באוטם שריר הלב אצל חולדות

המודל של עכברוש אקוטי אוטם שריר הלב (AMI) כדאי ללמוד תוצאה של MI על תפקוד pathophysiological ופיזיולוגיות לב.

המטרה הכוללת של הליך זה היא לדגמן אוטם שריר הלב החריף בחולדות לחקר מנגנוני האיתות הלבביים הקשורים לתגובה המיידית של שריר הלב לאיסכמיה לבבית, ואחריה פגיעה בעירוי חוזר. תגובות אלה כוללות גודל אוטם, אזור בסיכון ומוות תאי. השלב הראשון הוא חשיפת החדר השמאלי על ידי ביצוע חתך קטן בחלל הבין-צלעי הרביעי של הצד השמאלי של החזה ופיזור הצלעות לאחר בידודן.

העורק היורד הקדמי השמאלי או LAD נקשר באופן זמני למשך 30 דקות לאחר התקופה האיסכמית. קשירת ה-LAD משתחררת ומאפשרת רפרפוזיה של הלב לאחר תקופת רפרפוזיה של ארבע שעות. ה-LAD נקשר פעם נוספת לפני כריתת הלב ונבדק לגודל אזור שריר הלב האוטם בסיכון ואינו בסיכון.

בסופו של דבר, נובע מההערכה ההיסטולוגית של האוטם. ניתן להשתמש בשריר הלב כדי לחקור אסטרטגיות טיפוליות לטיפול באי ספיקת לב. טכניקה זו יכולה לספק תובנה לגבי מנגנוני האיתות הקשורים לתגובות המיידיות לאיסכמיה, ואחריהם פציעות מיומנות כגון גודל האוטם, אזור בסיכון ומוות תאים.

ניתן להשתמש במודל זה כדי להעריך אסטרטגיות טיפוליות חדשות לטיפול במחלת לב איסכמית. מדגימים את ההליך עמית מחקר בכיר ו-X, עמית פוסט-דוקטורט בכיר ממעבדתו של ד"ר בראדלי מקונל במחלקה למדעי הפרמקולוגיה והפרמצבטיקה באוניברסיטת יוסטון, חבר מוסדי במרכז הרפואי של טקסס. לפני שניתן להתחיל בהליך הכירורגי, יש לחטא את משטח הניתוח באתנול 70%.

עקר את כל המכשירים הכירורגיים עם מעקר חרוזים חם לפני כל ניתוח בודד. המכשירים הנדרשים כוללים שני מספריים כירורגיים, מלקחיים אחד, מלקחיים מעוקלים אחד, שני מחזיקי מחטים ומחזיר חזה. התאם את הטמפרטורה של מערכת השמיכות ההומאו כך שתשמור על טמפרטורת הגוף של החיה על 37 פלוס מינוס מעלה אחת צלזיוס.

גודל האוטם תלוי במשך החסימה כמו גם בטמפרטורת הגוף. יש גזה כותנה ואפליקטורים זמינים לניהול דימום. רק בעלי חיים שעוברים בדיקה גופנית על ידי בדיקה חזותית, מדידת דופק, קצב נשימה, טמפרטורת גוף ומשקל גוף משמשים במחקרים אלה.

רשום את המשקל והמאפיינים המזהים של בעלי חיים בריאים שיעברו ניתוח יום לפני הניתוח. יש לתת מנה של מסכות בופרנורפין. יש ללבוש חלוקים וכפפות לאורך כל ההליך, ויש להחליף כפפות בין ניתוחים בודדים.

כדי להתחיל להרדים חולדה ולהכין את אתר הניתוח על ידי גילוח יסודי של הפרווה מאזורי הצוואר והחזה. יש לחטא את האזורים המגולחים בתמיסת בטדין, ואחריה 70% אתנול. חזור על הליך זה שלוש פעמים.

הנח את החיה על מערכת שמיכות נושא הומאו לשמירה נאותה על טמפרטורת הגוף. שוכב על צדו הימני. שיפוע הקצוות של צינור פוליאתילן מקל על ההחדרה לגרון.

הכנס את הצינור האנדוטרכיאלי בעזרת מיקרוסקופ סטריאו כירורגי. מניפולציה עדינה של הלשון לפי הצורך ושמירה על קנה הנשימה. חבר את הצינור האנדוטרכיאלי למכונת הנשמה במהירות של 80 נשימות לדקה ונפח גאות של 1.2 מיליליטר לכל 100 גרם משקל גוף.

