חיסון פתוגן חיידקי לעלים של ארבידופסיס באמצעות חדירת ואקום

קחו תרבית חיידקים שיכולה להדביק רקמת עלים.

גרד את המושבות ותשהה בתמיסת מלח.

מדדו את צפיפות האופט כדי להעריך את ריכוז החיידקים, ואז מדללים ל-OD הרצוי.

בצע דילול סדרתי כדי להגיע לריכוז החיסון הסופי.

הוסף חומר פעיל כדי להפחית את מתח הפנים ולהבטיח התפשטות אחידה של חיידקים על העלה.

העבר את המתלה לצלחת פטרי.

לאחר מכן, מניחים שני מקלות עץ על ראש סיר ערבידופסיס .

הפוך את הצמח מעל הצלחת, טובל את העלים בתלוי.

הנח את המערכת בתא ואקום והפעיל פולס ואקום

הוואקום המופעל מסיר אוויר מרקמת העלה דרך פתחים טבעיים.

שחרור הוואקום מחזיר את הלחץ האטמוספרי, ודוחף חיידקים להיכנס לעלים.

חזור על הפולסים כדי להשיג חדירה מקסימלית.

הסר את הסיר. ואז למרוח את החיסון העודף.

עלי האראבידופסיס הנגועים בחיידקים מוכנים לניתוח במורד הזרם.

הוציא את מלאי הגליצרול של זן Pseudomonas syringae המעניין מ-80 מעלות צלזיוס מינוס לפלטה LB בתוספת אנטיביוטיקה מתאימה. דגרו את הצלחת בטמפרטורה של 28 מעלות צלזיוס למשך 40 עד 48 שעות. גרדו את הביומסה החיידקית והחזירו אותה לחמישה מיליליטר של מגנזיום כלוריד של 10 מילימולר.

מדוד את הצפיפות האופטית ב-600 ננומטר ומכוון אותה ל-0.1 על ידי הוספת כלוריד מגנזיום של 10 מילימולר. בצע דילול סדרתי בכלוריד מגנזיום של 10 מילימולר כדי לקבל ריכוז סופי של 5 פעמים 10 ל-5 CFU למיליליטר. לאחר מכן, הכינו 200 מיליליטר של אינוקו