השתלה סטריאוטקסית של תרחיף תאים עצביים בעכבר עם פגיעה מוחית טראומטית

התחל עם מזרק טעון מראש המחובר למשאבת מזרק סטריאוטקסית.

המזרק מכיל תרחיף תאים עצביים פלוריפוטנטיים המושרה על ידי בני אדם.

מקם את המחט מעל קליפת המוח שנחשפה בניתוח של עכבר עם פגיעה מוחית טראומטית.

הורד את המזרק כדי לגעת בדורה עם קצה המחט, התאם את הקואורדינטות כדי למקד את מקום הפציעה ונסוג מעט. כעת,

צור חתך קטן, וצור נקודת כניסה למחט.

לאחר מכן, הורד את הבוכנה כדי לאפשר את זרימת מתלה התאים.

הורידו את המחט וחדרו למוח כדי להגיע לגבול החומר האפור-לבן של קליפת המוח העמוקה.

לבסוף, יש להחדיר לאט את תרחיף התאים תוך השקיית אתר הניתוח במי מלח כדי לשמור על הידרציה.

בסיום, משוך את המחט, השקיה מחדש וסגור את החתך.

עם הזמן, התאים המושתלים מבשילים, משחזרים מעגלים עצביים ומתקנים נזק מוחי.

בערך 24 שעות לאחר כריתת הקרניקטומיה, הכנס את העכבר בחזרה למסגרת הסטריאוטקסית.

מכסים את העכבר בווילון הכירורגי המנופח. שטפו את מקום החתך במי מלח סטריליים כדי לנקות את האתר ולשחרר את התפרים. השתמש בצמר גפן ספוג אתנול 70% כדי לעקר בעדינות את מקום החתך והשתמש בפינצטה עדינה ובמספריים עיניים כדי להסיר את התפרים.

לאחר מכן להשקות את אתר הניתוח וכריתת הקרניקטומיה במי מלח סטריליים בשפע. במכסה מנוע לבטיחות ביולוגית של תרבית תאים, סובב בעדינות או הקש על צינור התאים כדי להבטיח תרחיף תאים הומוגני. השתמש במיקרופיפטה כדי להעמיס כ-7.5 מיקרוליטר של תאים למזרק המילטון דרך קצה הבוכנה.

החזק את המזרק בזווית של 120 מעלות כשקצה הבוכנה פונה כלפי מטה, הכנס את הבוכנה תוך הקפדה לא להכניס בועת אוויר בין המתלה לקצה הבוכנה. חבר את מכלול האטם למחט הפיפטה והצמד את המחט למזרק. דחוף את הבוכנה כדי להזיז את מתלה התא לתוך מחט הפיפטה והצמד את המזרק למשאבת המזרק הסטריאוטקסית.

קדם את הבוכנה כדי לוודא שמכלול משאבת המזרק פועל כראוי והעביר את המחט לקואורדינטות להזרקה. יישר את קצה המחט לברגמה והגדר את קואורדינטות ה-x וה-y לאפס. העבירו את קצה המחט מעל כריתת הקרניקטומיה לשני מילימטרים לרוחב ומינוס מילימטר אחד אחורי לברגמה וגעו בקצה המחט למשטח הדורה מאטר.

הרם מעט את המחט ואז בצע חתך קטן בדורה מאטר במקום בו המחט יצרה מגע. הגדר את הקואורדינטות הסטריאוטקסיות ל-z שווה לאפס ולחץ על הבוכנה כדי לאשר שתרחיף התא זורם כראוי לפני הכנסת המחט למוח. הכניסו את המחט למוח לעומק של z השווה למינוס 1.4 מילימטרים כדי למקם את השתל בגבול החומר האפור / החומר הלבן של קליפת המוח העמוקה.

הפעל את משאבת המזרק כדי להחדיר את מתלה התאים במשך תקופה של 15 דקות. השתמש במיקרוסקופ למרחקי עבודה ארוכים כדי לנטר את זרימת תרחיף התאים המשקה את אתר הניתוח במי מלח סטריליים במהלך ההזרקה כדי לשמור על לחות הרקמות. לאחר שכל התאים נמסרו, יש למשוך לאט את מחט ההשתלה ולהשקות את מקום הניתוח במי מלח נוספים לפני סגירת החתך בתפרים חדשים.

לאחר מכן לספק טיפול לאחר הניתוח כפי שהודגם.