Name: בשנת הזרקה תוך חדרי ברחם ו electroporation E15 של עוברי עכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 26 min 17 s
Description: למדו את שיטת ההזרקה התוך-חדרית וחשמול עוברי עכברים בגיל E15 לחקר מוח מתפתח. טכניקה זו מאפשרת מניפולציה גנטית ממוקדת במחקר נוירוביולוגיה התפתחותית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

למחברים אין ניגודי עיניינים להצהיר עליהם.

בשנת הזרקה תוך חדרי ברחם ו electroporation e15 של עוברי עכברים

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E15 Mouse Embryos

ברחם-in-vivo הזרקת electroporation של הניאוקורטקס עכבר עובריים מספק כלי רב עוצמה עבור מניפולציה של אבות בודדים לאורך הקירות של החדר לרוחב. טכניקה זו היא כעת בשימוש נרחב כדי לחקור את התהליכים המעורבים corticogenesis על ידי יתר להביע או דריסה גנים התבוננות על תופעות התפשטות ההגירה הסלולר, והבחנה. בהשוואה אסטרטגיות בנוקאאוט המסורתית, ב-ברחם electroporation מספק אמצעי מהיר כדי לתפעל אוכלוסייה של תאים במהלך חלון הזמני ספציפיים. בפרוטוקול הווידאו הזאת אנחנו המתאר את המתודולוגיה ניסיוני להכנת עכברים לניתוח, לחשוף את הקרניים דרך הרחם laporatomy, הזרקת DNA לתוך החדרים רוחבי של העובר המתפתח, electroporating דנ&quot;א לתוך אבות המצפים את הקיר לרוחב, וטיפול בבעלי חיים שלאחר הניתוח . המעבדה שלנו משתמשת בפרוטוקול זה על ניתוחים על E13-E16 עכברים, לעומת זאת, מבוצעת בדרך כלל על E15, כפי שמוצג בסרטון זה.

בשנת הזרקה תוך חדרי ברחם ו electroporation E15 של עוברי עכברים

הזרקה ואלקטרופורציה בתוך הרחם (in-utero) ובתוך הגוף (in-vivo) של הנאוקורטקס העוברי של עכבר מספקות כלי רב עוצמה למניפולציה של תאי אב בודדים...

שלום, אני וויליאם טיס ממעבדת קרייט. היום, אני ואחרים נראה לכם הזרקות תוך-רחמיות לעוברים של עכברים ביום E 15. שלום, שמי לורה אליאס.היום אראה לכם כיצד להכין את פיפטות המיקרו-הזרקה ולמלא אותן לצורך ההזרקות תוך-חדריות והאלקטרופורציה שנבצע. שמי הוא דייוויד קסטנידה, והיום אסייע בהזרקות in vivo in utero של עוברי עכברים. נזריק DNA פלסמידי לתוך החדרי הצדי של עוברי עכברים בשלבי התפתחות.אנו מכוונים לקליפת ה-CE של עוברי אלה כדי להשיג ביטוי של מולקולות שונות על ידי תאי גליה, אשר יהפכו לנוירונים בשלב מאוחר יותר של ההתפתחות. בעת ביצוע ההזרקות התוצאיות הללו, ישנם מספר כלים חשובים שתצטרכו להשתמש בהם ואני אראה אותם לכם כעת. אנו משתמשים בפינצטה זירה ובזוג פינצטות עזר.זוג אחד, זוג אחד משונן, וזוג נוסף שיש לו שן קטנה בקצה. אנו משתמשים בזוג המוסטטים. אלו הם מספריים.לאחר מכן אנו משתמשים בשני המדבקי הללו. זהו הגדול יותר, שבו אנו משתמשים עבור חולדות. וזהו הקטן יותר, שבו אנו משתמשים עבור עכברים.נעשה שימוש בסיכה בגודל שבע, וכאן נעשה שימוש בסיכה בגודל תשע והן בעלות קפיץ. חלק מהעזרים שבהם אנו משתמשים כאן כדי לסייע בניתוחים הם מקור אור סיב אופטי פשוט עם ראש כפול. אנו משתמשים במצע חימום המזרים מים חמים כדי לשמור על חום הגוף.על משטח העבודה, אנו משתמשים במערכת אלקטרופורציה זו מתוצרת BTX. יש לנו מספר גדלים שונים של

in-utero-intraventricular-injection-electroporation-e15-mouse

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

בשנת הזרקה תוך חדרי ברחם ו electroporation של E16 עוברים עכברוש

בניתוח הישרדות ברחם אצל עכברים מאפשר מניפולציה המולקולרי של ביטוי גנים במהלך ההתפתחות. כאן אנו מתארים את השימוש בתדר גבוה הדמיה אולטרסאונד כדי להנחות את הזריקה של וקטורים retroviral לתוך המוח העכבר ביום עובריים (E) 9.5.

