העברת מיקרובקטריום טוברקולוזיס באירוסול לזיהום ריאתי במודל עכבר

התחל עם מלאי קפוא של Mycobacterium tuberculosis, חיידק פתוגני שגורם לשחפת ריאתית.

הפשיר את הבקבוקון וערבב בעדינות את המתלה כדי לפזר גושי חיידקים ולהבטיח ריכוז אחיד.

לדלל את הנפח הנדרש בבופר סטרילי להכנת אינוקולום אירוסול סטנדרטי.

כבול עכבר במחזיק רשת כדי להגביל תנועה, והניח אותו בתוך תא החשיפה האטום לאירוסולים.

טען את החיסון המוכן למזרק והזריק אותו ליחידת הנבולייזר שמחוברת לתא.

הפעל את מערכת השאיפה, שמשתמשת באוויר דחוס כדי להתפזר את המתלים לטיפות דקות וניתנות לנשימה.

טיפות אלו, המכילות את M. tuberculosis החי, מתפזרות לאוויר התא.

העכבר המודע שואף את האירוסול, מה שמאפשר לחיידקים חיים לחדור עמוק לריאות ולהתחיל זיהום.

מודל העכבר של שחפת ריאתית מוכן כעת למחקרים נוספים.

התחילו בחימום מלאי Mycobacterium tuberculosis של טיטר CFU ידוע. כאשר התאים הפשירו, השתמשו במזרק בנפח 1 מיליליטר עם מחט בקוטר 27 כדי לערבב בזהירות את המתלים חמש פעמים כדי לפזר את גושי החיידקים ולמנוע ייצור אירוסולים. בהתאם למינון הזיהום הרצוי, העבר את נפח המלאי המיובקטריאלי הנדרש לצינור של 50 מיליליטר המכיל PBS סטרילי לנפח סופי של 6 מיליליטרים. לאחר מכן, מניחים את בעלי החיים הניסיוניים בנפרד לסלי רשת מחולקים. הניחו את הסלים בתא האירוסול המעגלי וסגרו את המכסה של התא.

חבר את יחידת הנבולייזר של Venturi לשלושת מפרקי השקע מנירוסטה. שאופים את המתלה המיקובקטריאלי לתוך מזרק 10 מיליליטר, מצויד במחט קהה בקוטר 18, והעבירו את המזרק לתא האירוסול בתיבת הובלה סגורה. כעת הסר את מכסה הברג של הנבולייזר והזריק בזהירות את תליית המיקובקטריקה לתוך היחידה, תוך היזהרות מפני יצירת אירוסולים.

זרוק את המזרק למיכל sharps המכיל 2% בורטון, ואז אטום את הנבולייזר.

הפעל את מכשיר השאיפה.

כאשר המחזור מסתיים, ודאו שספנישן המיקובקטרי נבבוליזציה מלאה.