Name: סיכום של Curve ערוץ IV יון באמצעות רכיבי תדר (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-02-08T16:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 14 s
Description: למד שיטה חדשנית לאלקטרופיזיולוגיה לניתוח תגובת תדר של תעלות יון. השיטה מאפשרת מדידה בו-זמנית של זרם דרך מספר סוגי תעלות ללא שימוש בסוכנים פרמקולוגיים חוסמים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי המכון הלאומי לבריאות מספר מענק R21-01-HL094828 הוענק לד&quot;ר Poelzing.

1. הכינו פונקציה רעש אות קלט <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יצירת פונקציה רעש המכיל רכיבי התדר הרצוי. ניתן לעשות זאת על ידי תיאור רכיבי התדר הרצוי התדר ואז לחשב ההופכי Fast Fourier Transform. במחקר זה, 1-15 kHz היה בשימוש. הופך כל פורייה ו פורייה ההפוכה הופכת המתוארים במחקר זה חושבו באמצעות Matlab FFT של ופונקציות IFFT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סולם את המשרעת של הפונקציה רעש בהתאם. במחקר זה פונקציה הרעש היה בקנה מידה כזה אפס לשיא המשרעת של הפונקציה הרעש היה 50 או 100 mV. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יצירת קובץ גירוי בשיטות המתאימות תוכנה רכישת בשימוש. עבור Clampex 8, תחילה ליצור קובץ טקסט עם הכותרת המתאימה. מתחת לכותרת, להכניס את בתוספות הזמן לטאטא בודד בעמודה הראשונה. במרווחים של זמן צריך את המרווח הזמני זהה מרווח הדגימה בשימוש המדידות. עבור לטאטא כל בפרוטוקול צעד מתח להכניס את המתחים המדויק הרצוי בכל צעד זמן. זו צריכה לכלול את הפונקציה רעש. </li></ol> 2. לבצע מדידות מתח קלאמפ <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יצירת פרוטוקול המדידה בתוך התוכנה הרכישה תואמת קובץ הגירוי שנוצר בעבר. ב Clampex, קיים תפריט המאפשר למשתמש לשייך קובץ גירוי עם הפרוטוקול הנוכחי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף מודל (או ביולוגי) תא לציוד המדידה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצעו את הניסוי כמתוכנן. לצורך בקרה, הקפד לכלול מדידות תקופתיות שאינן כוללות כל הפונקציות רעש. </li></ol> 3. ניסוי פוסט ניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חשב את עקומת IV הקלטה בודדת. אם ההקלטה היא במצב יציב כאשר פונקציית רעש מוחל, עקומת IV ניתן ליצור באמצעות חלק המצב היציב של ההקלטה temporally מחוץ לטווח של הפונקציה רעש. אם ההקלטה לא היה מצב יציב, הפונקציה רעש עלול להפריע החישוב של עקומת IV, אז הקלטה השנייה צריכה להתבצע ללא הפונקציה רעש הנוכחי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכל שלב מתח הקלטה לחשב את פורייה מהירה להפוך החלק של הקלטה שבה הפונקציה רעש הוכנס. מערבבים את התמרת פורייה עבור כל שלב מתח amxn לתוך המטריצה, כאשר m הוא מספר תדרים FFT, ו n הוא מספר הצעדים מתח. בתצורה זו, כל שורה של המטריצה ​​מייצג את המשרעת של תדר אחד בכל הצעדים מתח בניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור כל תדר (כלומר, כל שורה במטריצה ​​לעיל) לתאם את השורה עם עקומת IV שנוצר 3.1 ולהקליט את מקדם המתאם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מגרש מקדם המתאם תדירות לעומת לדמיין תדרים אשר מאוד לתאם עם עקומת IV. מאז רכיב DC הכלול בתוך תדר הראשון של FFT, מקדם המתאם עבור תדר זה תמיד צריך להיות&gt; 0.99. </li></ol> 4. נציג תוצאות: מדידות מתח נציג מהדק מוצגים לתא מודל ללא (איור 1A) עם פונקציה (איור 1B) רעש