מידול פגוציטוזיס מתווך משלים באמצעות תאי דם אדומים אופסוניים במבחנה

0 צפיות3:22 דק' • January 30th, 2026

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

קחו לדוגמה תאי דם אדומים של כבשים (SRBCs) של IgM-אופסוניים עם נוגדני IgM הקשורים לאנטיגנים על פני התא.

הוסיפו סרום המכיל חלבוני משלים למעט C5.

קומפלקס C1 נקשר לנוגדנים והופך לפעיל.

C1 המופעל חותך את C4 ו-C2, ויוצר את C3 convertase, אשר לאחר מכן חותך את C3 ומפקיד את C3b על ה-SRBCs.

בלי C5, C3b מתדרדר ל-C3bi.

הוסיפו את ה-SRBCs לתרבות המאקרופאג'ים.

C3bi נקשר לקולטן המאקרופאג', ומפעיל את הפגוציטוזיס של SRBC.

הוסף תמיסה היפוטונית לליז והסרת SRBCs שאינו מופנם.

הוסף בופר ליזיס כדי לעבור את התאים ולשחרר המוגלובין של SRBC.

הכנס מגיב גילוי.

בנוכחות אוריאה, המוגלובין מזרז את חמצון הדיאמינופלואורן על ידי מי חמצן, ויוצר תוצר צבעוני.

מדדו את הספיגה של התוצר הצבעוני, שהיא פרופורציונלית ל-SRBCs שנפגעו.

בדיקה זו מדמה פגוציטוזיס של חיידקים מסומנים בנוגדנים באמצעות SRBCs אופסוניים לחיקוי מטרות חיידקיות.

לבדיקת אופסוניזציה, יש לדגור 2 פעמים 10 עד שמינית תאי דם אדומים של כבשה או SRBC עם 50 מיקרוליטר של אימונוגלובולין M או IgM נגד SRBC ארנבים למשך 30 דקות בטמפרטורת החדר.

לאחר מכן, דגרו את ה-SRBCs האופסוניים עם 50 מיקרוליטר של סרום אנושי חסר C5 למשך 30 דקות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס כדי לקבע את שברי המשלים המעכבים C3b ו-C3b על SRBCים מצופים IgM.

לאחר מכן, שואף את המדיה והוסיף 100 מיקרוליטר של 1 כפול 10 לשבעת SRBCs אופסוניים לכל מיליליטר של מדיום לכל באר של צלחת 96 בארות המכילה 1 כפול 10 למקרופאגים רביעיים של עכברים שגודלו בלילה לכל באר.

דגרו את המקרופאגים של SRBC במשך שעה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ואז הסרו את ה-SRBCs הלא קשורים על ידי שטיפה עם 100 מיקרוליטר של באפר ליזיס אמוניום כלוריד-אשלגן למשך דקה.

לאחר שה-SRBC הלא קשורים הוסרו, יש לשטוף עם 100 מיקרוליטר של מדיה. ליז את התאים הנותרים עם 0.1% נתרן דודציל סולפט וטיפול בליזטים ב-50 מיקרוליטר של 2,7-דיאמינופלואורן בתוספת 3% מי חמצן ו-6 אוריאה מולרית.

לאחר מכן מדדו את הספיגה של יצירת הפלואורן הכחול המקוטזת על ידי המוגלובין על ספקטרופוטומטר ב-620 ננומטר.

השתמשו בעקומה סטנדרטית בערכי ספיגה של 620 ננומטר עם מספר ידוע של SRBCs כדי לקבוע את מספר ה-SRBCs האופסוניים שעברו פגוציטיזציה.

08:04

חזותי בשלבים המוקדמים של Phagocytosis

סרטונים קשורים

0 צפיות

07:24

זמן לשגות הדמיה תלת-ממדית של Phagocytosis על ידי העכבר מקרופאגים

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:41

חקירת הפאגוציטוזה של לישמניה באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית

סרטונים קשורים

0 צפיות

04:33

הדמיה בזמן אמת של מקרופאגים פגוציטוזה של תאי דם אדומים מסוג IgG

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:30

בדיקה לחקר פגוציטוזה מונעת קולטן Fcγ במונוציטים מונושכבות

סרטונים קשורים

0 צפיות

04:13

הדמיה מבוססת מיקרוסקופיה TIRF של היווצרות וסגירת פגוזום

סרטונים קשורים

0 צפיות

04:03

בדיקת מבחנה למדידת פגוציטוזה תאית תלוית נוגדנים על ידי פגוציטים

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:22

טכניקת התפוקה Fluorometric גבוהה להערכה של מקרופאג phagocytosis ויקטין פלמור

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:07

"Assay סגירת Phagosome" לדמיין גיבוש Phagosome בשלושה ממדים באמצעות סך פנימית השתקפות מיקרוסקופ פלואורסצנטי (TIRFM)

סרטונים קשורים

0 צפיות

06:27

שימוש Assay מונוציטים חד שכבתי להערכת Fcγ קולטן בתיווך Phagocytosis

סרטונים קשורים

0 צפיות

עודכן לאחרונה: 1 אוגוסט 2026