זיהוי רגישות לאנטיביוטיקה חיידקית באמצעות מיקרוסקופ פיזור ראמן מגורה

התחל עם דגימות חיידקים שמטופלות מראש בריכוזים הולכים וגדלים של אנטיביוטיקה שמסירה חיידקים רגישים.

הוסיפו מדיום גדילה המכיל תחמוצת דויטריום ואותו ריכוז אנטיביוטי לצינורות המתאימים.

דגרו את הצינורות בתנאי רעידה.

תחמוצת דויטריום נכנסת לתאי חיידקים, שם דויטריום משולב בביומולקולות מסונתזות חדשות, ויוצר קשרי פחמן-דויטריום.

סובב את החיידקים, זרוק את הסופרנטנט, ושוטף.

הוסף קיבע לשימור המבנה החיידקי.

הוסף מים, צנטריפוגה, והסר את הסופרנטנט.

החזירו את החיידקים והעבירו את התלייה לזכוכית כיסוי מצופה פולי-אל-ליזין, ואז אוטמו אותה.

הניחו את הדגימה על שלב מיקרוסקופ פיזור ראמן (SRS) מוכן מראש ומכויל. הוסף מים והורד את המטרה.

לרכוש תמונות של שדות מרובים להערכת תדר הרטט בין פחמן-דויטריום.

בריכוזי אנטיביוטיקה גבוהים יותר, אות הפחמן-דויטריום פוחת, מה שמעיד על ירידה בחיוניות חיידקים.

דבר זה מאפשר הערכה מהירה של רגישות האנטיביוטיקה על ידי קישור עוצמת אות ה-SRS עם חיוניות חיידקים.

לאחר שעה של דגירה, הוסיפו 700 מיקרוליטר אנטיביוטיקה מדוללת סדרתית עם מדיום MHB המכיל 100% דויטריום ל-300 מיקרוליטרים של חיידקים אנטיביוטיים מטופלים באותו ריכוז אנטיביוטיקה. הומוגניזציה של התערובת על ידי פיפטינג למעלה ולמטה מספר פעמים. הוסף 700 מיקרוליטר של מדיום MHB ללא אנטיביוטיקה, 100% דויטריום, ל-300 מיקרוליטר של חיידקים ללא אנטיביוטיקה