המחשה של זיהום בדרכי השתן במודל עכבר באמצעות ביולומינסצנציה

התחילו בעכבר מורדם, ובאמצעות קטטר, הזריקו תלייה של חיידקים פתוגניים לשלפוחית השתן.

חיידקים אלו נושאים אופרון ביולומינצנטי, המאפשר ייצור אור אוטונומי לעקוב אחר הזיהום.

הרירית הפנימית של שלפוחית השתן היא אפיתל מיוחד שמפריד בין הלומן לרקמה התחתונה.

חלבוני ההיצמדות החיידקיים נקשרים לקולטני הגליקופרוטאין על פני האפיתל של המארח, וגורמים לאנדוציטוזה המתווכת על ידי הקולטנים.

החיידקים הפנימיים משתכפלים ליצירת קהילות חיידקים תוך-תאיות צפופות.

החיידקים מבטאים את האופרון הביולומינסצנטי, ומייצרים אנזים לוסיפראז וקומפלקס אנזימים שמסנתז את תת-הלוסיפראז.

לוציפראז מחמצן את המצע כדי לפלוט אור נראה.

מקם את העכבר בתוך תא ההדמיה ותפס את אות הביולומינצנטי.

בחר אזור עניין וכמת את עוצמת הביולומינסנציה.

עקבו אחר אות זה לאורך זמן כאינדיקטור בזמן אמת לעומס חיידקים והתקדמות זיהומים.

פתח את תוכנת רכישת BLI ולחץ על Initialize במכשיר ההדמיה כדי לבדוק את מערכת המצלמה ומערכת בקר הבמה ולקרר את מצלמת המכשיר המחובר לטעינה למינוס 90 מעלות צלזיוס. לחץ על רכישה, שמירה אוטומטית ל-. בחר זוהר וצילום. בדוק את הגדרות ה-luminescent ברירת המחדל על ידי הגדרת מסנן ההתרגשות ל-Block ומסנן הפליטה ל-Open.

הגדר את זמן החשיפה לאוטומטי כשאתה מצלם את התמונה הראשונה. למדידות in vivo ואותות בהירים, הגדר את זמן החשיפה לכ-30 שניות. הקטן את זמן החשיפה אם מופיעה אזהרה בגלל תמונה רוויה.

בחר את שדה הראייה הבינוני, F/stop אחד, ובחר את שדה הראייה הנכון. הגדר את גובה הנבדק ל-1 סנטימטר בעת הדמיה של עכברים. צילם עד 5 עכברים בו זמנית והפריד בין בעלי החיים באמצעות מחסום האור כדי למנוע השתקפות.

סגור את הדלת ולחץ על Acquire כדי להתחיל את רצף הדמיה. לאחר מכן מלא מידע מפורט על הניסוי. הוציאו עכברים מתא ההדמיה והחזירו אותם לכלוב שלהם. בדוק אם יש החלמה מלאה אחרי הרדמה. לאחר מכן להחזיר את הכלובים למדפים מאווררים עד למחזור ההדמיה הבא.

הפעל את תוכנת ההדמיה וטען את קובץ הניסוי על ידי לחיצה על 'עיון'. השתמש בפלטת הכלים כדי להתאים את גודל הצבעים של התמונה. השתמש בכלי ROI כדי לצייר אזור מעניין בתמונה, לוודא שהוא גדול מספיק לכסות את כל השטח ולהשתמש באותם מידות לכל התמונות. לאחר מכן, לחץ על מדידת ROI כדי לכמת את עוצמת האור.