אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 3:46 דק׳ • October 30th, 2025
התחל עם עכברה שהוזרקה עם תאי גידול שד המבטאים לוציפראז.
תאי הגידול מתרבים באתר ההזרקה ומתפתחים לגידול ראשוני.
הנח את העכבר בתא הדמיה עם זרימת הרדמה כדי להרדים את העכבר.
לאחר מכן, הזריק לוציפרין, מצע ללוציפראז, לעכבר המרדים.
לוציפרין מסתובב ונכנס לתאי הגידול, ומגיב עם לוציפראז כדי לפלוט ביולומינסנציה.
באמצעות מערכת ההדמיה, לכוד את אות הביו-לומינסנציה מהעכבר.
עם הזמן, הגידול מתקדם באתר הראשוני ושולח גרורות לריאות.
רכוש את תמונת העכבר במרווחי זמן קבועים והגדר אזורי עניין.
בהתבסס על עוצמות הביו-לומינסנציה, בנה קינטיקה של גידול גידול עבור שני האתרים.
עם הזמן, עלייה מתמדת באות באתר הגידול הראשוני מצביעה על התפשטות מתמשכת של הגידול.
עם זאת, עלייה חדה בביולומינסנציה של הריאות בנקודות זמן מאוחרות יותר מצביעה על גרורות של תאי גידול.
כדי להתחיל, שמרו על קו התאים 4T1 בתוספת התוסף של Dulbecco's Modified Eagle Medium או DMEM. דגרו את התאים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באטמוספירה לחה המכילה 5 אחוז פחמן דו חמצני.
העבר את קו התאים 4T1 עם הגן Luc2 כדי לבטא לוציפראז, אנזים ביולומינסנט המיוצר באופן מכונן. דגרו על התאים כדי לשמור אותם מוכנים להזרקת עכברים.
חמש דקות לאחר הרדמה והכנה של עכבר נקבה Balb-C, יש להזריק פעמיים פי 10 בעוצמה של חמישה תאי 4T1 המבטאים לוציפראז באופן תת עורי לגב השמאלי באמצעות מזרק אינסולין של
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים