מתן תרופות עיניים לנוירומודולציה לא פולשנית במודל עכבר

התחילו עם עכבר מהונדס גנטית שתאי העצב שלו בהיפוקמפוס מבטאים קולטנים מעוצבים המופעלים אך ורק על ידי תרופות מעצבים או DREADDs.

קולטנים מהונדסים אלה מגיבים באופן סלקטיבי לתרופות ניסוי סינתטיות תוך שהם אינם מגיבים למולקולות אנדוגניות.

קשקש את העכבר באופן קבוע כדי למזער את הלחץ ולהרגיל אותו להליך.

לאחר מכן, שקלו את העכבר כדי לחשב את מינון התרופה הנכון.

במהלך הטיפול בעכבר, השתמש באור אדום עמום כדי למנוע הפרעה ביולוגית.

קשקש בעדינות את העכבר כדי לשתק אותו.

בעזרת פיפטה, קח את תמיסת תרופת הבדיקה וצור טיפה בקצה. כעת, התקרב לעין

ושחרר את הטיפה על פני השטח שלה.

החזר את העכבר לכלוב הביתי שלו. חזור על מתן התרופה מספר פעמים.

התרופה נספגת דרך העין ונכנסת למוח.

לאחר מכן הוא חוצה את מחסום הדם-מוח ומגיע לאזור ההיפוקמפוס. מאוחר יותר, הוא נקשר לקולטני DREADD ומפעיל נוירונים, מה שמאפשר נוירומודולציה מדויקת ולא פולשנית.

למתן CNO חוזר, החל מארבעה שבועות לאחר ההזרקה, הרגילו את בעלי החיים לטיפול על ידי קשקוש כל עכבר שלוש דקות ביום במשך שלושה עד ארבעה ימים לפני מתן טיפות העיניים. כאשר העכברים הסתגלו לטיפול, שקלו כל עכבר כדי לקבוע את הכמות המתאימה של CNO שתסופק כדי להשיג מיליגרם אחד של CNO לכל קילוגרם של ריכוז משקל גוף.

שעתיים לפני כיבוי האורות בשלב הלא פעיל, טען 1 עד 3 מיקרוליטר מתמיסת ה-CNO המוכנה למיקרו-פיפטה P10 ושתק את העכבר באמצעות קשקוש. הוציאו את התמיסה באיטיות עד שנוצרת טיפה יציבה על קצה הפיפטה וקרבו בזהירות את הטיפה לקרנית עד להעברת התמיסה מבלי לגעת בקצה הפיפטה בעין העכבר. לאחר מכן החזר את העכבר לכלוב הביתי שלו לפני מריחת טיפת העין CNO על העין של החיה הבאה.

במקרים בהם יש צורך לספק CNO בשלב הפעיל של העכבר, ודא נוכחות של נורה אדומה עמומה לטיפול נכון בבעלי חיים ואספקת CNO.