מוכנס לתוך פרוטוקול הצעד מתח. עקומת IV חושבה גם תא המודל (תרשים 1C). במשך כל לטאטא, את הקלטות של איור 1, FFT היה מחושב על מסגרת הזמן שבה הפונקציה רעש הוכנס (ראו מסגרת אדומה דמויות 1A, 1B). איורים 2 א ו -2 להראות FFTs מחושב עבור ההקלטות שמוצג באיור 1A ו-1B, בהתאמה. לאחר בדיקה חזותית, מרכיב DC (מסומן באדום) מופיעה לחקות את הצורה של עקומת IV. ללא הפונקציה רעש, כל התדרים מעל הבירה נראה כי אמפליטודות קרוב לאפס (איור 2 א). כאשר הפונקציה רעש מוכנס, תדרים בין 1 ל 15 קילוהרץ יש אמפליטודות בולט חזותית (תרשים 2B). איור 3 מראה את התוצאה של correlating אמפליטודות תדר בודדים על פני טווח של מתח צעדים נגד עקומת IV. איור 3A-C מציג את מקדמי המתאם כאשר הניסוי נעשה בתנאים מבוקרים (ללא פונקציה רעש) ועם אמפליטודות רעש של 50 ו - 100 mV, בהתאמה. שימו לב בכל המקרים, מרכיב DC נראה מתאם כמעט מושלם עם עקומת IV. ואכן, עבור כל הקלטות, מקדם המתאם עבור תדר זה היה יותר מ 0.99 (R = 0.9996 ± 1E-5, סטיית תקן ממוצע ±). כאשר אנו מסתכלים על איור 3A (תנאים שליטה), אין תדרים מלבד רכיב DC אשר משרעת משמעותית בקורלציה עם עקומת IV. באופן ספציפי, אף אחד התדרים האלה יש מקדמי מתאם גבוה מ -0.5. עם הכניסה של הפונקציה הנמוכה ביותר משרעת רעש (50 mV), תדרים אלו עדיין היו באותו מקדמי המתאם פחות מ -0.5. מקדמי המתאם עבורתדרים se גם לא להיות יותר מ 0.5 כאשר משרעת רעש הוגדל ל 100 mV. <img src="/files/ftp_upload/2361/2361fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> . איור 1 דגם נייד הקלטות: הקלטות מהדק מתח מוצגים לתא מודל ללא (1A) עם פונקציה (1B) רעש נכלל בפרוטוקול צעד מתח. עבור הראשונה והאחרונה של 20 מילישניות לטאטא כל הפוטנציאל הוחזק על הפוטנציאל מחזיק (0 mV). כל צעד היה מתח 80 ms זמן, והפונקציה רעש הוכנס 40 מילישניות לאחר תחילת השלב. הפונקציה הרעש היה משך הזמן של 30 אלפיות והכילה תדרים בין 1 ל 15 קילוהרץ. מתח היה צעד הלוך ושוב, עד 50 mV -150 בקפיצות של 5 mV. עקומת IV עבור התא הדגם מוצג גם (1C). כדי להפוך את ההקלטות קל יותר לקריאה, רק לטאטא מדי החמישי היה כלול 1A ו-1B, אבל כל מטאטא נכללו 1C. <img src="/files/ftp_upload/2361/2361fig2.jpg" alt="איור 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> איור 2 FFT של הקלטות:. FFT חושבה עבור חלק ms 30 של לטאטא כל אחד שם את הפונקציה רעש הוא להיות מוכנס (האזור מוקף בתיבת אדום דמויות 1A, 1B). איורים 2 א ו -2 להראות FFTs המחושב ללא ועם הפונקציה רעש, בהתאמה. שוב, למען הבהירות, רק FFT מן לטאטא כל החמישי הוא נכלל הדמות, אבל כל מטאטא שימשו בחישובים בעתיד. <img src="/files/ftp_upload/2361/2361fig3.jpg" alt="איור 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 3"> . איור 3 תדרים מתאמים IV: התוצאות של המתאמים בין עקומת IV של הקלטת ואת משרעת של תדרים בודדים על פני טווח של צעדים מתח מוצג. איורים 1 א - 1C להראות את מקדם המתאם עבור התדרים מ 0 עד 20 קילוהרץ בתנאים שליטה, בנוכחות של 50 או 100 פונקציות רעש mV, בהתאמה. <img src="/files/ftp_upload/2361/2361fig4.jpg" alt="איור 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 4"> איור 4 מחדש יצירה של עקומת IV:. עקומת IV עבור התא המודל (כמו תרשים 1C) ואת גודל של שני תדרים היו מעולף. תדירות הראשון היה רכיב DC (R = 0.995), והשני היה תדר שנבחרו באקראי עם קורלציה נמוכה (R = 0.3212). אמפליטודות תדירות היו מדורגים על משרעת בערך כמו עקומת IV.

