הדמיה בקצב גבוה של זיהום תוך-תאי ברוסלה אבורדוס בתאי אפיתל של המארח

התחל בתאי אפיתל שבהם הביטוי של חלבון מתאם האינטרפרון, המתווך המרכזי של חיסון מולד, הופחת, מה שהופך את התאים לפגיעים יותר לזיהום ברוסלה .

החליפו את המדיום במדיום זיהום המכיל חלבון פלואורסצנטי ירוק מבטא Brucella abortus, פתוגן תוך-תאי פיקולטיבי, בריכוז הרצוי.

צנטריפוגה את הפלטה כדי לעודד מגע בין חיידקים לתאי המארח, ואז דגרו כדי לאפשר הפנמת חיידקים.

שטפו את התאים עם מדיום המכיל סרום, וטפלו בהם באנטיביוטיקה לחיסול חיידקים חוץ-תאיים.

הדגירה נוספת כדי לאפשר לברוצלה להתרבות תוך-תאית.

שטוף את התאים עם בופר וקבע אותם עם פרפורמלדהיד לשימור מבנים תוך-תאיים.

שטוף את עודף הקיבע. לאחר מכן, הוסיפו בופר עם תוספת חומר ניקוי כדי לחדור את התאים.

שטוף את שאריות חומר הכביסה, ואז מוסיפים DAPI כדי לצבוע את הגרעינים, ומבצעים שטיפה סופית.

באמצעות מיקרוסקופ אוטומטי, ניתן לרכוש תמונות בתפוקה גבוהה של זיהום ברוסלה בתאי האפיתל של המארח.

באמצעות שטיפת פלטות אוטומטית, החלף את מדיום הטרנספקציה ב-50 מיקרוליטר של מדיום זיהום. בתוך מכסה המנוע, העבר את הלוח לכלוב הצנטריפוגה וצנטריפוגה את לוח 384 בארות בטמפרטורה של 400 פעמים g ו-4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות.

לאחר מכן, השתמשו בפארפילם כדי לאטום את הפלטה ודגרו אותה על פלטת אלומיניום מחוממת מראש בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ו-5%_CO2 למשך ארבע שעות. לאחר הדגירה עם מכונת שטיפת הפלטות