Name: נוהל לימוד החזרה Footshock-induced של קוקאין מחפשים אצל חולדות מעבדה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-06T18:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: למדו שיטה לחקירת החזרה של חיפוש קוקאין בחולדות מעבדה באמצעות הלם חשמלי קל. הפרוטוקול מאפשר לחוקרים לבחון את הקשר בין מתח להתמכרות ולפתח טיפולים יעילים יותר.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. השיכון התאקלמות בעלי חיים נהלים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זכר חולדות לונג אוונס, במשקל 300-325 גרם בזמן ההגעה ביבר, הם שוכנו בנפרד בכלובים מפלסטיק ממוחזר רגיל המכיל מיטה גלולה נייר, עם מכסים רשת תיל כדי להכיל בקבוקי מים ומזון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדות מתוחזקים על לוח זמנים אור כהה הפוך (אורות 19:00-07:00), בטמפרטורה, לחות ו שבשליטת ביבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מזון ומים הם כרצונך המודעה הזמינים כלובי הביתה לאורך הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדות מותר להתאקלם ביבר ותנאי דיור למשך שבוע לפני הניתוח. במהלך תקופה זו חולדות נותרים באין מפריע למעט ניקוי שגרתי, האכלה, ניטור של משקל. </li></ol> 2. צנתור תוך ורידי כירורגיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת הרדמה גז isoflurane, ושימוש סטנדרטי טכניקות ניתוחיות aseptic, חולדות מוכנים עם צנתרים silastic בעורק הצוואר הימני. היציאות קטטר לתוך צינורית שונה (פלסטיק אחת) על פני השטח של הגולגולת, ואת הצינורית הוא רכוב על הגולגולת עם ברגים "תכשיטנים מלט שיניים. לפרטים על ניתוחים, ראה 7, 8. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתום הניתוח, צנתרים סמוקות עם כ 0.2 מ"ל של תמיסה המכילה הפרין 50% (1,000 IU) דקסטרוז ו - 50% (25 g/50 מ"ל). חוסם פלסטיק ממוקם על פתיחת צינורית כדי להגן על קטטר מן ההריסות חיצוניים, כדי לשמור patency קטטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזמן הניתוח, ושוב ביום לאחר הניתוח, חולדות ניתנות 5 מ"ג / ק"ג, SC, Ketoprofen של משכך כאבים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדות מותר לפחות שבעה ימים כדי להתאושש מהניתוח לפני ניסויים. במהלך תקופה זו, חולדות נותרים ללא הפרעה בכלובים הביתה, להוציא את שגרת ניקיון האכלה, ניטור יומיומי של משקל ובריאות כללית. ביום האחרון של תקופת ההחלמה, צנתרים סמוקות עם פתרון הפרין / דקסטרוז (סעיף 2.2) כדי לוודא patency קטטר. </li></ol> 3. נוהלי ההתנהגות הנהלים כל התנהגות מבוצעות באמצעות ציוד שסופק על ידי מד Associates Inc (St Albans, VT). הציוד, שוכנו בחדר ייעודי, כולל ערכה של חדרי אופרנטית רגילה, כל אחד בתוך המתחם קול הפחתת. כל תא אופרנטית מצויד בשני מנופים נשלף, הן גבוהות 6.5 ס"מ מעל רצפת נירוסטה מוט. אור לבן גירוי ממוקם בדיוק מעל ידית אחת, ותגובות על המנוף (מה שנקרא מנוף "פעיל") לגרום התאורה סימולטני של האור לגירוי והפעלה של משאבת אינפוזיה (רזאל מכשירים מדעיים, סנט אלבנס, VT). המשאבה נמצאת על המדף רק מחוץ לחדר אופרנטית, אך בתוך המתחם קול הפחתת. המנוף השני (מה שנקרא מנוף "פעיל") נותר המורחבת בחדר לאורך כל הפרוצדורות, להגיב על מנוף זה ללא תוצאה. לבסוף, כל חדר מצויד כדי לספק זרם קבוע, לסירוגין, footshock שאין מנוס ממנו, חשמלי דרך השלגון לרצפה מוט פלדה. כל תנאי הניסוי (למשל, מצגות גירוי, חליטות בסמים, הלם הלידה), כמו גם נתונים הקלטה איחוד, נעשים דרך ממשקים בין לתאי בדיקה ותפעול של מרכזי המחשב מד Associates תוכנה (MED-IV). הניסוי מתבצע 5 שלבים: 1) הרגלה; 2) קוקאין SA: 3) ללא שימוש בסמים תקופה; 4) הכחדה, ו - 5) בדיקה לצורך החזרתו. בכל שלבי (למעט תקופה ללא שימוש בסמים), חולדות מועברים עבור הפעלות יום מחדר דיור לתאי מבחן אופרנטית. בעלי חיים מועברים בנפרד, בתוך מיכלי פלסטיק קטנים. מזון ומים אינם זמינים בתאי אופרנטית. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התרגלות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עשרים וארבע שעות שקדמו קוקאין הראשון SA מושב (. ראה סעיף 3.2), החולדות מותר להרגיל לתאי אופרנטית במהלך הפעלת 2-h יחיד; במהלך הפעלה זו את הידית הפעילה חזר בו. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קוקאין SA אימונים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני כל אימון יומי, חולדות הם שקלו בחדר הדיור. לאחר מכן הם מועברים לתאי אופרנטית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שיוצבו בתאי אופרנטית, מעיין הרכבה צינורות (המשתרעת משאבת עירוי תרופות) מחובר הגולגולת רכוב צינורית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדות מותר עצמית לנהל קוקאין HCl במהלך יום 3-h הפעלות, עבור סכום כולל של 8-10 ימים (בין אם ברציפות או עם שני "ימי חופש" להתערב בין הפגישות 5 ו - 6). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> SA הפעלות לסירוגין בבוקר (9:00-00:00) ואחר הצהריים (13:00-16:00). העיתוי של SA הפעלות הוא לסירוגין כי הנהלים בשלבים הבאים של הניסוי (כלומר הכחדה ובדיקה) להתרחש בשני times של יום עבור כל בעלי החיים (ראה סעיפים 3.4 ו - 3.5), ולכן הסדר זה מונע תופעות של בלבול זמן של יום על התנהגות סמים המבקשים הבאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל אימון הוא קדמה תקופה של 5 דקות התאקלמות, שבמהלכה חיות ממוקמים בתאי אופרנטית עם מנוף הפעיל חזר בו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתחילת האימון, מנוף הפעיל המורחבת לתוך תא והאור גירוי (הממוקם מעל הידית פעיל) מואר במשך 30 s. בנוסף, לאור בית מופעלת בשלב זה, ונשאר מואר במהלך הפגישה. יחד, אירועים אלה אות הזמינות של קוקאין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במהלך הפגישה, התגובות על המנוף פעיל מחוזקים על ידי עירוי 3-s של קוקאין (0.23 mg/65 μL, ד) על לוח זמנים קבוע יחס של 1-חיזוק. בד בבד עם הפעלת המשאבה עירוי משלוח סמים היא הפעלה 20-s האור הגירוי מנוף מעל הפעיל. זו מצגת 20-s אור מקבילה תקופה "פסק זמן" במהלכו נוספים התגובות מנוף פעיל נרשמות אך לא מחוזק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים מותר מקסימום של 50 חליטות בכל הפעלה של 3 שעות. אנו שגרתי להטיל את הקריטריון הזה בעבודה שלנו, הניסיון שלנו, מצאו כי הוא מפחית בצורה ניכרת, אם לא מבטל, מקרים של מוות כתוצאה ממנת יתר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסוף כל מפגש יומי, צנתרים החולדות הן סמוקות עם 0.2-0.3 מ"ל של תמיסת הפרין, דקסטרוז (ראה סעיף 2.2) לבין חולדות מוחזרים כלוב ביתם. