הזרקה סטריאוטקסית של וירוסים לשינוי גנטי יציב במודל עכבר

נתחיל עם עכבר מורדם עם גולגולת חשופה במסגרת סטריאוטקסית.

הורד את מחזיק המזרק עד שקצה המחט מתיישר עם הברגמה, נקודת ייחוס לגולגולת.

באמצעות הקואורדינטות הסטריאוטקסיות שנקבעו מראש, אתר את אזור הגחון-תת-חדר או

V-SVZ, נישה נוירוגנית המכילה בעיקר תאי גזע עצביים או NSCs, וסמן אזור זה.

הסר את המזרק וקדח בזהירות חור קטן, הימנע מנזק מוחי.

מלאו מזרק סטרילי בנגיפים הנושאים את הטרנסגן ומקמו את המחט על פני המוח.

מקם מחדש את המזרק והורד אותו עד שהקצה נוגע בשכבת פני השטח הפנימית ביותר של המוח.

לחדור למוח כדי להגיע ל-V-SVZ, להזריק לאט את הנגיף, להחזיק לזמן קצר ואז למשוך את המזרק.

ב-V-SVZ, הנגיף נכנס ל-NSCs באמצעות היתוך ממברנה. ה-RNA ההפוך שלו מתמלל ל-DNA.

DNA זה משתלב לאחר מכן בגנום ה-NSC, ומאפשר שינוי גנטי יציב של NSCs.

לאחר ההרדמה, עכבר בן שישה עד שמונה שבועות מגלח את האזור שבין אוזניו. לאחר מכן, יש לחטא את העור באמצעות יודופור כמו יוד פובידון או 70% אתנול. לאחר מכן, הניחו את החיה במצב נוטה על מסגרת סטריאוטקסית.

תקן בזהירות את ראשו באמצעות מוטות האוזניים ותמיכת החיך של המנגנון. החזיקו את העכבר על כרית חימום בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ומרחו חומר סיכה עיניים על עיניו.

לאחר מכן, בצע חתך באורך 1 סנטימטר בקרקפת ומשוך בעדינות את העור כדי לחשוף את הגולגולת. נקו בזהירות את משטח העצם בעזרת אפליקטור סטרילי עם קצה כ