הדמיה בזמן אמת של זיהום חיידקי במודל עכבר באמצעות ביולומינסציה

קחו עכבר מורדם שנדבק מראש בזן חיידקי פתוגני שהונדס לביטוי אופרון ביולומינסציה משולב גנטית.

האופרון מקודד לוסיפראז וקומפלקס מולטי-אנזימי שמסנתז את הסובסטרט שלו.

אנזים הלוציפראז מזרז תגובה עם הסובסטרטים הללו, ומייצר זוהר נראה לעין.

הניחו את העכבר בשכיבה על הפלטפורמה המיוצבת בטמפרטורה של תא הדמיה ושמרו על ההרדמה במהלך ההדמיה.

השתמש במערכת ההדמיה כדי ללכוד הן תמונות ביולומינסנטיות והן תמונות רנטגן מקבילות של העכבר.

התמונה הביולומינצנטית חושפת את היקף הזיהום החיידקי, בעוד שתמונת הרנטגן מספקת התייחסות אנטומית למיקום הזיהום.

לאחר ההדמיה, החזירו את העכבר לכלוב ואפשרו התאוששות.

לצלם תמונות ביולומינסציה במרווחים קבועים כדי לעקוב אחרי התקדמות הזיהום החיידקי בזמן אמת.

עם הזמן, נוכחות אותות ביולומינסנטיים במיקומים שונים מאשרת את התפשטות הזיהום ברחבי המארח.

כדי לצלם את החיות, יש להכין את מערכת ההדמיה על ידי הגדרת פרמטרי המצלמה וחימום הבמה. כוונו את זרימת החמצן ל-1.5 ליטר לדקה ואת איזופלורן ל-3.5% והעבירו את העכבר לתא ההרדמה, ואז לשלב יציב הטמפרטורה, לאחר ההרדמה. מקם את העכבר על גבו עם ידיים פרושות והתקן חרוט אף למתן איזופלוראן של 2.5% במהלך ההדמיה.

סגור את הדלת וצלם תמונות ביולומינסצנטיות וצילומי רנטגן של העכבר. כאשר ההדמיה מסתיימת, החזר את העכבר לכלוב שלו ועקוב אחריו. הוא אמור להתעורר תוך 3 עד 5 דקות.