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תרופות ללא תקופת <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הפגישה האחרונה קוקאין SA, חולדות נותרים באין מפריע (למעט ניקוי שגרתי, האכלה, ניטור של משקל) בכלוב בביתם מינימום של שבעה ימים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכחדה של התנהגות קוקאין מאומן <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדות מועברים לתאי אופרנטית בין 9:00-10:00 לאימונים הכחדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באביב הרכבה צינורות מחובר הגולגולת רכוב צינורית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהתאם לתנאי לאימונים SA, כל יום של אימון הכחדה היא קדמה תקופה של 5 דקות התאקלמות, שבמהלכה חיות ממוקמים בתאי אופרנטית עם מנוף הפעיל חזר בו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדות מקבלים מכן ארבעה 60 דקות הפעלות הכחדה, מופרדות 30 דקות במרווחים. כל מפגש 60 דקות הוא שיזם את האירועים באותו להתרחש בתחילת האימונים (כלומר, תאורה של אור את הבית, הרחבה של המנוף פעילה, 30 שניות תאורה של אור הגירוי מנוף מעל הפעיל). במהלך הפגישות, כל התנאים שהיו קיימים במהלך אימון SA נשמרים (כלומר, התגובה תלויות תאורה של אור גירוי במשך 20 שניות ו 3-s הפעלת המשאבה עירוי), חוץ מזה התגובות מנוף פעיל מתחזקים כבר לא עם חליטות קוקאין . במשך 30 דקות במרווחים המפרידים כל מושב 60 דקות הכחדה, מנוף הפעיל חזר והאור בבית כבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בסוף הפגישה 60 דקות האחרונות, חולדות מוחזרים כלוב ביתם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צעדים 3.4.1. ל 3.4.5. חוזרים על עצמם במשך 3 ימים רצופים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזרה של התנהגות קוקאין מאומנים על ידי מתח footshock <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדות מועברים לתאי אופרנטית בין 9:00-10:00 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שיוצבו בתאי אופרנטית, באביב הרכבה צינורות מחובר הגולגולת רכוב צינורית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהתאם לתנאי לאימונים הכחדה, לתקופה של 5 דקות התאקלמות מסופק, שבמהלכה חולדות ממוקמים בתאי אופרנטית עם מנוף הפעיל חזר בו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדות מקבלים מכן שני מפגשים של 60 דקות הכחדה (ראה 3.4.4). מופרדים על ידי מרווח של 30 דקות, זהים לאלה שניתן בשלב הכחדה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם לאחר הפגישה 60 דקות השני המספר הכולל של התשובות על מנוף הפעיל בעבר הוא פחות מ 15, בעלי חיים מקבלים מבחן השבה לאחר הפסקה של 30 דקות נוספות. בהפסקה של 30 דקות זו, footshock או אחיזת עיניים footshock (כלומר, לא footshock) מנוהלת (ראה 3.5.6).. אם הקריטריון של 15 או פחות תגובות על מנוף הפעיל אינה מושגת לאחר הפגישה השניה, מושב הכחדה נוסף (ים) ניתנת לפני בדיקות לצורך החזרתו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עשר דקות אחרי הפגישה 60 דקות second הכחדה (או לאחר כל מפגש 60 דקות נוספות הכחדה (ים) נדרש לקבוע את הקריטריון, הכחדה של 15 או פחות תגובות), בעלי חיים חשופים 20 דקות של מתח לסירוגין footshock חשמלי (או אחיזת עיניים footshock) בחדר אופרנטית. Footshock ניתנת בתקופה כאשר הפעיל את הידית חזר ואורות הבית גירוי הם כבויים. Footshock מועבר על פי לוח זמנים זמן משתנה במרווח ממוצע של 40 שניות (טווח של 1-70). הלם כל מועבר בעוצמה של 0.9 mA, והוא 0.5 של משך. פרמטרים אלה של footshock מבוססים על עבודה פיילוט נרחבבוצע במעבדה שלנו להקים השבה אמין של קוקאין המבקשים, בעוצמה משך מינימום של חשיפה footshock. על פי הפרמטרים האלה, חיות התערוכה תגובה רפלקסיבית קפיצה אל ההלם של 0.5, ומדי פעם לפלוט הניקוד קצר. למרות החיות הם נצפו לאורך תקופת ההלם, את עוצמת הזעזוע אינו בסדר גודל מספיק כדי לגרום סימנים בולטים יותר של מצוקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיד לאחר סיום הפגישה footshock, הפעיל את הידית מוארך וחולדות מותר מנוף לחץ בתנאים הכחדה (כלומר, התגובות אינן חיזק עם קוקאין, אבל האם להמשיך לגרום תאורה של אור גירוי והפעלה של משאבת עירוי ). פרק זמן זה מוגדר לבדוק את להחזרת הוא בדרך כלל 1-3 שעות משך. רוב להגיב מתרחשת בחלקה הראשון של הפגישה המבחן (הראשון 30 דקות h-1), ולאחר מכן מכבה לאורך תקופות הבדיקה המורחבת יותר. לפיכך, מבחן 1 שעות מספיקה כדי ללכוד את האפקט השבה, עם תקופות מבחן ארוך מתן פרופיל הכחדה מלאה יותר של ההשפעה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר העיצוב אמצעים חזר הוא מועסק, חולדה כל נבדק בתנאים footshock ואת דמה footshock. צעדים 3.5.1. ל 3.5.8 חוזרים ביום הבדיקה שלאחר מכן, ואת מבחן חלופי השבה (footshock או אחיזת עיניים footshock) מנוהל. </li></ol></li></ol> 4. נציג תוצאות: <img src="/files/ftp_upload/2265/2265fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. פרופילים מסוגנן בתגובה לפעילות על מנופים פעיל פעיל במהלך האימון מינהל עצמי, הכחדה, ובדיקה השבה. איור 1 מציג מסוגנן פרופילים תגובה אופרנטית, אופייני לאלה שהושגו במהלך השלבים השונים של פרוטוקול הניסוי המתואר להלן. 1. מנוף התגובות פעילים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קוקאין הכשרה SA. איור 1 (פאנל משמאל) מראה קוקאין טיפוסי SA הכשרה עקומת הכולל הן מספר חליטות והמספר הכולל של בתי מנוף פעיל. חולדות בדרך כלל לרכוש קוקאין SA בתוך 1-3 מפגשים, ופעם אחת את ההתנהגות היא הוקמה, לשמור על קצב יציב של צריכת סמים (בדרך כלל פחות מ -20% מהשונות בין-session) על ההפעלות שלאחר מכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכחדה של התנהגות קוקאין מאומן. ניתן לראות באיור 1 (פאנל באמצע), כי ביום 1 הכחדה, כאשר התגובות הן לא חיזק בפעם הראשונה, המספר הכולל של התשובות על הידית הפעילה בתחילה גבוה יותר מאשר ב סיום שלב ההכשרה (המקביל ל "פרץ הכחדה" מה שנקרא); בהדרגה, על פני ארבעה מפגשים הכחדה, להגיב פוחתת. בימים 2 ו -3 של הכחדה, התאוששות מסוימת של מגיבים (יחסית לזה שנצפה במהלך הפגישה האחרונה של היום הקודם) אפשר לראות, עם זאת, התגובות הן בדרך כלל פחות מאשר בתחילתו של היום הקודם הכחדה, ו הכחדה כלל ההכנסות בקצב מהיר יותר במהלך ארבעת הפגישות לאותו יום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזרה של קוקאין המבקשים. ניתן לראות באיור 1 (פאנל מימין) כי 20 דקות של חשיפה footshock לסירוגין גורם לעלייה שאינם מחוזקים להגיב על המנוף פעיל, יחסית לזה שנצפה בסוף הפגישה הקודמת הכחדה. Footshock גם גורם לעלייה להגיב יחסית לזה שנצפה בתנאים שבהם דמה footshock מנוהל. לפיכך, השבה של קוקאין על ידי המבקשים להדגיש footshock ניתן לבטא גם כ: 1) מספר גדל של אי מחוזק התגובות לאחר חשיפה footshock, יחסית לתגובות בפגישה לפני הכחדה footshock או 2) את מספר גדל של אי - חיזוק תגובות לאחר יחסי footshock כדי footshock דמה. </li></ol> 2. מנוף התגובות פעילה ניתן לראות באיור 1 (הקו האדום), כי לאורך כל שלבי הניסוי, יש רמות נמוכות מאוד בתגובה הקשורים המנוף פעיל. עם זאת, עלייה מתונה להגיב על המנוף הזה הוא ציין לפעמים חשיפה הבאים להדגיש footshock. גם במקרים בהם כגון עלייה להגיב מתרחשת, גידול המנוף פעיל להגיב נוטה להיות הרבה יותר באופן יחסי.