<ol><li>Hamill, O. P., Marty, A., Neher, E., Sakmann, B., Sigworth, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+patch-clamp+techniques+for+high-resolution+current+recording+from+cells+and+cell-free+membrane+patches%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Arch%22%5BJournal%5D)">Improved patch-clamp techniques for high-resolution current recording from cells and cell-free membrane patches.</a> Pflugers Arch. 391, 85-100 (1981).</li>
<li>Ukomadu, C., Zhou, J., Sigworth, F. J., Agnew, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((mu%5Dl+Na%2B+channels+expressed+transiently+in+human+embryonic+kidney+cells%3A+Biochemical+and+biophysical+properties%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">mu]l Na+ channels expressed transiently in human embryonic kidney cells: Biochemical and biophysical properties.</a> Neuron. 8, 663-676 (1992).</li>
<li>Abriel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+Arrhythmogenic+Mechanism+Revealed+by+a+Long-QT+Syndrome+Mutation+in+the+Cardiac+Na%2B+Channel%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Novel Arrhythmogenic Mechanism Revealed by a Long-QT Syndrome Mutation in the Cardiac Na+ Channel.</a> Circ Res. 88, 740-745 (2001).</li>
<li>Giles, W. R., Imaizumi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+potassium+currents+in+rabbit+atrial+and+ventricular+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of potassium currents in rabbit atrial and ventricular cells.</a> J Physiol. 405, 123-145 (1988).</li>
<li>Lee, K. S., Tsien, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+calcium+channel+blockade+by+verapamil%2C+D600%2C+diltiazem+and+nitrendipine+in+single+dialysed+heart+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mechanism of calcium channel blockade by verapamil, D600, diltiazem and nitrendipine in single dialysed heart cells.</a> Nature. 302, 790-794 (1983).</li>
<li>Ozdemir, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+Inhibition+of+Na%2FCa+Exchange+Results+in+Increased+Cellular+Ca2%2B+Load+Attributable+to+the+Predominance+of+Forward+Mode+Block%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Pharmacological Inhibition of Na/Ca Exchange Results in Increased Cellular Ca2+ Load Attributable to the Predominance of Forward Mode Block.</a> Circ Res. 102, 1398-1405 (2008).</li>
<li>Zhang, S., Zhou, Z., Gong, Q., Makielski, J. C., January, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+Block+and+Identification+of+the+Verapamil+Binding+Domain+to+HERG+Potassium+Channels%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Mechanism of Block and Identification of the Verapamil Binding Domain to HERG Potassium Channels.</a> Circ Res. 84, 989-998 (1999).</li>
<li>Veeraraghavan, R., Poelzing, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+increased+right+ventricular+conduction+sensitivity+to+flecainide+challenge%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc.+Res%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying increased right ventricular conduction sensitivity to flecainide challenge.</a> Cardiovasc. Res. 77, 749-756 (2008).</li>
<li>Goodman, M., Art, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positive+feedback+by+a+potassium-selective+inward+rectifier+enhances+tuning+in+vertebrate+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Positive feedback by a potassium-selective inward rectifier enhances tuning in vertebrate hair cells.</a> Biophysical Journal. 71, 430-442 (1996).</li>
<li>Han, A., Frazier, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ion+channel+characterization+using+single+cell+impedance+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Ion channel characterization using single cell impedance spectroscopy.</a> Lab Chip. 6, 1412-1414 (2006).</li>
<li>Hayashi, H., Fishman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inward+rectifier+K%2B-channel+kinetics+from+analysis+of+the+complex+conductance+of+Aplysia+neuronal+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Inward rectifier K+-channel kinetics from analysis of the complex conductance of Aplysia neuronal membrane.</a> Biophysical Journal. 53, 747-757 (1988).</li>
<li>Millonas, M. M., Hanck, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonequilibrium+response+spectroscopy+of+voltage-sensitive+ion+channel+gating%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Nonequilibrium response spectroscopy of voltage-sensitive ion channel gating.</a> Biophys. J. 74, 210-229 (1998).</li>
<li>Misakian, M., Kasianowicz, J., Robertson, B., Petersons, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequency+response+of+alternating+currents+through+the+Staphylococcus+aureus+alpha-hemolysin+ion+channel%5BTitle%5D)+AND+%22Bioelectromagnetics%22%5BJournal%5D)">Frequency response of alternating currents through the Staphylococcus aureus alpha-hemolysin ion channel.</a> Bioelectromagnetics. 22, 487-493 (2001).</li>
<li>Sale, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiological+Properties+of+hERG+1a%2F1b+Heteromeric+Currents+and+a+hERG+1b-Specific+Mutation+Associated+With+Long-QT+Syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Physiological Properties of hERG 1a/1b Heteromeric Currents and a hERG 1b-Specific Mutation Associated With Long-QT Syndrome.</a> Circ Res. 103, 81-95 (2008).</li>
<li>Blatz, A. L., Magleby, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+description+of+three+modes+of+activity+of+fast+chloride+channels+from+rat+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Quantitative description of three modes of activity of fast chloride channels from rat skeletal muscle.</a> J Physiol. 378, 141-174 (1986).</li>
<li>Kuo, J. J., Lee, R. H., Zhang, L., Heckman, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+role+of+the+persistent+sodium+current+in+spike+initiation+during+slowly+rising+inputs+in+mouse+spinal+neurones%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Essential role of the persistent sodium current in spike initiation during slowly rising inputs in mouse spinal neurones.</a> The Journal of Physiology. 574, 819-834 (2006).</li>
<li>Thompson, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+potassium-channel+selectivity+revealed+by+Na%28%2B%29+and+Li%28%2B%29+binding+sites+within+the+KcsA+pore%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Struct.+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Mechanism of potassium-channel selectivity revealed by Na(+) and Li(+) binding sites within the KcsA pore.</a> Nat. Struct. Mol. Biol. 16, 1317-1324 (2009).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

