אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 5:12 דק׳ • March 31st, 2026
התחל עם חתיכות קטנות של רקמת עלה מקוררת שבהן הפלומה נגועה בפתוגן חיידקי.
הניחו את החלקים במכתש עם חנקן נוזלי כדי לעכב את פעילות הנוקלאז המתפרק DNA.
לטחון כדי לשבש מכנית את התאים ולשחרר רכיבים תוך-תאיים.
השתמשו במרית מקוררת להעברת האבקה, הוסיפו בופר ליזיס, ומערבלים את המתלוי.
דוגר כדי לפרק גרעיני צמחים ותאי חיידקים, משחרר DNA ו-RNA תוך כדי דנטציה של חלבונים.
הוסף RNase ודוגר כדי לפרק את ה-RNA.
הוסיפו בופר לשקיעת חלבונים כדי לאגד חלבונים, ואז צנטריפוגה להפרדתם.
העבירו את ה-DNA העל-טבעי המכיל DNA צמחי וחיידקי לאיזופרופנול כדי להשקיע את ה-DNA כחוטים דמויי חוט.
צנטריפוגה לאיסוף DNA ולהשליכת הסופרנטנט.
שטוף באתנול, ואז בצנטריפוגה, והשליך את הסופרנטנט.
ייבשו באוויר את ה-DNA, ואז הוסיפו בופר להידרציה ודגרו כדי להמיס אותו.
דגימות ה-DNA מוכנות כעת לגילוי פתוגנים מבוססי PCR בהמשך.
השתמשו במספריים נקיים כדי לחתוך עלה טרי שלם מעץ הדר, והניחו בשקית סנדוויץ' פלסטיק נקייה. לאחר מכן, קרר את המלט והעלי על ידי הוספת כמות קטנה של חנקן נוזלי. לאחר מכן, השתמש במספריים כדי לחתוך חתיכות קטנות של רקמת העלה, בגודל של כ-1 אינץ' רבוע.
הנח את חתיכות העלים במלט כדי להקפיא אותן מיד. התחל לטחון במהירות את רקמת העלה עם המלט עד שהחנקן הנוזלי מתאדה, ונשארת אבקה ירוקה דקה. לאחר מכן, קרר מרית מתכת בחנקן נוזלי למשך 10 עד 15 שניות.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים