JoVE Encyclopedia of Experiments
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:26 דק' • March 31st, 2026
קחו זחל דג זברה מורדם בחריץ של עובש אגרוז. ראשו ממוקם כלפי מעלה בזווית לצורך גישה למעיים במהלך ההזרקה.
כסו אותו באגרוז עם התכה נמוכה, ואז אפשרו לאגרוז להתקשות ולהיתקע את הזחל.
קחו מחט מיקרו-הזרקה המכילה חיידקים פתוגניים התלויים בתמיסת צבע טריסר.
מתחת למיקרוסקופ סטריאו, מקם את המחט בזווית והנחה את המחט דרך האגרוז אל פי הזחל.
העבירו אותו דרך צינור המזון אל המעי.
הזרקו את החיידקים לתוך הלומה של המעי ואשר את המשלוח באמצעות צבע המעקב. שיטה לא פולשנית זו, הנקראת מיקרוגאבאז', מחקה את מסלול ההדבקה הטבעי.
תמשוך את המחט. חתכו את האגרוז והעבירו את הזחל למדיום טרי.
החיידקים משכפלים ומשחררים רעלים הפוגעים באפיתל המעיים, ומעודדים פלישה והתיישבות חיידקית ברקמות עמוקות יותר.
מודל ההדבקה בדגי זברה מוכן לניתוח.
בלוח אגרוז של 1.5% עם חריצים, יש להניח טיפה של 0.8% אגרוז נמוך-נמסה על זחלי דג הזברה כדי לכסות.
כוונו בעדינות את הזחלים כשראשי הראש פונים זקופים בזווית של 45 מעלות בחריץ והזנבות כנגד דופן החריץ. הפעל בעדינות את המחט דרך האגרוזה, ואז לתוך פי זחלי דגי הזברה, דרך הוושט. כאשר קצה המחט נכנס לנורה הקדמית של המעיים, לחץ על דוושת ההזרקה כדי לשחרר 0.5 עד 1 ננוליטר של תרבית חיידקים.
למלא את הלומן של המעי. אל תתנו לו לעלות על המים מהוושט או הקלואקה. משכו בעדינות את המחט מפיו של דג הזברה. לאחר הגוואג', מצילים את זחלי דג הזברה הנגועים מהאגרוז באמצעות קצה מיקרולודר גמיש, תחילה על ידי חיתוך האגרוז, ואז על ידי הרמת הזחלים.