ישנם מכשולים טכניים כיום למנוע חוקרים מדידה מרובים ערוץ סוגי יונים בו זמנית מתוך כוונה מאוחר יותר לקבוע כמה זרם לייחס לכל סוג ערוץ. בגלל מגבלה זו, תעלות יונים נלמדים בדרך כלל בנפרד באמצעות טכניקות כגון מהדק פוטנציאל מתח, זרם, פעולה. 1 כדי לחקור סוגים ערוץ יחיד, Heterologous מערכות ביטוי משמשים לעתים קרובות. 2 כאשר עובדים עם תאים מבודדים רקמות, כגון cardiomyocytes , באמצעים אחרים יש להשתמש כדי לחסום תעלות יונים שונים. לדוגמה, תעלות הנתרן יכול להיות מומת על ידי כבש מתח איטי depolarizing, 3 תעלות אשלגן פנימה לתיקון ניתן לחסום עם BaCl2 תאית, 4 ערוצי סידן ניתן לחסום באמצעות verapamil 5. שיטה אחת בשימוש כי חלקית מתגבר על מגבלה זו היא למדוד זרם זרם דרך שני סוגי ערוצים בו זמנית, ולאחר מכן לחזור על המדידה לאחר סלקטיבי חסימת סוג אחד הערוץ עם סוכן המתאים. חיסור של שתי מדידות לאחר מכן ניתן להשתמש כדי להעריך את כמות המיוחס הנוכחית לסוג ערוץ שנחסם. 6 עם זאת, ישנם שני המגבלות העיקריות על הטכניקה הזו. ראשית, חומרים כימיים לא זוהו באופן סלקטיבי יכול לחסום כל ערוץ יון, ועוד כמה תרופות בשימוש נרחב יש שאינם ספציפיים אינטראקציות עם סוגי ערוצים אחרים. 5,7 שנית, לא ניתן לקבוע מתוך הטכניקה הזו אם ערוץ אחד היא מווסתת על ידי אחר ערוץ. לדוגמה, הביטוי הטרוגנית של NAV 1.5 ו - 2.1 קיר, הוכח החדרים קביה, והוא הוצע כי קיימת מערכת יחסים סינרגטיים בין שני הערוצים, כך גבוה יותר 2.1 קיר, ביטוי החדר הימני מדכא מהירות ההולכה. 8 כיום , זה לא ניתן לאמת. במחקר זה, אנו מציעים ספקטרוסקופיה עכבה עשוי להיות כלי שימושי לחקר מרובים ערוץ יון סוגי נמדד בו זמנית. למרות שמעולם לא הציג שיטה נעשה שימוש כדי להבחין בין שני סוגי זרמים ערוץ נמדד בו זמנית, ספקטרוסקופיה עכבה שימש ללמוד מספר היבטים אחרים של תפקוד ערוץ יון. גודמן אמנות הראה באמצעות השמיעה צב שיער תאים פרוטוקולים מהדק הנוכחי יכול להיות שונה לכוון תא אל תדרים שונים, ואת תנודות בפוטנציאל הטרנסממברני בשל יחסי הגומלין בין פנימי לתיקון K + ערוץ ערוץ Ca 2 +. 9 האן פרייזר עכבה הוכיח כי ניתן למדוד בתא בודד על פני טווח רחב של תדרים (100 הרץ עד 5 MHz), והגידול עכבה נצפתה כאשר K + או Ca 2 + ערוצי נחסמו יכול להיות אמצעי פשוט לאתר לחסום ערוץ מסכי התרופה גבוהה התפוקה. 10 היאשי פישמן השתמשו מוליכות מורכבים ללמוד מאפייני הקינטית של תיקון פנימי K + ערוץ 11. קבוצות אחרות יש תדר בודד מוכנס לתוך פרוטוקול מהדק מתח של סוגי ערוצים שונים הראו כי תגובת תדר נצפתה הסכים עם התגובה הצפויה של כמה תדרים, אך לא לאחרים. 12,13 ו Millonas Hanck הציע הסיבה תדרים מסוימים לא לייצר את התגובה הצפויה היא הנוכחות של קבועי קצב מרובים במודל מרקוב. ​​12 מחקרים כגון אלה, כמו גם אחרים, הראו כי ישנם מקרים שבהם זרמים יוניים נמדד מתוך תעלות יונים תוך שימוש ספקטרוסקופיה עכבה לא מסכים עם תגובת תדר תיאורטי. זו אינה דאגה במחקר זה כי המטרה של השיטה במחקר זה היא לזהות תדרים לתאם עם משרעת הזרם העצמאי של הנחות היסוד של מעגל חשמלי הממברנה. Furtheremore, משרעת הנוכחי מחושב חלקים של הקלטות כי אין שום פונקציות רעש מוכנס לתוך אותם. מספר מחקרים אחרים גם הדגמים הנוכחי של תעלות יונים רבות בתערוכה מדינות רבות בניהול ולא כל הולכה עם קבועי קצב משלהם. 14,15,16 Thompson et al הראו כי פילטר הסלקטיביות של ערוץ KcsA יש אתרי קישור שונים עבור Na +, Li + ו K +, ואת העלויות האנרגטי של נעה מאתר אחד מחייב אחר כמו עובר יון דרך המסנן סלקטיביות היא מה שעושה ערוץ מעדיפים לנהל K + יונים דרך הנקבוביות שלה. 17 במאמר זה אנו מוכנס מגוון של תדרים (פונקציה רעש) לתוך פרוטוקול צעד מתח וחיפשתי תדרים אשר משרעת מאוד לתאם עם משרעת הזרם הכללי. מאז ראיות חזקות הוצגה מציע קבועים שיעור מספר לשחק תפקיד הולכה של יונים באמצעות בידולt ערוצים, המבוא של תדרים הקשורים בקבועים אלה קצב עלול לגרום תדרים מסוימים או להדהד מאוד לתאם עם משרעת הנוכחי, אשר לא היה אחרת. השיטה הוכיחה במחקר זה מבוצע על תא מודל, המהווה מעגל RC מקבילי אשר משמש בדרך כלל כדי לבדוק את המעגלים מהדק מתח וציוד הרכישה. זה לא צפוי כי כל התדרים מלבד הבירה היה לתאם עם גודל הנוכחי, וזה מוצג הנתונים שלנו. אנחנו גם מראים כי תוספת של הפונקציה הרעש לא גרם כל התדרים מאוד לתאם עם משרעת הנוכחי. אלה שני הממצאים הם קריטיים כי הם מראים כי ציוד המדידה פונקציה רעש לא בכוחות עצמם לגרום תדרים כל לתאם עם משרעת הנוכחי. כאשר מחקרים עתידיים לבצע מדידות באמצעות ממברנות המכילות תעלות יונים, צפוי כי, בהתאם לערוץ בשימוש, התדרים שמתאימים קבועים בשיעור במסנן סלקטיביות או אולי הנקבובית ישפיעו על תגובת התדר של ערוץ ולהשפיע אשר יש תדרים גבוהים או מתאם נמוך עם משרעת הנוכחי. מאז שיטה זו היא שיטה חדשה ללימוד תעלות יונים, ישנם מספר כיוונים מחקרים עתידיים יכולים לעקוב. ראשית, השיטה צריכה לשמש כדי לאפיין את תגובת תדר של ערוצים מבודדים ספציפיים. עבודה נוספת גם צריך לעשות כדי לכייל את התדר אמפליטודות של אמפליטודות הנוכחי. לאחר מספר ערוצי מאופיינים בנפרד, סוגי ערוצים מרובים יש למדוד בו זמנית. הטכניקה יכולה להיות גם מותאם לשימוש מהדק פעולה פוטנציאליים, מהדק הנוכחית, גירוי מחקרים בתחום. בזמן הזה היא טכניקה חדשה, זה מראה מה יכול להיות דרך רבת עוצמה כדי לבצע מדידות אלקטרו כי היו בעבר לא אפשרי לספק תובנות חדשות רבות ערך התפקיד הפיזיולוגי של תעלות יונים.