<ol><li>Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+reinstatement+model+of+drug+relapse%3A+history%2C+methodology+and+major+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings.</a> Psychopharmacology. 168 (1-2), 3-20 (2003).</li>
<li>de Wit, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Priming+effects+with+drugs+and+other+reinforcers%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Clinical+Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Priming effects with drugs and other reinforcers.</a> Experimental and Clinical Psychopharmacology. 4, 5-10 (1996).</li>
<li>Bossert, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiology+of+relapse+to+heroin+and+cocaine+seeking%3A+An+update+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Neurobiology of relapse to heroin and cocaine seeking: An update and clinical implications.</a> Eur J Pharmacol. 526 (1-3), 36-50 (2005).</li>
<li>Shalev, U., Grimm, J. W., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiology+of+relapse+to+heroin+and+cocaine+seeking%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Rev%22%5BJournal%5D)">Neurobiology of relapse to heroin and cocaine seeking: a review.</a> Pharmacol Rev. 54 (1), 1-42 (2002).</li>
<li>Shaham, Y., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+reinstates+heroin-seeking+in+drug-free+animals%3A+an+effect+mimicking+heroin%2C+not+withdrawal%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Stress reinstates heroin-seeking in drug-free animals: an effect mimicking heroin, not withdrawal.</a> Psychopharmacology. 119, 334-341 (1995).</li>
<li>Shaham, Y., Erb, S., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress-induced+relapse+to+heroin+and+cocaine+seeking+in+rats%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Brain+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Stress-induced relapse to heroin and cocaine seeking in rats: a review.</a> Brain Res Brain Res Rev. 33 (1), 13-33 (2000).</li>
<li>Erb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+injections+of+CRF+reinstate+cocaine+seeking+in+rats+after+postinjection+delays+of+up+to+3+h%3A+an+influence+of+time+and+environmental+context%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Central injections of CRF reinstate cocaine seeking in rats after postinjection delays of up to 3 h: an influence of time and environmental context.</a> Psychopharmacology (Berl). 187 (1), 112-120 (2006).</li>
<li>Erb, S., Shaham, Y., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+reinstates+cocaine-seeking+behavior+after+prolonged+extinction+and+a+drug-free+period%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Stress reinstates cocaine-seeking behavior after prolonged extinction and a drug-free period.</a> Psychopharmacology. 128, 408-412 (1996).</li>
<li>Tran-Nguyen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-dependent+changes+in+cocaine-seeking+behavior+and+extracellular+dopamine+levels+in+the+amygdala+during+cocaine+withdrawal%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Time-dependent changes in cocaine-seeking behavior and extracellular dopamine levels in the amygdala during cocaine withdrawal.</a> Neuropsychopharmacology. 19, 48-59 (1998).</li>
<li>Stretch, R., Gerber, G. J., Wood, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+affecting+behavior+maintained+by+response-contingent+intravenous+infusions+of+amphetamine+in+squirrel+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Physiology+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Factors affecting behavior maintained by response-contingent intravenous infusions of amphetamine in squirrel monkeys.</a> Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 49, 581-589 (1971).</li>
<li>Shaham, Y., Rodaros, D., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinstatement+of+heroin-reinforced+behavior+following+long-term+extinction+Implications+for+the+treatment+of+relapse+to+drug-taking%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Reinstatement of heroin-reinforced behavior following long-term extinction Implications for the treatment of relapse to drug-taking.</a> Behavioural Pharmacology. 5, 360-364 (1994).</li>
<li>Wit, H. de, Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinstatement+of+cocaine-reinforced+responding+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Reinstatement of cocaine-reinforced responding in the rat.</a> Psychopharmacology. 75, 134-143 (1981).</li>
<li>Erb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpha-2+adrenergic+receptor+agonists+block+stress-induced+reinstatement+of+cocaine+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Alpha-2 adrenergic receptor agonists block stress-induced reinstatement of cocaine seeking.</a> Neuropsychopharmacology. 23 (2), 138-150 (2000).</li>
<li>Shalev, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+and+relapse+to+drug+seeking+in+rats%3A+studies+on+the+generality+of+the+effect%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect.</a> Psychopharmacology (Berl). 150, 337-346 (2000).</li>
</ol>

ניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות והתקנות שנקבעו על ידי המועצה הקנדית של טיפול בבעלי חיים באוניברסיטת טורונטו ועדה לטיפול בבעלי חיים. ההפקה של הוידאו הזה מומן על ידי מד Associates, Inc המייצרת את המכשיר משמש במאמר זה.

במהלך העשורים האחרונים, שלוש וריאציות של ההליך השבה SA פותחו ללמוד מחדש של סמים המבקשים בחולדות מעבדה וקופים. ההבדלים המגדירים את וריאציות פרוצדורליים מתייחסים בעיקר להתרחש אם התרופה SA, הכחדה, הפעלות בדיקות בתוך באותו יום או בימים שונים 1. ההליך שתיארנו במאמר זה הוא נפוץ המכונה &quot;בתוך בין&quot; וריאציה הפגישה, כי התרופה SA מתרחשת במהלך מפגשי יום (כלומר, בדרך בין-session) כי הם נפרדים מהכחדה הפעלות מבחן, אבל הכחדה בדיקות להתרחש באותו יום (כלומר, באופן בתוך-session) [למשל, 7, 9]. לחלופין, מה שנקרא &quot;בין המפגשים&quot; הנהלים, כל שלבי הניסוי להתרחש ברצף, כך SA, הכחדה, הפעלות בדיקות מקבלים בימים שונים (כלומר, כל השלבים הם בין הפגישות) [למשל, 8, 10, 11]. לעומת זאת, הליכי להשלים &quot;במסגרת מפגשי&quot;, הכשרה SA, הכחדה, הפעלות לבדוק את כל מתרחשים באותו יום [לדוגמה, 12]. למרות שיש מתפרסמים דיווחים על השבה footshock-Induced של התרופה המבקשים באמצעות וריאציות שונות של ההליך השבה, מצאנו זו מלחץ (לפחות אצל בעלי חיים עם היסטוריה של קוקאין SA) כדי להיות יעילים ביותר כאשר הכחדה ובדיקה להתרחש באותו יום (כלומר, בצורה &quot;בתוך בין&quot; מפגשים). לחלופין, יש לנו הצלחה עם קבלת השבה אמין footshock-Induced של קוקאין המבקשים באמצעות לחלוטין &quot;בין המפגשים&quot; נוהל, אבל רק בתנאים שבהם בעלי חיים הם שוכנו בתאי SA לאורך הניסוי 8, או לפחות במהלך הכחדה ובדיקה 13. החיסרון הזה בין מפגשים הגישה, על כי המתואר בפרוטוקול הנוכחי, הוא שהוא מגביל את מספר נושאים אשר ניתן לאמן ונבדק בבת אחת, ובכך מקטין את היעילות של איסוף הנתונים. אמנם בתנאים של הפרוטוקול הנוכחי רק קבוצה אחת של בעלי חיים ניתן לכבות ונבדק בזמן נתון, תפוקה גדולה יותר ניתן להשיג על ידי מדהים של שבוע את מועד ההתחלה של שלב ההכשרה SA עבור שתי קבוצות של חולדות. בתרחיש זה, קבוצה ראשונה של עכברים יכולים להזין את השלב ללא שימוש בסמים כמו הקבוצה השנייה נכנס השבוע 2 אימונים SA, ו, לאחר מכן, הכחדה ובדיקה יכול להתבצע בקבוצה הראשונה, ואילו הקבוצה השנייה היא התרופה שלה ללא שלב. גישה זו מאפשרת שימוש יעיל יותר של משאבים מאיצה את קצב רכישת נתונים, בעוד המוביל השבה footshock-Induced מאוד יעיל ואמין. חשוב לציין, בהליך שלנו, הכחדה של התנהגות בעבר סמים חיזוק ובדיקה להחזרת מתרחשת בנוכחות של התרופה הקשורים רמזים. למרות שאנו לא ביצעו אימונים הכחדה או בדיקה בהיעדר רמזים הקשורים לסמים, היא ההבנה שלנו, המבוסס על תקשורת אישית, כי הלחץ עשוי למעשה להיות יעיל וגורם השבה כאשר בדיקות מתרחשת בהיעדר רמזים כבוי ( לפחות במקרה של בעלי חיים עם היסטוריה של קוקאין SA). בחינה שיטתית של משתנה זה, ואת ההשלכות התיאורטיות שהוא מציב, היא שאלה חשובה למחקר עתידי. גורם פרוצדורליים הסופי תגובה צווי היא כי ההשפעה של הלחץ footshock על השבה כנראה רגישה מאוד מניפולציות של ההקשר. לדוגמה, מתח footshock יעיל רק גרימת מחדש של סמים המבקשים אם הוא מנוהל על הסביבה שבה התרופה SA ו הכחדה להתרחש, כלומר, footshock לא להחזיר סמים המבקשים אם החשיפה הלחץ מתרחשת בהקשר רומן, דבר המצביע על אינטראקציה חשוב בין גורם הדחק והסביבה התרופה השפעותיו על השבה 14. ב, המסקנה נהלים footshock השבה, כמו אלה שתוארו במאמר זה, שימשו בהצלחה ניכרת על מנת להבהיר את המנגנונים ההתנהגותיים הנוירוביולוגי בסיסיים המסדירים את היחסים בין מתח הישנות סמים. אכן, הליכים אלה, כאשר שהותאמה pretreatments תרופתי או מניפולציות neurochemical מיקוד מצעים עצבי ספציפי, יכולים לשמש כלים רבי עוצמה באפיון לנוירוביולוגיה של החזרת התרופה המבקשים על ידי מתח.

