JoVE Encyclopedia of Experiments
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:12 דק' • February 26th, 2026
התחל עם פלטת מדיום עשירה בגידול נמטודות המכילה דשא של החיידק הפתוגני Aeromonas.
העבר תולעי C. elegans בשלב L4 המבטאות GFP ספציפי לשריר אל הדשא החיידקי ודגם.
התולעים בולעות חיידקים יחד עם חומרים מזינים. זה מאפשר לחיידקים להגיע ולהתיישב במעי.
באמצעות מערכת הפרשה מיוחדת, Aeromonas מעביר פקטורי אלימות לתאי המעי של התולעת.
גורמי האלימות הללו מתפשטים לדופן הגוף, שם הם משבשים את השריר, גורמים לנזק מבני ולנקרוזיס.
העבר את התולעים מדי יום לצלחת חדשה עם דשא חיידקי כדי לשמור על חשיפה מתמשכת לפתוגן.
מניחים את התולעים על ג'ל אגרוז עם חומר הרדמה להרדמה, ואז הניחו קוברסליפ.
באמצעות מסנן GFP, לוכדים תמונות פלואורסצנציה במרווחים קבועים.
אובדן הדרגתי של אות ה-GFP מצביע על הפרעה בשריר ב-C. elegans, המייצג נמק שריר שנגרם על ידי Aeromonas במהלך אינטראקציה בין מארח לפתוגן.
לאחר גידול זני Aeromonas וכיוונון הספיגה בהתאם לפרוטוקול הטקסט, מזהה והפזר את מרק החיידקים על לוחות NGM.
לאחר מכן, העבר 50 תולעים L4 לכל לוח NGM. כל 24 שעות העבר את התולעים לפלטות NGM טריות. בחר באקראי 10 תולעים והעבר אותן לג'ל אגרוז 2% במדיום M9 על סלייד.
לבסוף, מקם כיסוי על הג'ל וצלם תמונות שרירים עם מסנן חלבון פלואורסצנטי ירוק על מיקרוסקופ פלואורסצנטי המצויד במצלמה.