<table><tbody><tr><td>Matlab</td><td>Mathworks</td><td>לא רלוונטי</td><td>נטיק, מסצ'וסטס</td></tr><tr><td>Clampex 8</td><td>Molecular Devices</td><td>Clampex 8</td><td>סאניבייל, קליפורניה</td></tr><tr><td>שילוב מגבר Patch Clamp</td><td>Molecular Devices</td><td>Axopatch 200</td><td>סניבייל, קליפורניה</td></tr><tr><td>ראש המערך (Headstage)</td><td>Molecular Devices</td><td>CV202</td><td>סאניוול, קליפורניה</td></tr><tr><td>מערכת לרכישת נתונים של 16 סיביות</td><td>Molecular Devices</td><td>Digidata 1322A</td><td>סאניוואל, קליפורניה</td></tr><tr><td>תא מודל</td><td>Molecular Devices</td><td>תא מודל Patch 1</td><td>סניבייל, קליפורניה</td></tr></tbody></table>

סיכום של curve ערוץ iv יון באמצעות רכיבי תדר

Recapitulation of an Ion Channel IV Curve Using Frequency Components

מבוא: נכון להיום, אין שיטות הוקמה כדי למדוד את מספר הערוץ סוגי יונים בו זמנית לפרק הנוכחי נמדד לחלקים לייחס כל סוג ערוץ. מחקר זה מדגים כיצד ספקטרוסקופיה עכבה יכול לשמש כדי לזהות תדרים ספציפיים מאוד לתאם עם משרעת המצב היציב הנוכחי למדוד במהלך הניסויים מהדק מתח. השיטה כוללת החדרת פונקציה רעש המכיל תדרים ספציפי לתוך פרוטוקול הצעד מתח. בעבודה המוצגת, תא המודל משמש על מנת להוכיח כי אין מתאם גבוה מוצגים על ידי המעגלים מהדק מתח, וגם כי תפקידו הרעש עצמו לא להציג את כל המתאמים גבוהים כאשר אין תעלות יונים קיימות. אימות זה הכרחי לפני הטכניקה ניתן ליישם תכשירים המכילים תעלות יונים. מטרת הפרוטוקול המוצג הינו כדי להדגים כיצד לאפיין את תגובת תדר של סוג יון ערוץ יחיד לתפקד רעש. לאחר תדרים ספציפיים זוהו סוג ערוץ בודדים, הם יכולים לשמש כדי לשחזר את המצב היציב הנוכחי מתח (IV) עקומה. תדרים מאוד לתאם עם סוג אחד של ערוץ מינימלית לתאם עם סוגי ערוצים אחרים עשויים לאחר מכן ניתן להשתמש כדי להעריך את התרומה הנוכחית של ערוץ סוגים רבים נמדד בו זמנית. שיטות: מדידות מהדק מתח בוצעו על תא באמצעות מודל מתח סטנדרטי צעד פרוטוקול (-150 עד 50 mV, 5mV צעדים). פונקציות Noise המכיל הבהירויות שווה של 1-15 קילוהרץ תדרים (אפס לשיא אמפליטודות: 50 או 100mV) הוכנסו לתוך כל שלב מתח. הרכיב האמיתי של Fast Fourier Transform (FFT) של אות פלט חושבה עם ובלי רעש עבור פוטנציאל כל צעד. העוצמה של כל תדר כפונקציה של מתח היה צעד בקורלציה עם משרעת הנוכחי על מתח המקביל. תוצאות ומסקנות: בהעדר רעש (שליטה), בסדרי גודל של כל התדרים למעט רכיב DC בקורלציה גרוע (| ר | &lt;0.5) עם עקומת IV, ואילו מרכיב DC היה מקדם המתאם עולה 0.999 במדידות כל. איכות הקשר בין תדרים בודדים עקומת IV לא השתנה כאשר פונקציה רעש נוספה פרוטוקול הצעד מתח. כמו כן, הגדלת המשרעת של הפונקציה רעש גם לא להגדיל את המתאם. מדידות בקרה להוכיח כי מהדק מתח המעגלים כשלעצמו אינו גורם תדרים מעל הרץ 0 עד מאוד לתאם עם עקומת IV היציב. כמו כן, המדידות בנוכחות פונקציה הרעש להוכיח כי הפונקציה רעש אינו גורם תדרים מעל 0 הרץ לתאם עם עקומת IV היציב כאשר אין תעלות יונים קיימות. בהתבסס על אישור זה, השיטה כעת ניתן ליישם תכשירים המכילים סוג יחיד ערוץ יון עם הכוונה של תדרים זיהוי אשר אמפליטודות לתאם במיוחד עם סוג ערוץ.

ישנם מכשולים טכניים למדידת שטף זרם דרך תעלות יונים בו זמנית, ועל הבחנה מאוחר יותר מה החלק הנוכחי הטרנסממברני בשל כל סוג ערוץ. כדי לענות על צורך זה, שיטה זו מציגה את הדרך ליצור את עקומת IV של סוגי ערוצים בודדים באמצעות רכיבי תדר ספציפי.

סיכום של Curve ערוץ IV יון באמצעות רכיבי תדר

הקדמה: נכון להיום, אין שיטות מבוססות למדידה סימולטנית של סוגים מרובים של תעלות יונים ופירוק הזרם הנמדד ל...

