בדיקה מהירה מבוססת תמונה לסינון אלימות חיידקית הנגרמת על פני שטח

התחל בלוחות המכילים חיידקים מחוברים למשטח וחיידקים פלנקטוניים או צפים חופשיים.

הוסף תאי אמבה לשתי הדגימות.

הניחו משטח אגרוז המכיל קלסין-AM, צבע חדיר לתאים, מעל כל דגימה.

הסר נוזלים עודפים, תן להם להתייבש, ודוגר את הצלחות.

בצלחת עם חיידקים מחוברים למשטח, מגע פני השטח מעלה את גני האלימות ומבטאים רעלים.

רעלים אלה משבשים את ממברנת האמבה ומשנים את צורתם.

ממברנת האמבה הפגועה מאפשרת ליותר קלצאין-AM להיכנס לציטופלזמה, שם אסטראזים תוך-תאיים חותכים אותם לקלצין פלואורסצנטי, מה שמוביל להצטברותו.

לעומת זאת, חיידקים פלנקטוניים, שחסרו מגע עם פני השטח, נשארים לא אלימים, ומשאירים את ממברנות האמבות שלמות. דבר זה מפחית את כניסת הקלסין-AM לאמבה, ומגביל את הצטברות הקלצין הפלואורסצנטי.

אמבות בריאות גם בולעות את החיידקים הלא אלימים.

תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי, תאי אמבה בהירים ועגולים מעידים על אינטראקציה חיידקית אלימה, בעוד שאמבה עמומה ואמורפית מעידות על אינטראקציה חיידקית לא אלימה.

כדי לבדוק אלימות של תאי חיידקים מחוברים למשטח, מוסיפים 10 מיקרוליטר של תאי אמבה מתאי חיידק מחוברים לפני השטח שהתקבלו קודם לכן.

כדי לבודד את תאי הפלנקטוניים, העבר 10 מיקרוליטר מהתרבית לצלחת פטרי טרייה.

לאחר מכן, בדוק את אלימות תאי הפלנקטוניים על ידי ערבוב של 10 מיקרוליטרים של תאי אמבה עם החיידקים הפלנקטוניים שהושגו קודם.

מיד הניחו את כרית האגר הקטנה מעל תערובת האמבה החיידקית המתאימה על משטח צלחת הפטרי.

לאחר מכן, הסר את עודפי הנוזל על ידי פיפסת נוזל עדין, ותן למנה להתייבש במשך 20 דקות.

כסו את התבנית עם המכסה ודגרו אותה בטמפרטורת החדר למשך 40 דקות נוספות. לבסוף, השתמש במיקרוסקופ פלואורסצנציה כדי לצלם תמונות של לפחות 100 תאי אמבה.