אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:34 דק׳ • January 30th, 2026
התחל עם עכבר ער, מוגבל כדי להגביל את תנועתו.
הטה את הראש כלפי מטה כדי לחשוף את הבטן התחתונה.
מצאו את קו האמצע של הבטן וזיהו מקום הזרקה מעט לא במרכז כדי למנוע איברים פנימיים.
לאחר מכן, קחו מזרק המכיל תמיסה של ליפופוליסכרידים, רכיב במעטפת תאי חיידק גרם-שליליים.
מכניסים את המחט לאתר כדי להגיע לחלל הפריטוניאלי, ולהזריק את התמיסה.
לאחר ההזרקה, ה-LPS נכנס למחזור הדם המערכתי ומפעיל תגובה חיסונית.
בזרם הדם, LPS נקשר לחלבון הקשור ל-LPS, שמעביר אותו ל-CD14, חלבון ממברנה על תאי מערכת החיסון.
CD14 מעביר LPS ל-MD-2, גליקופרוטאין המקושר לקולטן דמוי טול 4 (TLR4), ומאפשר דימריזציה של TLR4.
TLR4 הדימריזציה מגייסת חלבוני אדפטור שמפעילים מסלולי איתות במורד הזרם, ומעוררים ביטוי ציטוקינים פרודלקתי ודלקת מערכתית.
זה מדמה טרנסלוקציה מיקרוביאלית והפעלה חיסונית מערכתית במעי ובאיברים אחרים הנגרמות על ידי מוצרים חיידקיים.
תטפלו בעכבר בעדינות אך בנחישות, ותחזיקו את החיה ביד אחת. ודאו שהעכבר מוחזק היטב ויכול לנשום כרגיל.
הטה את אף העכבר מעט לכיוון הרצפה כדי לחשוף את הבטן להזרקה. מצא את קו האמצע של הבטן והזריק את נפח ה-LPS הנדרש בצד התחתון-שמאלי או הימני.
חשוב מאוד לוודא שהמחט נכנסת לחלל הפריטונאלי כדי למנוע הזרקות שגויות.
המחט גם לא צריכה להיכנס עמוק מדי לחלל הפריטונאלי כדי למנוע פגיעה באיברים הפנימיים.
החזירו בעדינות את החיה לכלוב הבית.
עקבו אחר העכברים להופעת וחומרת האנדוטוקסמיה בזמן ההזרקה וכל שעתיים לאחר מכן במשך 8 שעות. רשום את התצפיות בדף הניקוד המצורף.