אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:52 דק׳ • March 31st, 2026
התחל עם עכבר מורדם עם גבו חשוף, מונח על מכסה של צלחת פטרי.
לעכבר יש פצע כוויה שנדבק בחיידקים ביולומינצנטיים עמידים לתרופות.
כסו את עיני העכבר בנייר אלומיניום כדי להימנע מחשיפה מוגזמת לאור כחול.
הנח את העכבר מתחת להתקן LED כחול במרחק קבוע.
להקרין את הפצע בעוצמה קבועה. הגדל את זמן החשיפה כדי לספק מינונים גבוהים יותר.
האור חודר לרקמת הפצע ומגיע לחיידקים המתיישבים.
בתוך חיידקים אלו, מולקולות רגישות לאור סופגות את האור הכחול והופכות לפעילות אורית, ומייצרות מיני חמצן פעילים (ROS).
ROS פוגע ברכיבים חיידקיים, כולל חלבונים ביולומינסנטיים, ומוביל למוות תאי חיידקים עם נזק מינימלי לרקמות הסובבות.
לאחר כל חשיפה, יש לבצע הדמיה ביולומינסצנטית כדי לעקוב אחר חיוניות חיידקים סביב הפצע.
ככל שהמינון עולה, האות יורד בהתאם.
ירידה זו מצביעה על ההשפעה האנטיבקטריאלית של לחץ חמצוני הנגרמת מאור כחול.
לאחר הרדמת העכברים, לפי פרוטוקול הטקסט, חלקו את בעלי החיים באקראי לקבוצת אור כחול אנטימיקרוביאלי או קבוצה מטופלת ב-aBL וקבוצת ביקורת לא מטופלת. לקבוצת העכברים שטופלו ב-aBL, השתמשו בנייר אלומיניום כדי לכסות את עיני העכברים ולמנוע חשיפה מופרזת לאור. הנח את כוויות העכבר ישירות מתחת ל-LED עם מכסה של צלחת פטרי 35 מ"מ מתחת לבטן העכבר כדי לשמור על הגב במצב אופקי.
לאחר מכן, החלף את מד האנרגיה בעכבר על צלחת פטרי מרובעת. לאחר מכן כוונן את גובה העכבר למצב שבו המרחק בין צמצם ה-LED למשטח הבעירה שווה למרחק בין צמצם ה-LED לחיישן האור של מד האנרגיה. הקרינו את הכוויות הנגועות בהקרנה של 100 מיליאוט לסנטימטר רבוע.
למסור aBL באליקאוטים של 72 ג'אול לסנטימטר רבוע עד שיגיע המנה הכוללת של 360 ג'אול לסנטימטר רבוע. לאחר כל מינון אור, יש לבצע הדמיה ביולומינצנטית של כוויות העכברים, כפי שהודגם קודם בסרטון זה. עבור קבוצת הביקורת שלא טופלה, יש לבצע הדמיה ביולומינסצנטית של כוויות העכברים באותם מרווחי זמן כמו בקבוצת הטיפול ב-aBL.