אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:43 דק׳ • February 2nd, 2026
התחילו עם צלחת אגר סלקטיבית של חומרים מזינים המושלמת עם תאי דם אדומים המכילים דם.
Streak Staphylococcus aureus (S.aureus), חיידק פתוגני גרם-חיובי, על האגר ודוגר.
במהלך הדגירה, חיידקים מנצלים חומרים מזינים, גדלים ויוצרים מושבות.
S. aureus מפריש המוליזין, רעלן יוצר נקבוביות שמפשט את תאי הדם האדומים באגר ומייצר אזורים שקופים וברורים סביב המושבות, המעידים על המוליזה.
בחר מושבה המוליטית, החסן אותה למרק תזונה, ודוגר בתנאים מתחלפים לתמיכה בצמיחת חיידקים.
באמצעות ספקטרופוטומטר, מדידו צפיפות אופטית (OD) כדי לקבוע ריכוז חיידקים.
בהתבסס על קריאת ה-OD, העבר אליקווט למרק טרי כדי לדלל את התאים, ודגר באמבט מים עם ניעור.
מדדו את ה-OD במרווחים קבועים.
OD קרוב ל-0.8 מצביע על כך שהחיידקים הגיעו לשלב הגדילה האקספוננציאלי עם פיזיולוגיה אחידה.
S . aureus ההמוליטי הזה מוכן למחקרים בין המארח לפתוגן.
התחילו בתנועת S. זני אוראוס מעניינים על לוחות אגר דם ממאגר גליצרול קפוא ודגירה של הלוחות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 16 עד 24 שעות כדי לאשר את הפנוטיפים ההמוליטיים שלהם בהתבסס על יכולתם לפצח תאי דם אדומים וליצור אזורים שקופים וברורים.
החרינו מושבות בודדות של כל זן ב-4 מיליליטר של מרק סויה טריפטי (TSB), בצינורות זכוכית סטריליים וסובבו את הצינורות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 16 עד 24 שעות בגלגלת צינורות בזווית של כ-70 מעלות וב-70 סיבובים בדקה. למחרת בבוקר, מדוד את הצפיפות האופטית ב-600 ננומטר, או OD600, של התרביות בספקטרופוטומטר ודילל התאים ל-OD600 של 0.05 ב-25 מיליליטר של TSB סטרילי ביחס 5 ל-1 של בקבוק לנפח בבקבוקי דה-לונג של 125 מיליליטרים. דגרו את התרביות באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס בקצב של 280 סיבובים בדקה.