JoVE Encyclopedia of Experiments
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 1:36 דק' • January 30th, 2026
קחו תרבית דבק של מקרופאגים של עכברים.
לטפל היטב במבחן עם בופר שמכיל Wnt5A, מולקולת איתות, והבקרה עם בופר בלבד.
להדביק בפתוגן חיידקי ולדגור.
בתאי הבדיקה, Wnt5A מפעיל מפל איתות שמגביר את ארגון מחדש של שלד הציטוסקלט כדי להגביר את קליטת החיידקים לפגוזומים, בעוד שתאי הבקרה שחסרים איתות זה מפנים פחות חיידקים.
שטפו להסרת חיידקים לא מופנמים, ואז דגרו עם מדיום המכיל אנטיביוטיקה כדי לסלק חיידקים חוץ-תאיים שנותרו.
איתות Wnt5A מכין את הפגוזומים המכילים חיידקים למיזוג עם ליזוזומים, מה שמאפשר פירוק חיידקים.
חלק מהחיידקים בורחים על ידי קרע של פגוליזוזומים.
בתאי הביקורת, בגרות מוגבלת של פגוזומים מובילה לבריחה מוגברת.
קצור את התאים בנקודות זמן מוגדרות. הוסף מים מזוקקים כדי לגרום לזעזוע אוסמוטי, להפרת התאים ולשחרר חיידקים תוך-תאיים.
מרח את הליזטים על לוחות אגר ודגם.
ספירת מושבות כדי להעריך את הירידה החיידקית התלויה בזמן בתאים שטופלו ב-Wnt5A.