציטים. השינוי בביטוי הגן גורם להתחלת גידול בתאים אלה.
בשלב השני, יש למרוח על העור הגבי חומר מתאים לעידוד צמיחת הגידול שוב ושוב במרווחי הזמן הרצויים. הכימיקל ממריץ את התרחבות אוכלוסיית התאים היזומה. המשך התרבות התאים מוביל להיווצרות של גידולים מסרטנים הנקראים פפילומות.
בפרוטוקול הבא, אנו מראים את הדור של מודל עכבר דו-שלבי לסרטן בעור באמצעות הכימיקלים DMBA, מוטגן, ו- TPA, סוכן מעודד צמיחה.
- לפני תחילת הניסוי, אחסן עכברים תוקפניים בני 7 עד 9 שבועות בכלובים נפרדים כדי למנוע לחימה ונגעים בעור. להשראת פפילומה של העור, ראשית, יש לגלח את עורות הגב של חיות הניסוי, ולשקול את העכברים בנפרד. ארבעים ושמונה שעות לאחר הגילוח, השתמשו בפיפט כדי למרוח 50 מיקרוגרם DMBA ב-200 מיקרוליטר אצטון על האזור המגולח של כל עכבר מורדם.
לקידום פפילומה של העור, שבעה ימים לאחר מריחת DMBA יש לטפל בעור עם 5 מיקרוגרם TPA ב-200 מיקרוליטר אצטון, פעמיים בשבוע עד סוף הניסוי. בדקו את בעלי החיים לאיתור פפילומות וצלמו ותיעדו את גודלה של כל פפילומה בנפרד על גבי מפה, מדי שבוע.
מסה מוחשית בקוטר של יותר ממילימטר אחד נחשבת לפפילומה אם היא נשארת יותר משבוע.