אולטרסאונד מונחה Microinjection לתוך forebrain העכבר בתוך הרחם ב E9.5

ב electroporation ברחם מאפשר למסירה גן מהירה באופן מרחבית, ובזמן שבשליטת במערכת לפתח את העצבים המרכזית (CNS). כאן אנו מתארים וישימה מאוד בפרוטוקול electroporation ברחם, שניתן להשתמש בהם כדי לספק בונה ביטוי עובריים לתוך מערכת העצבים המרכזית מספר תחומים, כולל diencephalon telencephalon, ואת הרשתית.

ג&#39;ין אספקה ​​יעילה לתוך השטחים CNS מרובים באמצעות בתוך הרחם Electroporation

העברת גן שיטה למוח עכבר בפיתוח מתואר באמצעות שיטה ניתוחית ייחודית צורה מיוחדת של אלקטרודות. זו טכניקה ייחודית זו מאפשרת transfection של DNA פלסמיד temporally מרחבית, אשר יסייעו מדעני מוח רבים בחקר התפתחות המוח.

עכבר בתוך הרחם Electroporation: ג&#39;ין מבוקרת transfection Spatiotemporal

שליטה על ההתפשטות של תאי גזע הסומטיים היא גורם מרכזי פוגעות המחקר והשימוש בטיפול שלהם. כאן אנו מתארים מערכת באופן זמני להרחבת שליטה עצבית גזע תאים במהלך ההתפתחות ובגרות, אשר ניתן להשתמש כדי להגדיל את מספר הנוירונים שנוצרו במוח העכבר.

התרחבות של תאי גזע עצביים עובריים ומבוגרים על ידי<em&gt; ברחם</em&gt; Electroporation או הזרקת Stereotaxic ויראלי

סרטון זה מדגים את העברת הדנ"א של פלסמיד לתאי עצב צרבלריים של עוברי מורין באמצעות אלקטרופורציה ברחם. שיטה זו שימושית כדי להשיג הבנה של תפקוד in vivo של גנים בהתפתחות מוחית תקינה והשינויים בביטוי גנים של תאי נוירון במהלך התקדמות הגידול.

In utero Electroporation Based Gene Delivery: טכניקה להזרקת DNA פלסמיד לתאי המוח הקטן העובריים של עוברי מורין

למרות החשיבות הפונקציונלית ורפואית של...

מניפולציה גנטית של העכבר באמצעות פיתוח היפותלמוס<em&gt; ברחם</em&gt; Electroporation

פרוטוקול זה מתאר בפירוט כיצד להעביר באופן ספציפי אזורים שונים במערכת העצבים המרכזית C57BL/6 באמצעות אלקטרופורציה ברחם. פרוטוקול זה כולל הוראות מפורטות לטרנספקציות של אזורים המתפתחים לקליפת המוח, ההיפוקמפוס, התלמוס, ההיפותלמוס, גרעין המחיצה הצדדית והסטריאטום.

Cortex-, Hippocampus-, Thalamus-, Hypothalamus-, רוחב מחיצת גרעין, וסטריאטום ספציפי<em&gt; ברחם</em&gt; Electroporation בC57BL / 6 העכבר

כפול בתוך הרחם מאפשר מיקוד אוכלוסיות תאים כי הם מופרדים באופן זמני. טכניקה זו שימושית כדי להמחיש אינטראקציות בין אוכלוסיות תאים אלה באמצעות חלבונים פלורסנט בתנאים נורמליים, אך גם לאחר ניסויים פונקציונליים כדי perturb גנים של עניין.

כפול ברחם באמצעות אלקטרופורציה ועד לאוכלוסיית היעד באופן זמני ולאוכלוסיות שאינן מופרדות

בפרוטוקול זה אנו מתארים כיצד להזריק לעכבר את חלל מי השפיר ב-E7.5 עם לנטי-וירוס, מה שמוביל להתמרה אחידה של כל הצלחת העצבית, עם השפעה מזיקה מינימלית על ההישרדות או ההתפתחות העוברית.

מיקוד צלחת עצבית מורין על ידי ננו-הזרקת רחם (NEPTUNE) ביום עוברי 7.5

למדו את שיטת ההזרקה התוך-חדרית וחשמול עוברי עכברים בגיל E15 לחקר מוח מתפתח. טכניקה זו מאפשרת מניפולציה גנטית ממוקדת במחקר נוירוביולוגיה התפתחותית.

בשנת הזרקה תוך חדרי ברחם ו electroporation E15 של עוברי עכברים

גלה סרטונים נוספים