JoVE Encyclopedia of Experiments
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 1:28 דק' • January 30th, 2026
התחל עם דגימת מים מזוהמת שכנראה מכילה קוליפורמים צואתיים, כולל E. coli.
לבצע דילול סדרתי במים מזוקקים כדי להפחית עכירות ועומס מיקרוביאלי.
ערבבו את הדגימה המדוללת הרצויה עם החומר המזין והעמיסו אותו לשבב מיקרופלואידי.
השתמש בסינון ואקום כדי ללכוד חיידקים על ממברנה בתוך תעלת הסרפנטין של השבב.
הוסיפו מדיום מזין לתא העליון ודגרו אותו כדי לשפר את התאוששות החיידקים.
החליפו את המדיום בתמיסה של פאגים ספציפיים ל-E. coli הנושאים את גן הלוציפראז.
הדגירה כדי לאפשר זיהום פאג', שבו ה-DNA של הפאג' משכפל, מפרק את DNA המארח ויוצר פאג'ים חדשים יחד עם יצירת לוסיפראז. לאחר מכן, התאים הנגועים מתפרקים כדי לשחרר את הלוציפראז.
מרח סינון ואקום כדי להעביר את הלוציפראז לממברנת לכידה.
הוסיפו מצע שמגיב עם לוסיפראז כדי לייצר אות זוהר.
באמצעות צינור פוטומולטיפלייר, מדדו את הזוהר, שהוא פרופורציונלי למספר תאי האי-קולי הבריאים בדגימת המים.