המטרה הכוללת של הליך זה היא להדגים טכניקה לאפיון תגובת התדר של תעלות יונים לצורך מדידת שטף הזרם דרך סוגים מרובים של תעלות בו-זמנית; זאת מושג תחילה על ידי יצירת פונקציית רעש שתהיה כלולה בפרוטוקול מדרגת המתח ושילובה בקובץ גירוי, דבר הנחוץ על מנת להשתמש בצורות גל מותאמות אישית בתוכנת ה-clamp X. השלב השני של ההליך הוא החלת פרוטוקול מדרגת המתח שנוצר זה עתה על תא מודל באמצעות טכניקות סטנדרטיות של voltage clamp של התא כולו (whole cell) והקלטת הזרם שנוצר. השלב השלישי של ההליך הוא חישוב עקומת ה-IV של התא וה-FFT של החלק מכל סריקה המכיל את פונקציית הרעש.השלב הסופי של הפרוצדורה הוא ביצוע מתאם אינדיבידואלי בין האמפליטודה של כל תדר בכל שלבי המתח לבין עקומת ה-IV של אותו תא. התוצאות מראות כי אף אחד מהתדרים אינו נמצא במתאם גבוה עם עקומת ה-IV של תא המודל. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות, כגון קיבוע מתח סטנדרטי של תא שלם (whole cell voltage clamping), הוא שהיא עשויה לספק אמצעי למדידת יותר מסוג אחד של תעלת יונים בו-זמנית, ללא שימוש בחומרים חוסמים פרמקולוגיים או בפרוטוקולי הפעלה מבוססי מתח.שיטה זו יכולה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום הפיזיולוגיה של תעלות יונים, כגון מהי ההשפעה של רמת הביטוי של סוג תעלת יונים אחד על הפעילות של סוגים אחרים של תעלות יונים באותה רקמה. השלב הראשון בפרוטוקול הוא יצירת פונקציית רעש המכילה את רכיבי התדר הרצויים. לשם כך, הגדר תחילה את רכיבי התדר הרצויים במישור התדר.במחקר זה נעשה שימוש ברכיבי תדר שבין 1 ל-15 kilohertz. לאחר מכן, חשבו את התמרת פורייה המהירה ההפוכה באמצעות פונקציית ה-IFFT של MATLAB כדי להמיר את התדרים שנבחרו למישור הזמן, ולאחר מכן כוונות את אמפליטודת פונקציית הרעש באופן מתאים.במחקר זה, פונקציית הרעש מנורמלת פעמיים: פעם אחת כך שהאמפליטודה מהאפס לשיא של פונקציית הרעש היא 50 millivolts, ופעם שנייה כך שהאמפליטודה מהאפס לשיא היא 100 millivolts. השלב הבא הוא יצירת קובץ גירוי באמצעות תוכנה כגון matlab. קובץ גירוי הוא פשוט קובץ טקסט עם כותרת המורה לתוכנת הרכישה clamp X eight בדיוק באיזה מתח להשתמש בכל נקודת זמן.כדי ליצור את קובץ הגירוי, צור תחילה קובץ טקסט עם הכותרת המתאימה; מתחת לכותרת, הכנס בעמודה הראשונה את מקטעי הזמן עבור סריקה בודדת, כאשר למקטעי הזמן יש להיות את אותו מרווח זמני כמו מרווח הדגימה ששימש במדידות. פרוטוקול זה משתמש בקצב דגימה של 200 kilohertz. עבור כל סריקה, הכנס את המתחים המדויקים הרצויים בכל שלב זמן.כל עמודה נחשבת לסריקה נפרדת, לכן עבור פרוטוקול שפועל בצעדים של מינוס 150 millivolts עד פלוס 50 millivolts במרווחים של five millivolt, יש להוסיף 41 עמודות לאחר עמודת הזמן. המתחים המוגדרים צריכים לכלול את פונקציית הרעש ב-clamp X. יש ליצור פרוטוקול עבור כל ניסוי, לכן השלב הבא הוא יצירת פרוטוקול מדידה שתואם לקובץ גירוי שנוצר קודם לכן. ב-clamp X, בחרו באפשרות התפריט acquirer edit protocol wave zero, המאפשרת לקשר קובץ גירוי לפרוטוקול הנוכחי.השלב הבא הוא החלת הגירוי שהוגדר על התא. פרוטוקול זה משתמש בתא מודל בעל מעגל RC מקבילי. חברו את תא המודל לציוד המדידה, לחצו על כפתור ההקלטה ועל clamp X לצורך ביצוע.הניסוי מתוכנן למטרות בקרה. ודאו שאתם כוללים מדידות תקופתיות שאינן כוללות פונקציות רעש; לאחר איסוף הנתונים, השלב הבא הוא יצירת עקומות IV וביצוע התמרות פורייה מהירות (fast fourier transforms). כדי לחשב את עקומת ה-IV עבור הקלטה בודדת, השתמשו בחלק של מצב יציבה (steady state) מההקלטה, שנמצא מחוץ לטווח הזמנים של פונקציית הרעש, כדי למדוד את אמפליטודת הזרם.אם ההקלטה אינה במצב יציב (steady state) בעת הפעלת פונקציית הרעש, פונקציית הרעש עלולה להפריע לחישוב עקומת ה-IV, ובמקרה זה יש להשתמש בהקלטת הביקורת. במקום לחשב את עקומת ה-IV עבור כל שלב מתח בהקלטה, חשבו את ה-FFT של חלק ההקלטה שבו הוכנסה פונקציית הרעש. שלבו את התמרת פורייה של כל שלב מתח למטריצה בגודל M על N, כאשר M הוא מספר התדרים ב-FFT ו-N הוא מספר שלבי המתח בתצורה זו.כל שורה במטריצה מייצגת את אמפליטודת ה-FFT של תדר בודד בכל שלבי המתח בניסוי. השלב הבא הוא חישוב מקדמי מתאם עבור כל תדר, על ידי ביצוע מתאם בין השורה לבין עקומת ה-IV שנוצרה קודם לכן. רשמו את מקדם המתאם.