JoVE Encyclopedia of Experiments
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:11 דק' • February 26th, 2026
קחו שתי מנות המכילות מטריצות אלגינט מודפסות בתלת-ממד, שכל אחת מכילה או זני חיידקים בקרה או בדיקה.
שני הזנים מבטאים באופן קבוע חלבון פלואורסצנטי לצורך הדמיה. זן הבדיקה מכיל גם גן מושרה לייצור סיבים חוץ-תאיים חלבונים הנקראים סיבי קרלי.
הדפוסים מודפסים על מדיום מוצק עם סידן ורמנוז.
דגרו כדי לאפשר ליוני סידן לקשר את האלגינט וליצור הידרוג'ל.
בזן הניסוי, הרמנוז גורם לייצור תת-יחידות קרלי, המתאספות מעצמן על פני התא לסיבים.
השתמש בסורק פלואורסצנטי כדי לצלם את הדפוסים.
טפלו בתמיסת סידן מכילה ודגרו באמצעות ניעור כדי לאכול יוני סידן, מה שמפריע לקישורי האלגינט וממיס את ההידרוג'ל.
זרוק את הפתרון ודמיין מחדש את הדפוסים.
הטיפול גרם לתבנית הבקרה להתמוסס, בעוד דפוס הבדיקה נשאר שלם בזכות רשת התייצב של סיבי הקרלי.
דגרו את הדגימות המודפסות בטמפרטורת החדר למשך שלושה עד שישה ימים כדי לאפשר ייצור רכיבי הביופילם, כגון סיבי קורלי.
לאחר מכן, הנח את הלוחית על סורק פלואורסצנטי וצלם את הלוחות.
כדי להמיס את מטריצת האלגינט, מוסיפים 20 מיליליטר של תמיסת נתרן ציטראט 0.5 מולר ב-pH 7 למצע המודפס, דגרו את הצלחת בטמפרטורת החדר במשך שעתיים תוך ניעור ב-30 סל"ד.
לאחר מכן, להשליך את הנוזל ולצלם שוב את הצלחות, כדי להשוות לתמונות של הצלחות לפני ואחרי טיפול הציטראט.