<table><tbody><tr><td>ערכה בסיסית לבדיקת ניהול עצמי של תרופות לחולדות</td><td></td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>MED-008-CT-B1</td><td></td></tr><tr><td>תא בידוד אקוסטי MDF עמוק וגבוה במיוחד</td><td>רכיב של ערכה בסיסית לבדיקת ניהול עצמי של תרופות לחולדות</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>ENV-018MD</td><td></td></tr><tr><td>תא בדיקה מודולרי סטנדרטי עם חלק עליון להזרקת תרופות ומגש פסולת</td><td>רכיב של ערכה בסיסית לבדיקת ניהול עצמי של תרופות לחולדות</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>ENV-008CT</td><td></td></tr><tr><td>רצפת רשת מפלדת אל-חלד</td><td>רכיב של ערכה בסיסית לבדיקת ניהול עצמי של תרופות לחולדות</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>ENV-005</td><td></td></tr><tr><td>תאורת בית, עם כיסוי, 28V</td><td>רכיב של ערכה בסיסית לבדיקת ניהול עצמי של תרופות לחולדות</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>ENV-215M</td><td></td></tr><tr><td>נורת גירוי 1&amp;#8221; עם עדשה לבנה</td><td>רכיב של ערכה בסיסית לבדיקת ניהול עצמי של תרופות לחולדות</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>ENV-221M</td><td></td></tr><tr><td>מנוף תגובה נסוג בעל פרופיל נמוך</td><td>רכיב של ערכה בסיסית לבדיקת ניהול עצמי של תרופות לחולדות</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>ENV-112CM</td><td></td></tr><tr><td>חבילת SmartCtrl עם 8 כניסות/16 יציאות</td><td>רכיב של ערכה בסיסית לבדיקת ניהול עצמי של תרופות לחולדות</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>DIG-716P2</td><td></td></tr><tr><td>משאבת מזרק במהירות אחת, 3.33 RPM</td><td>רכיב של ערכה בסיסית לבדיקת ניהול עצמי של תרופות לחולדות</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>PHM-100</td><td></td></tr><tr><td>ערכה להזרקה עצמית לחולדות</td><td>רכיב של ערכה בסיסית לבדיקת ניהול עצמי של תרופות לחולדות</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>PHM-119B-23-D</td><td></td></tr><tr><td>מכלול זרוע להגשת תרופות</td><td>רכיב של ערכה בסיסית לבדיקת ניהול עצמי של תרופות לחולדות</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>PHM-110-SAI</td><td></td></tr><tr><td>מעורר רתיעה בגלי ריבוע</td><td>רכיב להשראת סטרס באמצעות שוק חשמלי בכף הרגל</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>ENV-414S</td><td></td></tr><tr><td>רתמה רשומה לניתוק מהיר עבור רצפת רשת מפלדת אל-חלד</td><td>רכיב להשראת סטרס באמצעות שוק חשמלי בכף הרגל</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>ENV-005-QD</td><td></td></tr><tr><td>כבל יציאת שוק</td><td>רכיב להשראת סטרס באמצעות שוק חשמלי בכף הרגל</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>SG-219G-10</td><td></td></tr><tr><td>תוכנת MED-PC IV</td><td>תוכנה</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>SOF-735</td><td></td></tr></tbody></table>

נוהל לימוד החזרה footshock-induced של קוקאין מחפשים אצל חולדות מעבדה

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats 

ההיבט הערמומי ביותר של התמכרות לסמים היא נטייה גבוהה להישנות. מודלים בבעלי חיים של נסיגה, המכונה הליכי השבה, נעשה שימוש נרחב כדי ללמוד את לנוירוביולוגיה ואת הפנומנולוגיה של הישנות להשתמש בסמים. למרות שינויים פרוצדורליים התפתחו במהלך העשורים האחרונים, הנהלים השבה קונבנציונלי ביותר מבוססים על מודל הניהול העצמי (SA) סמים. במודל זה, חיה מאומן לבצע תגובה אופרנטית כדי להשיג סמים. כתוצאה מכך, התנהגות היא כבויה על ידי חיזוק הלנת בתגובה תלויות. החזרה של המחפשים תרופה מופעלת מכן על ידי אירוע בדיד, כגון זריקה של התרופה הכשרה חשיפה מחדש, לתרופה הקשורים רמזים, או חשיפה 1 מלחץ. הליכי החזרה פותחו במקור כדי לחקור את היכולת של חשיפה בלתי מותנית חריפה לתרופה הכשרה להחזיר סמים המבקשים אצל חולדות וקופים 1, 2. הליכי החזרה מאז שונה כדי ללמוד את התפקיד של גירויים סביבתיים, כולל סמים הקשורים רמזים וחשיפה צורות שונות של מתח, של נסיגה לתרופה המבקשים 1, 3, 4. במשך 15 השנים האחרונות, אחד מעמודי התווך של הספרות השבה כבר על עצמו את התפקיד של מתח הישנות סמים. אחת הצורות הנפוצות ביותר של מתח לחקר הקשר הזה הוא חשיפה אקוטית כדי קלה, footshocks לסירוגין חשמלי. היכולת של מתח footshock לעורר מחדש של סמים המבקשים הודגם במקור בחולדות עם היסטוריה של הרואין לווריד SA 5 על ידי שחם ועמיתיו (1995). כתוצאה מכך, ההשפעה היתה להכליל חולדות עם היסטוריה של קוקאין תוך ורידי, מתאמפטמין, ו SA ניקוטין, כמו גם אתנול אוראלי SA 3, 6. למרות footshock-Induced השבה של המבקשים התרופה יכולה להיות מושגת אמינה וחסונה, זה אפקט נוטה להיות רגיש מצדי משתנים מסוימים. אלה כוללים את הסדר של הפעלות הכחדה השבה הבדיקה, את עוצמת ומשך הלחץ footshock, ואת הנוכחות של סמים הקשורים רמזים במהלך הכחדה בדיקות לצורך החזרתו. כאן אנו מציגים פרוטוקול להחזרת footshock-Induced של קוקאין המבקשים כי השתמשנו בהצלחה עקבי לחקור את הקשר בין מתח קוקאין המבקשים.