לאחר השגת אוורור מכני, הניחו וילון סטרילי על החולדה והשאירו רק את אזור הניתוח חשוף. לאחר שנוצרת נשימה יציבה, פתח את החזה בחלל הבין-צלעי הרביעי השמאלי. צמצם את מידת החיתוך ברקמה כדי להפחית את הסיכון לדימום.

מקם מפסק חזה בתוך החלל הבין-צלעי הרביעי ופרש את הצלעות כדי לחשוף את החדר השמאלי או יש לנקוט בזהירות LV כדי לא לפגוע בריאה. לאחר מכן, פתח את קרום הלב והשאיר אותו במקומו. במידת האפשר, זהה את העורק היורד הקדמי השמאלי הפרוקסימלי או LAD באמצעות מיקרוסקופ סטריאו כירורגי.

באופן חולף, קשרו או קשרו עם קשר החלקה את ה-LAD כדי לגרום לאיסכמיה. נזהר לא להוציא את הלב כראוי. קשירת LAD מאושרת על ידי התבוננות בהלבנה של רקמת שריר הלב הדיסטלית לתפר, כמו גם תפקוד לקוי של הדופן הקדמית במהלך התקופה האיסכמית.

לאחר תקופה איסכמית של 30 דקות, התחל בעירוי לב על ידי חיתוך או שחרור הקשירה סביב ה-LAD בעזרת מספריים מיקרו-כירורגיים. רפרפוזיה מאומתת על ידי החזרת צבע אדום לרקמת שריר הלב והדגמה של התאוששות מסוימת של תנועת הדופן הקדמית שנצפתה מיד לאחר שחרור קשירת ה-LAD. ההליך זהה עבור חולדות הדברת דמה, אלא שה-LAD אינו קשור באופן חולף.

הסר את מפסק החזה וצייר את הצלעות יחד עם דפוס תפר מופרע. לאחר סגירת הצלעות, צור לחץ שלילי בחזה כדי להבטיח נשימה נכונה על ידי שאיבת אוויר מחלל החזה. לבסוף, סגור את העור עם דפוס תפר רציף לאחר הניתוח, הכניסו את החולדה לכלוב עם כרית חימום ועקבו אחר טמפרטורת הגוף על ידי מדחום רקטלי, קצב נשימה על ידי בדיקה חזותית, דופק על ידי דפיקות לב וסימני כאב חריגים עד שהחיה הופכת לאמבולטורית.

יש לתת מי מלח סטריליים. אם נצפים סימני התייבשות, יש לתת בופרנורפין מיד לאחר הניתוח. לאחר תקופת רפרפוזיה של ארבע שעות, הנח את החולדה המורדמת בחזרה לאזור הניתוח.

דמיין את החדר השמאלי כפי שהודגם קודם לכן וקשר את ה-LADA בפעם השנייה או שניתן יהיה לקשור מחדש את הקשר. הזריק מיליליטר אחד של 5% אוונס כחול ומי מלח לחדר הימני ואפשר לחלחל למשך שתי דקות. לאחר תקופה זו, הזרקו מיליליטר אחד של תמיסת אשלגן כלורי רווי לחדר הימני כדי לעצור את פעימות הלב במהירות, כרתו את הלב והטמיעו אותו בתמיסת מלח מחוממת 2% אגרו פוספט.

לאחר שהאגרו מתמצק בטמפרטורת החדר, חותכים את הלב לחלקים של מילימטר עד שניים. צבעו את שריר הלב הבר-קיימא עם 2% trien tetra oleum chloride או TTC למשך 20 דקות וצלמו תמונה של כל פרוסה שנראה. הנה תמונה מייצגת של לב העכברוש.

לאחר ארבע שעות של עירוי מחדש, האזור בכחול מייצג את האזור הלא חסום או שאינו בסיכון. האזורים האדומים מציינים את האזור בסיכון לאוטם ואזורים צהובים לבנים מציינים אוטם שריר הלב בתוך אזור הסיכון. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לבצע אוטם שריר הלב החריף בחולדות ובמודל בעלי חיים המשמש לחיקוי מחלת לב איסכמית אנושית.

ניתן להשתמש במודל זה כדי לחקור את התגובות המיידיות לאיסכמיה, ואחריה פגיעה ברפרפוזיה שנמצאת בתוך השעות הראשונות, כגון גודל האוטם, סיכון האזור ומוות תאי. כפי שאתה צופה בסרטון זה, בהצלחה בניסויים שלך.