מניפולציה של תאי צלחת עצבית באמצעות ננו-הזרקה ברחם במודל עכבר עוברי

אבטח עכבר בהריון מורדם עם הרחם החשוף שלו המכיל עוברים טרום-נוירולטיביים. בשלב זה, הצלחת העצבית פתוחה וחשופה ישירות למי שפיר.

מקם את העוברים שנבחרו על צלחת פטרי עם קרום אלסטי כדי לייצב אותם. אבטח את העוברים ומרח מי מלח להידרציה.

יישר את בדיקת האולטרסאונד מעל העובר ומדוד את קוטר חלל מי השפיר כדי לחשב את נפח ההזרקה האופטימלי.

מקם מחט הזרקת ננו המכילה תמיסה לנטי-ויראלית גבוהה מעל עובר המטרה בזווית כמעט מאונכת.

הזריק נפח קטן ומדויק לחלל מי השפיר, משוך בעדינות את המחט והסר את בדיקת האולטרסאונד.

דחף בעדינות את העוברים בחזרה לתוך העכבר.

נגיף הלנטי המוזרק מתמזג עם תאי צלחת עצבית, ומשחרר את החומר הגנטי שלו, שעובר שעתוק הפוך ל-DNA ומשולב בגנום המארח.

זה מאפשר מניפולציה יציבה של גנים בתאי הלוח העצבי, ותומך ביישומים טיפוליים פוטנציאליים.

בעזרת מלקחיים, החזיקו את הרקמה בין העוברים ושלפו בזהירות את שתי קרני הרחם מהבטן. ספור ומספר את העוברים, מהשחלה לצוואר הרחם או מצוואר הרחם לשחלה, משני הצדדים.

לאחר מכן, בעזרת צמר גפן לח, דחף בעדינות את כל העוברים בחזרה לחלל הבטן, למעט שלושת הראשונים שיש להזריק. לאחר מכן, הניחו טיפה של PBS על קרום אלסטי המודבק לפתח המרכזי העגול של צלחת פטרי שונה זמינה מסחרית והחזיקו אותה מיד מעל העוברים. הכנס מלקחיים סגורים לחתך האלסטי, ולאחר מכן שחרר את המלקחיים כדי לפתוח את החתך האלסטי,