מודלים בבעלי חיים של נסיגה, המכונה הליכי השבה, נעשה שימוש נרחב כדי ללמוד את התפקיד של הלחץ הישנות כדי לחפש סמים. כאן אנו מדווחים על שיטה של ​​גרימת מחדש של קוקאין המחפשים בחולדות מעבדה באמצעות חשיפות חריפה על footshock, קלה חשמלי לסירוגין.

נוהל לימוד החזרה Footshock-induced של קוקאין מחפשים אצל חולדות מעבדה

ההיבט השCי ביותר של התמכרויות לסמים הוא הנטייה הגבוהה להישחח (relapse). מודלים חיות של הישחח, המכונים נהלי החזרה (reinstatement procedures), היו...

סרטון זה מדגים פרוצדורה למחקר שיטתי של הקשר בין סטרס לבין נסיגה (relapse) להתנהגות חיפוש קוקאין. בחולדות מעבדה, החולדות מאומנות תחילה להחדיר לעצמן קוקאין באופן תוך-ורידי באמצעות לחיצה על מנוף לאורך מספר מפגשים יומיים במהלך הפאזה החשוכה או הפעילה של מחזור אור-חושך בן 12 שעות. לאחר מכן, תגובת הלחיצה על המנוף המחוזקת על ידי קוקאין מוכחדת לאורך מספר מפגשים על ידי מניעת חיזוק המותנה בתגובה.התנהגות לחיצת המנוף שהכחדה משוחזרת לאחר מכן על ידי חשיפת בעלי החיים להלם רגלי לסירוגין מיד לפני מתן גישה למנוף שחוזק בעבר באמצעות קוקאין. למרות ששחזור חיפוש קוקאין המושרה על ידי הלם רגלי הוא אפקט שהושג באופן עקבי על ידי מספר קבוצות מחקר, הוא עלול להיות רגיש למשתנים פרמטריים מסוימים. הפרוטוקול שנתאר משקף את מאמצינו המוצלחים למקסם את הפרמטרים הללו כדי להשיג שחזור אמין וחזק של חיפוש קוקאין בחתולים המושרה על ידי הלם רגלי.השיטות שאנו מתארים כאן היום, ווריאציות שלהן, יכולות לשמש לבחינת שאלות מפתח בתחום ההתמכרות לסמים, ובפרט, הן יכולות לשמש לבחינת המנגנוסים ההתנהגותיים והנוירוביולוגיים הבסיסיים המתווכים את הקשר בין סטרס לבין חזרה (relapse) לחיפוש סמים. הציוד המשמש לחקר השחזור (reinstatement) של חיפוש קוקאין המושרה על ידי שוק חשמלי בכף הרגל כולל סט של תאי תניית-פעולה (operant chambers) סטנדרטיים, שכל אחד מהם נמצא בתוך תא בידוד אקוסטי. כל הציוד סופק על ידי Med Associates Incorporated.כל תא אופרנטי מצויד בשני מנופים נסוגים, שניהם מוגבהים 6.5 סנטימטרים מעל רצפת מוטות פלדת אל-חלד. נורת גירוי לבנה ממוקמת מעל לאחד המנופים. המנוף המכונה "המנוף הפעיל" ותגובות עליו גורמים להדלקה סימולטנית של נורת הגירוי ולהפעלת משאבת עירוי הממוקמת על מדף ממש מחוץ לקצה העליון של התא.בתוך תא בידוד הרעש, המנוף השני, המכונה המנוף הלא-פעיל, נשאר פשוט במצב פתוח בתוך התא. לאורך כל ההליכים הניסויים, תגובה למנוף זה אינה גוררת השלכות. לבסוף, כל תא מצויד למתן זרם חשמלי קבוע, לסירוגין וניתן להימנע ממנו, כהלם חשמלי לכף הרגל באמצעות סקראמבלר (scrambler) לרצפת מוטות הפלדה.כל תנאי הניסוי, כמו גם רישום וגיבוי הנתונים, מבוצעים באמצעות ממשקים בין תאי הבדיקה למחשב מרכזי המפעיל תוכנה תואמת. לפני כל סשן יומי, המתרחש במהלך השלב החשכי או הפעיל של מחזור האור והחושך, שקלו את החולדות בחדר הגידול והעבירו אותן לתאי התוצאה (operant chambers).24 שעות לפני מפגש ההזרקה העצמית הראשון של קוקאין, אפשרו לחולדות להתרגל לתאי ההפעלה במהלך מפגש בודד של שעתיים. במהלך מפגש זה, המנוף הפעיל נסוג והמנוף הבלתי פעיל בולט. בתחילת מפגשי האימון היומיים, חברו מכלול קפיץ וצינורית לקנולה המותקנת בגולגולת והכניסו את החולדה לתא ההפעלה. הקנולה מחוברת לקטטר celesta שהושתל באופן כירורגי בווריד jugular הימני כדי לאפשר הזרקה של התרופה לווריד.אפשרו לחולדות להעניק לעצמן קוקאין במהלך מפגשים יומיים של שלוש שעות, למשך שמונה עד 10 ימים בסך הכל. הקדימו לכל מפגש אימון תקופת הסתגלות של חמש דקות, במהלכה ימוקמו בעלי החיים בתאי האופרנט כאשר המנוף הפעיל נסוג. כדי להתחיל מפגש אימון, הוציאו את המנוף הפעיל אל תוך התא והאירו את נורת הגירוי למשך 30 שניות.בנוסף, הפעילו בשלב זה את תאורת החדר והשאירו אותה דולקת לאורך כל הסשן. אירועים אלו יחד מאותתים על זמינות הקוקאין במהלך הסשן. תגובות במנוף הפעיל מחוזקות על ידי עירוי קוקאין למשך שלוש שניות בלוח חיזוק של יחס קבוע 1 (fixed ratio 1), במקביל להפעלת עירוי, משאבה והגשת התרופה בעקבות הפעלתו של נורית הגירוי מעל המנוף הפעיל.הצגה זו של האור ה-22 תואמת לתקופת הפסקה (time out), במהלכה נרשמות תגובות פעילות נוספות של המנוף אך הן אינן מחוזקות. במהלך כל סשן בן שלוש שעות, מותרים לבעלי החיים עד 50 עירויים כדי להפחית את הסבירות למנת יתר. בסוף כל סשן יומי, שטפו את הקטטרים של החולדה עם 0.2 עד 0.3 milliliters של תמיסת heparin dextro ולאחר מכן החזירו אותם לכלוב הבית.