בשלב הבא, צור גרף של מקדם המתאם לעומת התדר כדי להנמיח תדרים בעלי מתאם גבוה עם עקומת ה-IV. תוצאות מדידות ה-voltage clamp ללא הכנסת פונקציית רעש מוצגות כאן. במהלך ה-20 מילישניות הראשונות והאחרונות של כל סריקה, הפוטנציאל נשמר בפוטנציאל ההחזקה של אפס מיליוולט.בזמן הזה, המתח הועלה בצעדים ממינוס 150 millivolts לפלוס 50 millivolts במרווחים של five millivolt. כל צעד מתח נמשך 80 milliseconds; כדי להקל על קריאת התוצאות באיור, רק כל סריקה חמישית נכללה באיור. המלבן האדום מציין את הנקודה שבה פונקציית הרעש הייתה מופעלת, אילו הייתה קיימת פונקציית רעש בסריקות אלו.איור זה דומה לאיור הקודם, אך עם פונקציית רעש שהוכנסה לפרוטוקול מדרגת המתח 40 milliseconds לאחר תחילת מדרגת המתח; התיבה האדומה מראה היכן הוכנסה פונקציית הרעש. לפונקציית הרעש היה משך של 30 milliseconds והיא הכילה תדרים שבין 1 ל-15 kilohertz. איור זה מציג את עקומת ה-IV שחושבה עבור תא המודל.עקומת ה-IV הזו היא ליניארית, כפי שצפוי מכיוון שתא המודל הוא מעגל RC מקבילי פשוט. איור זה מציג את תוצאת ה-FFT ללא פונקציית הרעש עבור כל סריקה. בהקלטות של תא המודל, ה-FFT חושב על פני פרק הזמן שבו הוכנסה פונקציית הרעש.רכיב ה-DC, המודגש באדום, נראה כמי שמחקה את צורת עקומת ה-IV. נראה כי לכל התדרים שמעל ה-DC יש אמפליטודות קרובות לאפס; לצורך בהירות, בדמות נכלל ה-FFT מכל סריקה חמישית בלבד. כאשר ה-FFT מחושב עבור ההקלטות עם פונקציית הרעש שהוכנסה, לתדרים שבין 1 ל-15 kilohertz יש אמפליטודות ניכרות. נוכחותם של תדרים גבוהים אלו, שאינם נפוצים בדרך כלל בניסויי voltage clamp, מעלה את השאלה האם העוצמה של מי מהתדרים הללו משתנה באופן פרופורציונלי לאמפליטודת הזרם.שלוש הדמויות הבאות מראות את מקדם המתאם בין האמפליטודה של התדר הבודד לבין עקום ה-IV של ההקלטה. בדמות הראשונה, לא נעשה שימוש בפונקציית רעש. בדמות השנייה, לפונקציית הרעש הייתה אמפליטודת שיא של 50 millivolts, ובדמות השלישית, לפונקציית הרעש הייתה אמפליטודת שיא של 100 millivolts.שימו לב שבכל המקרים לרכיב ה-DC, כלומר לתגובה בתדר אפס הרץ, יש מקדם מתאם הגבוה מ-0.99, ולכן נראה כי הוא נמצא במתאם כמעט מושלם עם עקומת ה-IV. כמו כן, שימו לב שבכל שלוש הדמויות, לאף אחד מהתדרים האחרים אין מקדמי מתאם הגבוהים מ-0.5. בנוסף, הוספת פונקציית רעש עם אמפליטודה של 50 או 100 millivolt לא שינתה דפוס זה.תוצאות אלו מעידות כי מעגל קיבוע המתח (voltage clamp) ופונקציית הרעש עצמה אינם מחדירים מתאמים גבוהים לעקום ה-IV. תיקוף זה חשוב על מנת להחיל טכניקה זו על תכשירי ביולוגיים המכילים תעלות יונים. איור זה משחזר את עקום ה-IV כדי להציג את המתאם, או את היעדרו, בשתי קבוצות של נתוני תדרים.עקומת ה-IV עבור תא המודל המסומן כ-actual IV באיור זה היא הקו המקווקו שנראה כחופף לקו המקווקו האדום. הקו המקווקו האדום מציג את רכיב ה-DC, שיש לו מקדם מתאם של 0.995 לקו ה-actual IV. העקומה השלישית המוצגת, הקו המשונן, מראה תדר שנבחר באופן אקראי של 4.399 kilohertz עם מתאם נמוך.מקדם המתאם של קו זה לעקומת ה-IV הוא 0.3212. תוצאות אלו מראות כי ציוד המדידה ופונקציית הרעש אינם גורמים כשלעצמם למתאם בין תדרים כלשהם לבין אמפליטודת הזרם. על בסיס אימות זה, ניתן להחיל את השיטה המוצגת כאן, הכוללת הכנסת פונקציית רעש למדרגות מתח במהלך ניסויי voltage clamp, תחילה על תכשירי ממברנה המכילים סוג יחיד של תעלת יונים, ובהמשך על תכשירי ממברנה המכילים מספר סוגי תעלות. ניתן לנתח את התוצאות מניסויי התעלה הבודדת באמצעות FFT ואנליזת המתאם המוצעים כאן.ניתן להשתמש בניתוח זה כדי לזהות תדרים שהאמפליטודות שלהם נמצאות במתאם ספציפי עם סוג ערוץ מסוים. הוצגו ראיות חזקות המצביעות על כך שקבועים של קצבי תגובה מרובים ממלאים תפקיד בהולכה של יונים דרך ערוצים שונים. לפיכך, ברגע שזוהו התדרים, הם נמצאים במתאם גבוה עם סוג ערוץ אחד ובמתאם מינימלי עם סוגי ערוצים אחרים.ניתן להשתמש בתדרים אלו כדי להעריך את התרומה הנוכחית של סוגי תעלות מרובים שנמדדו בו-זמנית בעקבות הליך זה. ניתן לבצע שיטות אחרות, כגון חסימה פרמקולוגית ודחפים מקדימים (pre pulses), כדי לענות על שאלות נוספות, כגון האופן שבו מתנהגת תגובת התדר של תעלות כאשר תעלות יונים נמצאות בקונפורמציה חסומה או לא פעילה.

