$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
התחילו בעכבר שהושמד עם שלפוחית חשופה, נגועה מראש בחיידקים פתוגניים.
החיידקים פולשים לאורותליום ויוצרים מושבות. עם הבגרות, חיידקים אלו קורעים את תא האפיתל ומדביקים את התאים הסובבים.
הכנס קטטר שמחובר למזרק מלא בקיבוע. הטמיעו לאט את הקיבוע כדי לנפח את השלפוחית ולשמר את הארכיטקטורה שלה.
מהדק את השופכה כדי לשמור על הקיבוץ ולשמור על צורת שלפוחית השתן.
הסר את הקטטר, ואז חתך את השופכה. העבר את שלפוחית השתן לקיבוע טרי ודגר לשמירת המבנה.
חלקו את השלפוחית לשתי כוסות חצי שלפוחית כדי לחשוף את האורותליום, ושטוף עם בופר.
צבעו בחומר מגובה מתכתי לשיפור הניגודיות, ואז שטפו במים אולטרה-טהורים.
ייבשו את החלקים באמצעות גרדיאנט אתנול, ולאחר מכן ייבוש בנקודת קריטית.
חתוך כל שלפוחית מיובשת לחצי.
הדגימה מוכנה כעת לעיבוד בהמשך כדי להמחיש אינטראקציות בין מארח לפתוגן.
לאחר שמזרק קצה ההחלקה של טוברקולין עם קיבוע, הדביק קטטר לקצה, כשהשפע פונה מול סימני המזרק.
גזום את הצינור העודף במרחק של 1 עד 2 מילימטרים מקצה המחט, תוך היזהרות שלא לחשוף את קצה המחט. הפעילו את המזרק כדי להסיר בועות ולחצו את הבוכנה לאוויר הריק. לאחר מכן מלא את הקטטר בקיבוע מעל צינור מיקרוצנטריפוגה. לאחר הרדמה והקרבת העכבר, לאחר שהרגליים מאובטחות, פתח את אזור האגן של העכבר עם מלקחיים וזוג מספריים כירורגיים כדי לחשוף את שלפוחית השתן. דחפו בזהירות את השומן הסמוך, אך השאירו את שלפוחית השתן במקום.
החזק את המזרק עם היד הדומיננטית כשהמחט פונה למטה. טבלו את קצה הקטטר בחומר סיכה סטרילי ומקמו את קצה הקטטר בפתח השופכה, תוך החזקת קנה המזרק בזווית של 30 עד 45 מעלות מעל גוף העכבר.
הפעילו לחץ כלפי מטה בתנועה קלה עם כיוון השעון והכניסו בעדינות את הקטטר לשופכה. כאשר קצה הקטטר נכנס, הפך את המזרק לכיוון הזנב של העכבר תוך המשך החלקת הקטטר עמוק יותר לתוך השופכה עד שקנה המזרק מקביל לפני השטח של העבודה. כל ציר המחט של הקטטר צריך להיכנס לעכבר, ולמקם את קצה הקטטר בתוך לומן השלפוחית. אספו לאט 50 עד 80 מיקרוליטר של קיבוע, מה שגורם לשלפוחית השתן להתנפח כמו בלון.
השאר את הקטטר במקום והרים מעט את המזרק, תוך הטיית הקצה כלפי מעלה. ביד השנייה, פתחו את המוסטט והחליקו שיניים מתחת למחט הקטטר בצומת השופכה. סגור חלקית את ההמוסטט עד שהוא פשוט נוגע במחט.
החלק בעדינות את מחט הקטטר החוצה משלפוחית השתן תוך כדי הידוק ונעילת ההמוסטט לחלוטין כדי למנוע אובדן הקיבוע. אחוז את ההמוסטט כך שיהיה מקביל למשטח העבודה כשהשלפוחית מונחת עליו. הרימו בעדינות וחתכו בזהירות מתחת להמיסטט כדי להסיר את שלפוחית השתן כשההמוסטט עדיין מחובר.
הכניסו את שלפוחית השתן וחיברו את המוסטט לצינור פלקון המכיל קיבוע מחומם. ודאו שהשלפוחית שקועה לחלוטין בנוזל ולא לחוצה אל דפנות הצינור.
כדי לדמות את שלפוחית השתן באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק, חצו אותה בקשת עם להב גילוח או סכין דו-צדדיים נקיים, וצרו חתך שני משיק להמיוסטאט כדי לשחרר את השלפוחית. זה מוביל לשתי כוסות חצי שלפוחית. אם נשארו כריות שומן בחלק החיצוני של שלפוחית השתן, הסירו אותן בעדינות.
שטוף את חלקי השלפוחית שלוש פעמים בבופר קקודילאט נתרן. צבעו את הרקמה ב-1% אוסמיום טטרוקסיד בבופר קקודילט מולרי של 0.15 למשך שעה בטמפרטורת החדר. בצע את השלב הזה עם כלי הצביעה עטוף בנייר כסף כדי לשמור על סביבה חשוכה. לאחר הכתמה, שטוף את חצי השלפוחית שלוש פעמים במים טהורים במיוחד.
אם נראה שמן אוסמי על פני המים, יש לשאוב או לסחוט אותו כדי למנוע זיהום במהלך שלבי הייבוש. לאחר ייבוש הרקמה, חצו את חלקי השלפוחית עם סכין גילוח נקייה דו-צדדית ליצירת ארבעה חלקים בסך הכל.