לאחר מפגש ההזרקה העצמית האחרון של קוקאין, השאירו את החולדות ללא הפרעה בכלוב הבית למשך מינימום של חמישה עד שבעה ימים. כאשר פרק זמן זה יעבור, העבירו את החולדות לתאי האופרנט לאימון הכחדה, בהתאם לתנאי האימון. לפני כל יום של אימון הכחדה, בצעו תקופת הסתגלות של חמש דקות, שבה החיות ימוקמו בתאי האופרנט כאשר המנוף הפעיל נסוג.לאחר מכן, העבירו את החולדות ארבעה סשנים של הכחדה (extinction) בני 60 דקות, המופרדים במרווחי זמן של 30 דקות. כל סשן של 60 דקות יחל באותם אירועים שהתרחשו בתחילת סשני האימון לאורך כל הסשנים. שמרו על כל התנאים שהיו קיימים במהלך האימון, למעט העובדה שלא יחולו יותר חיזוקים של תגובות למינוף הפעיל באמצעות עירוי קוקאין במהלך מרווחי הזמן של 30 דקות המפרידים בין כל סשן הכחדה של 60 דקות.הסעו את המנוף הפעיל וכבו את תאורת החדר בסיום הסשן האחרון שנמשך 60 דקות. החזירו את החולדות לכלוב הבית שלהן. שלבים אלו חוזרים על עצמם במשך שלושה ימים רצופים.העבירו את החולדות לתאי הלמידה האופרנטית כפי שנעשה במהלך שלב ההכחדה, בהתאם לתנאי האימון וההכחדה. אפשרו תקופת הסתגלות של חמש דקות, במהלכה הן יושמו בתאי הלמידה האופרנטית כאשר המנוף הפעיל נסוג. לאחר מכן, העבירו את החולדות שני מפגשי הכחדה של 60 דקות, המופרדים במרווח של 30 דקות, בזהים לאלו שניתנו במהלך שלב ההכחדה.אם לאחר המפגש השני שנמשך 60 דקות, מספר התגובות הכולל במנוף שהיה פעיל קודם לכן הוא נמוך מ-15, בצעו עבור בעלי החיים מבחן להחזרה (reinstatement) לאחר מרווח נוסף של 30 דקות שבו ניתן שוק חשמלי ברגל או שוק דמה. החל מ-10 דקות לאחר מפגש ההכחדה השני שנמשך 60 דקות, חשפו את בעלי החיים ל-20 דקות של שוק חשמלי לסירוגין ברגל, סטרס או שוק דמה בתוך תא האופרנט. ניתן את השוק החשמלי ברגל בזמן שהמנוף הפעיל נסוג ונורות התא והגירוי כבויות.מיד לאחר סיום סשן הלם הרגל, הוצא את המנוף הפעיל ואפשר לחולדה ללחוץ על המנוף בתנאי הכחדה. פרק זמן זה מוגדר כסשן מבחן השחזור ובדרך כלל נמשך בין שעה לשלוש שעות. בסיום סשן המבחן, הוצא את החולדה מהתא והחזר אותה לכלוב המגורים שלה.כעת נציג מספר תוצאות מייצגות. מוצגת כאן עקומת אימון טיפוסית של מתן עצמי של קוקאין, הכוללת את המספר הכולל של ההזרקות ואת המספר הכולל של לחיצות על המקשים הפעילים והלא-פעילים. חולדות לומדות בדרך כלל מתן עצמי של קוקאין בתוך אחד עד שלושה מפגשים, ולאחר ביסוס ההתנהגות, הן שומרות על קצב יציב של צריכת הסם במפגשים הבאים עד ליום הראשון של ההכחדה.כאשר תגובות אינן מקבלות חיזוק בפעם הראשונה, מספר התגובות הכולל במנוף הפעיל הוא גבוה מאוד בתחילה, אך הוא פוחת בהדרגה לאורך ארבעה מפגשי הכחדה בימים השני והשלישי של ההכחדה. ניתן להבחין בחלק מהתאוששות של התגובה, עם זאת, מספר התגובות הוא בדרך כלל נמוך יותר מאשר בתחילת יום ההכחדה הקודם, ותהליך ההכחדה generally מתקדם במהירות רבה יותר לאורך ארבעת המפגשים של אותו יום. תגובה שאינה מקבלת חיזוק במנוף הפעיל.לאחר 20 דקות של חשיפה להלם רגליים לסירוגין, סטרס גורם לעלייה בתגובה במנוף שהיה פעיל קודם לכן ביחס למנוף הלא פעיל. הלם רגליים גורם גם לעלייה בתגובה ביחס לזו שנצפתה. בתנאים שבהם ניתן הלם רגליים מדמה, ברגע שהפרוצדורות המתוארות נלמדו במלואן, ניתן להשלימן תוך כשישה שבועות.מניסיוננו, ההצלחה מומקסמת כאשר הפרוצדורה מבוצעת באופן שיטתי ועל ידי ידיים מיומנות. הפרוצדורות שתיארנו כאן ניתנות להתאמה בקלות כדי להכיל מניפולציות פרמקולוגיות או נוירוכימיות שונות המכוונות לסובסטרטים נוירונליים ספציפיים. בתוספת של מניפולציות כאלו, פרוצדורת השוק ברגל להשראה ולביטוי יכולה לשמש ככלי רב עוצמה לאפיון הנוירוביולוגיה של הכחדת נטילת סמים והחזרה לחיפוש סמים עקב סטרס.

a-procedure-for-studying-footshock-induced-reinstatement-cocaine

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

אופרנטית עצמית הממשל העדפה מקום ממוזג התרופה (CPP) נהלים משמשות בהרחבה במחקר מודל הרכיבים השונים של חיזוק סמים, צריכת, והתמכרות בבני אדם. בדו"ח זה, אנו בשילוב שיטות התקשרות עצמית הממשל המסורתי גישה חדשנית ללימוד חיזוק בסמים והתמכרות אצל חולדות.