recapitulation-of-an-ion-channel-iv-curve-using-frequency-components

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

יונית הנוכחי של BK ערוצי נרשם באמצעות מהדק טכניקות תיקון. ערוצי BK באים לידי...

הצמד תיקון וטכניקות זלוף עבור לימוד תעלות יונים מתבטא Xenopus ביציות

Whole-cell-clamp תיקון הקלטות של עצב השמיעה דנדריטים סיבים בבית סינפסה סרט פנימי תא שיער שבלול יונקים.

הקלטות Postsynaptic ב דנדריטים מביא פנייה שבלול תאים שיער פנימית: שחרור Multivesicular ניטור ב סינפסה סרט

אנו מתארים את ההכנה של פרוסות רשתית דקות ממימיות נמר סלמנדרות...

כל תא הקלטות בו זמנית מקולטני אור ועל נוירונים מסדר שני בהכנה פורסים רשתית אמפיבי

שתואר כאן הוא הליך לקבלת משתרע הקלטה הנוכחית ארוך מערוץ יון אחד עם טכניקת התיקון-clamp מצורף תא. שיטה זו מאפשרת להתבוננות, בזמן אמת, את הדפוס של תצורות ערוץ פתוחות קרובים העומדות בבסיס האות הביולוגית. נתונים אלה להודיע ​​על נכסי ערוץ בממברנות ביולוגיות באין מפריע.

הקלטת תיקון מהדק מצורף תא אחד ערוצים

הכינון מחדש של החלבון הטרנסממברני, KvAP, לתוך שלפוחית ​​unilamellar ענקית (GUVs) הוא הוכיח לשתי שיטות התייבשות-החזרת נוזלים - electroformation, ונפיחות בסיוע ג '. בשני השיטות, שלפוחית ​​unilamellar קטנה המכילה החלבון הם התמזגו יחד כדי ליצור GUVs כי אז יכול להיות שנחקר על ידי מיקרוסקופ פלואורסצנטי ואלקטרופיזיולוגיה תיקון מהדק.

כינונה מחדש של חלבון טראנסממברנלי, יון ערוץ מתח מגודרת, KvAP, לענק Unilamellar שלפוחית ​​למיקרוסקופי וצמד תיקון ללימודים

מאמר זה מתאר כיצד נקבעת סלקטיביות היונים של channelrhodopsin באמצעות רישומים אלקטרופיזיולוגיים של Patch-Clamp של תאים שלמים באמצעות תאי HEK293. כאן, מודגם ההליך הניסיוני לחקירת סלקטיביות כלוריד של תעלה רודופסין סלקטיבי של אניונים. עם זאת, ההליך ניתן להעברה לתעלות רודופסינים אחרים בעלי סלקטיביות מובחנת.

תא שלם תיקון מהדק הקלטות עבור קביעת electrophysiological של יון סלקטיביות ב Channelrhodopsins

מאמר זה מתאר שיפור של קונבנציונאלי מתח פלמורומטריה (VCF) שבו פלואורסצנט טבעי חומצות אמינו (fUAA) משמשים במקום צבעים maleimide, כדי לבדוק סידורים מבניים בערוצי יון. ההליך כולל הזרקת Xenopus ביצית דנ"א, RNA / מטבע fUAA, ומדידות בו זמנית ו פלואורסצנטי.

מתח הידוק פלואומטריה ב<em&gt; קסנופוס</em&gt; ביציות באמצעות חומצות אמינו פלואורסצנטי לא טבעי

פרוטוקול כאן מתאר את האינטראקציות של מטוהרים hEAG1 יון ערוץ חלבון עם מולקולה קטנה השומנים ליגנד phosphatidylinositol 4, 5-bisphosphate (פיפ2). המדידה מדגים כי מתה על יכול להיות שיטה אפשרית להקרנה ליגנד ערוץ הרומן יון מולקולה קטנה.

לכידת את האינטראקציה קינטיקה החלבון תעלת יונים עם מולקולות קטנות על ידי וזמינותו אינטרפרומטריה ביו-שכבה

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה יעילה לרכישה דינמית בזמן אמת של זרמי תעלה אשלגן מגודר מתח (Kv) בקרדיומיוציטים H9c2 באמצעות טכניקת הידוק טלאי של תאים שלמים.

רישום זרם אשלגן תלוי מתח על קרדיומיוציטים H9C2 באמצעות טכניקת הידוק טלאי של תאים שלמים

אלקטרופיזיולוגיה של מהדק דינמי יכולה לבסס קשרים סיבתיים בין ליקויים בירי עצבי לתפקוד לקוי של תעלת יונים. אנו מתארים שיטות ופרוטוקולים של מהדק דינמי בנוירונים של פורקינג'ה במוח הקטן של העכבר, תוך ציון משאבים שימושיים ושיקולים טכניים. במחקר מייצג, אנו מוסיפים מוליכות נתרן מעוצבת לנוירונים Tsc1-/- Purkinje כדי להציל ירי חוזר.

שיטות מהדק דינמי לחקירת ריגוש עצבי לקוי הקשור לאוטיזם

מוצג פרוטוקול ניסיוני להרכבה, גירוי חשמלי וניתוח דו-שכבתיות מממשק טיפות עם גרמיצידין A. יחסי מבנה-תפקוד בין ליפידים לחלבון נמדדים על ידי מדידת שינויים בשטח הממברנה, בזרם יוני ובהולכה חד-ערוצית, וקישור תגובות אלו לשינויים דמויי פלסטיות בהולכה יונית במודל ממברנה בהשראת סינפסות חשמליות.

אפיון מבנה תפקוד ממברנת ליפידים-חלבון באמצעות דו-שכבות ממשק טיפות

למד שיטה חדשנית לאלקטרופיזיולוגיה לניתוח תגובת תדר של תעלות יון. השיטה מאפשרת מדידה בו-זמנית של זרם דרך מספר סוגי תעלות ללא שימוש בסוכנים פרמקולוגיים חוסמים.

סיכום של Curve ערוץ IV יון באמצעות רכיבי תדר

גלה סרטונים נוספים