בידוד חיידקים מהמעי הבינוני של היתוש

התחילו עם שקופית המכילה יתוש בוגר מורדם בטיפה של סליין מפוזר פוספט או PBS.

תחת מיקרוסקופ ניתוח, הסר את רגליו, כנפיו וראשו של היתוש.

חתכו את קצה הבטן כדי למנוע נזק למערכת העיכול.

אבטח את החזה וקצה הבטן, ואז משוך בעדינות את מערכת העיכול החוצה כדי להוציא אותו.

מערכת העיכול המופקת כוללת את המעי, שאחראי לעיכול ומכיל מגוון חיידקי מעי המשפיעים על פיזיולוגיית היתושים.

בהגדלה גבוהה יותר, הסר בזהירות את המבנים הסובבים כדי לבודד את המעי.

העבר את מערכת העי המבודדת לצינור טרי המכיל PBS.

הומוגניזציה של המעי האמצעי כדי לשחרר את החיידקים ל-PBS.

מרחו את ההומוגננט המדולל על צלחת אגר מזינת.

דגור את הפלטה כדי לאפשר למושבות חיידקיות לגדול, המייצגות את הפלורה המיקרוביאלית של מעי היתוש המרכזי.

נתח את היתוש בנפרד על סלייד זכוכית סטרילי המכיל טיפה של PBS. הסר בזהירות את הרגליים, הכנפיים והראש של היתוש באמצעות מלקחיים.

מהדקים את החזה של היתוש ואת החלק האחרון של הבטן במלקחיים ומשכו אותם לבידוד מערכת העיכול.

השתמש במלקחיים כדי להסיר את התבואה ואת צינור המלפיגיאן ממערכת העיכול. הגידול ממוקם בקדמת המעי האמצעי ובבליטות לאחר שתיית מי סוכר. צינורות מלפיגיאן הם קבוצת צינורות הפרשה דקים במפגש בין המעי האמצעי למעי האחורי.

הכניסו את המעי הבינוני המנותח לתוך צינור EP עם בופר PBS סטרילי של 200 מיקרוליטר וטחנו אותו עם עלי הטחינה הסטרילי בספסל הנקי מאוד. מדלל את ההומוגנט בסדרה לשלוש דילול של 10 פעמים ב-50 מיקרוליטר מכל דילול לפלטת האגר LB ואז לפזר את הפלטה.

דגרו את הפלטה בטמפרטורה של 37 מעלות למשך יום עד יומיים עד שמושבות בודדות נראות.