רומן Apparatus ואת שיטת חיזוק והתרופות

בתגובה לאותות מזון או תרופות לזווג עליות במהלך תקופה של התנזרות זה עשוי להתייחס רגישות מוגברת להתנהגויות הישנות. כאן אנו פרט בהליך להערכת זה "דגירה של השתוקקות" אצל חולדות אשר למילוי עצמי סוכרוז.

שיטה כללית להערכת דגירה של השתוקקות סוכרוז בחולדות

מקור: Rich, M. T., et al. שימוש באופטוגנטיקה כדי להפוך את הנוירופלסטיות ולעכב חיפוש קוקאין בחולדות. J. Vis. Exp. (2021)סרטון זה מדגים את השימוש באופטוגנטיקה כדי לגרום לדיכאון ארוך טווח (LTD) בגרעין הגניקולט המדיאלי לסינפסות אמיגדלה לרוחב (MGN-LA), ומחליש התנהגות של חיפוש נרקוטי המושרה על ידי רמזים במודל חולדות. החולדה, שהושתלה בניתוח עם סיבים אופטיים והותמרה ויראלית כדי לבטא תעלות יונים רגישות לאור, עוברת גירוי אופטוגנטי עם פולסים אופטיים בתדר נמוך, מה שמפעיל שחרור נוירוטרנסמיטרים והיחלשות...

אינדוקציה אופטוגנטית של דיכאון ארוך טווח לדיכוי התנהגות מחפשת נרקוטיקה בחולדות

מאמר זה מתאר כיצד microinject וקטורים ויראליים למוח עכבר ולאחר מכן לבדוק בפרדיגמה העדפת מקום ממוזגת הכוללת שלב רכישה, הכחדה והחזרה.

Microinjection Stereotaxic של וקטורים ויראליים הבעת Cre recombinase כדי ללמוד את התפקיד של גני מטרה בהעדפות מקום אוויר קוקאין

הליך המאפשר הדגמה של הגדלת החזקה של סמים המבקשים בחולדות מוגבלות מזון מתואר. לאחר אימון הרואין מנהל עצמי, חולדות לעבור תקופת התנזרות, בסביבה נקיה מסמים, שבמהלכו הם אסירי מזון מוגבל. מבקשי תרופה נבדקו ולאחר מכן בסביבה הקשורים בסמים.

פרוצדורה כדי לחקור את ההשפעה של הגבלת מזון ממושכת בהרואין מחפש אצל חולדות מתנזרות

פרוטוקול זה נועד לאפשר לחוקרים לערוך ניסויים שנועדו לבחון היבטים אלה של התמכרות באמצעות מבחני העדפת מקום מותנית ורגישות התנהגותית תנועתית.

הערכת רגישות התנהגות נגרמת קוק העדפות מקום אלפו עכברים

הסימן תגובתיות נתפסת כמו רגישות רמזים מקושר עם התנסויות בסמים לתרום תשוקה, נסיגה בבני אדם מפוכח. תגובתיות cue הוא המודל בחולדות על ידי מדידה התמצאות כל מעסיק כלפי סמים-הקשורים רמזים כי התוצאות בהתנהגות הגישה התיאבון במבחן תגובתיות cue בעקבות ניהול עצמי והכריחו התנזרות.

פרוטוקול למדידת Cue תגובתיות במודל של עכברים של הפרעה לשימוש בקוקאין

פרוטוקול זה מתאר את העדפה המקום ממוזגים (CPP) כמודל של relapse. הליך זה מאפשר את המדידה של relapse בחיות מעבדה, שקילת ההשפעה של התרופה-הקשורים רמזים סביבתיים כמו התשוקה והוא relapse בשנת מכורים נמנעים כרגע המוקד של תוכניות טיפול שימוש בסמים.

החזרה של שוחרת סמים בעכברים באמצעות הפרדיגמה העדפה המקום ממוזגים

השיטות המתוארות כאן מתארות הליך המשמש להיפוך אופטוגנטי של פלסטיות הנגרמת על ידי קוקאין במעגל רלוונטי התנהגותית בחולדות. גירוי אופטי מתמשך בתדר נמוך של סינפסות תלמו-אמיגדלה גורם לדיכאון ארוך טווח (LTD). In vivo המושרה אופטיגנטית LTD בחולדות שחוו קוקאין הביאה לאחר מכן להחלשה של חיפוש סמים המונע על ידי רמזים.

שימוש באופטוגנטיקה כדי להפוך גמישות מוחית ולעכב חיפוש קוקאין בחולדות

מתואר הליך המדגים הישנות חריפה של מחסור חריף במזון לחיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש. מודל התנזרות שהוטל על ידי עונש יושם בהצלחה תוך שימוש בלוח הזמנים של שרשרת החיפוש ולקחת לניהול עצמי של הרואין. לאחר מכן מבוצעות בדיקות לחיפוש הרואין לאחר 24 שעות של לחץ על מחסור במזון.

הליך לחקר הישנות כתוצאה מלחץ של חיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש

למדו שיטה לחקירת החזרה של חיפוש קוקאין בחולדות מעבדה באמצעות הלם חשמלי קל. הפרוטוקול מאפשר לחוקרים לבחון את הקשר בין מתח להתמכרות ולפתח טיפולים יעילים יותר.

נוהל לימוד החזרה Footshock-induced של קוקאין מחפשים אצל חולדות מעבדה

גלה סרטונים נוספים