מידול זיהום במעי בזחלי דגי זברה באמצעות חיידקים המועברים במזון

התחילו עם צלחת רב-בארות המכילה פרמציה שנדבקה מראש ב-E. coli פתוגני המבטא חלבונים פלואורסצנטיים.

הוסיפו זחלי דגי זברה מורדמים ודגרו אותם יחד בתנאי יום כדי לחקות את סביבת האכילה הטבעית.

במהלך הדגירה, הזחלים מתעוררים וטורפים פרמציה נגועת.

לאחר הבליעה, הפרמסיות מתעכלות, ומשחררות את E. coli למערכת העיכול.

ההתיישבות החיידקית מתקדמת מהמעי הקדמי למעי האחורי, בדומה לזיהום שמועבר במזון.

לאחר מכן, שטפו את הזחלים במדיום עם חומר הרדמה לצורך הרדמתם מחדש.

לאחר מכן, מניחים את הזחלים באגרוז בעל נקודת התכה נמוכה בתוך לוח הדמיה פלואורסצנטי.

באמצעות מיקרוסקופ סטריאו, יישר את דג הזברה ודגר אותו כדי לאפשר לאגרוז להתקשות.

שכבה על מדיום עשיר בחומרים מזינים בתוספת חומר הרדמה.

באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי, צפו בזחלים להפצת E. coli פלואורסצנטי כדי להעריך את התקדמות הזיהום החיידקי

לזיהום המועבר במזון של דג הזברה, יש לדלל את דגימות הפרמציה ל-2 פעמים עשר עד חמש פרמסיה לכל מיליליטר של ריכוז בינוני E3 והוסף 3 מיליליטר מכל תרבית פרמסיה לבאר אחת של צלחת עם 6 בארות לכל מצב.

לאחר מכן, העבירו 10 דגי זברה מורדמים לכל באר בנפח מינימלי של נוזל ודגרו את התרבות המשותפת במשך שעתיים בטמפרטורה של 30 מעלות צלזיוס בתנור יומי בתנאי יום.

בסיום הדגירה, שטפו את דג הזברה ב-5 בארות שונות המכילות 3 מיליליטר של מדיום E3 טרי בתוספת 100 מיליגרם ללי