יצירת גרגירי לחץ במהלך זיהום שיגלה בתאי אפיתל סרטניים

התחל עם צלחת רב-בארית המכילה תאי אפיתל סרטניים דביקים על כיסוי.

הוסיפו את Shigella flexneri, חיידק פתוגני.

צנטריפוגות את הלוח כדי לעודד מגע חיידקי עם התאים, ואז דגרו.

באמצעות מערכת הפרשה מיוחדת, שיגלה מזריק חלבוני אלימות לתאי האפיתל האפיתליאליים.

חלבוני האלימות הללו מווסתים את מערכת האיתות האפיתליאלית, ומאפשרים קליטת חיידקים.

בתוך התאים, החיידקים ממשיכים להפריש חלבוני אלימות, שמפריעים לתרגום התאים ומצטברים mRNA לא מתורגמים.

חלבוני קישור ואיתות RNA מצטברים עם ה-mRNA הלא מתורגמים, ויוצרים גרנולות ציטופלזמיות חסרות ממברנה הידועות כגרנולות מאמץ.

זרוק את המדיה ושטוף כדי להסיר חיידקים לא מחוברים.

לאחר מכן, הוסיפו מדיום תרבית מחומם מראש עם ג'נטמצין כדי להסרת חיידקים מחוברים למשטח.

הוסף מקבע לשמירה על מבני תאים וגרגירי מאמצים.

זרוק את המקבע ושוטף בניעור עדין כדי להסיר את שאריית הקיבוס.

התאים מוכנים לצביעת אימונופלואורסצנציה כדי להמחיש גרגירי מאמץ שנגרמו על ידי שיגלה.

החלף את השטיפה ב-500 מיקרוליטר של מדיום זיהום לכל באר, ויצר צנטריפוגה עם צלחת 24 בארות כדי לסובב את החיידקים על התאים.

העבירו את הקו-קולטורטורים החיידקיים שהתיישבו לאינקובטור תרבית רקמה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות כדי להקל על זיהום תאי המארח.

בסיום הדגירה, יש להסיר את החיידקים החיצוניים מהתאים באמצעות שלוש שטיפות ב-1 מיליליטר