אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:05 דק׳ • February 26th, 2026
קחו צלחת רב-בארית המכילה תלויות של חיידק לא פתוגני, המשמש כאמצעי בקרה, וזנים שונים של חיידקים פתוגניים כדי להעריך את אלימותם היחסית.
החיידקים תלויים במדיום מוגבל בחומרים מזינים כדי למנוע צמיחה מופרזת ולחקות סביבה המעודדת זיהום.
הוסיפו תולעי C. elegans בשלב L4 לכל באר ודגרו את הפלטה תחת ערבוב מתמשך כדי לשפר את המגע בין החיידקים לתולעים.
התולעים ניזונות מהחיידקים, שנכנסים למערכת העיכול שלהם ומתיישבים בהם.
החיידקים הפתוגניים משחררים רעלים הפוגעים ברקמות המעי, מה שמוביל לרעילות מערכתית ולמוות של התולעים.
לאחר הדגירה, ספרו את התולעים החיות בכל באר וצרו גרף להערכת שיעורי ההישרדות שלהן.
הבדלים בשיעורי ההישרדות של התולעים משקפים את האלימות היחסית של כל זן חיידק.
לאחר גידול זני Aeromonas ומדידת הספיגה שלהם כפי שתואר קודם, בצנטריפוגה של ציר החיידקים ב-3,500 גרם למשך 15 דקות. כוונו את ציר החיידקים עם S Medium והוסיפו 195 מיקרוליטר של ציר חיידקים במדיום S לשמונה בארות בצלחת עם 96 בארות. שטוף את התולעים מהפלטה של ה-ENGM עם M9 בינונית. לאחר מכן, כוונו את ריכוז תמיסת התולעת לחמישה תולעים למיקרוליטר.
הוסיפו 5 מיקרוליטר של תמיסת התולעת לכל אחת מהבארות של לוח 96 הבארות. דגרו את הצלחת על שייקר, וספרו את מספר התולעים החיות ב-24, 48 ו-72 שעות.