בדיקת השתלה תת עורית: שיטה להשתלת תאי מלנומה מתורם למודל דג זברה מושתל

- במהלך בדיקת השתלת מלנומה, תאים סרטניים מדגי זברה נושאי גידול מושתלים במודל מושתל מדוכא חיסון כדי לחקור את התפתחות הגידול. התחילו בלקיחת דג זברה תורם נושא גידול שעבר המתת חסד וכרתו בניתוח את הגידול מגופו. מעבירים את הגידול לצלחת פטרי המכילה חיץ מתאים וטוחנים אותו לחתיכות קטנות.

לאחר מכן, triturate את שברי הגידול באמצעות פיפטה. זה מנתק את חתיכות הגידול לתוך תאים בודדים. כעת, טען את תרחיף תאי הגידול לתוך מזרק. לאחר מכן, הכינו מושתל מדוכא חיסון דג זברה קספר על נייר פילטר. גרסה מוטנטית זו של דג הזברה, חסרת פיגמנטציה, חסרה מלנוציטים ואירידופורים, מה שהופך אותה לשקופה ורב-תכליתית לניסויי הדמיה והשתלה.

לאחר מכן, הזריקו את תרחיף תאי המלנומה הטעון מראש באופן תת-עורי לאזור שמעל חלל הצפק, באמצע הדרך בין המוח האחורי לסנפיר הגבי של דג הזברה קספר. כעת, העבירו את הדג המקבל למים ועקבו אחריו כדי לצפות בהתפתחות הגידול. הגוף השקוף של דגי הזברה מסייע בהדמיה קלה של הגידולים המפותחים.

בפרוטוקול הבא נראה השתלת תאי מלנומה מתורם דג זברה נושא גידול מהונדס למודל דג קספר מושתל מדוכא חיסון.

- לאחר הקרנת דג קספר בן חודשיים עד שלושה חודשים עם הקרנת גמא של 25 Gy יום אחד לפני ההשתלה, יש לאפשר לדגים להתאושש במי דגים. השתמש tricaine כדי להרדים דג נושא גידול. חותכים את הגידול ומכניסים אותו לצלחת פטרי עם כ 5 מיליליטר