Name: ציור דם מן החולדות דרך וריד Saphenous ועל ידי נקר לב (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-08-23T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 27 s
Description: למד שתי טכניקות לקיחת דם מחולדות: דרך הווריד הספנוס והנקר הלב. שיטות אלו מסייעות למחקרים פרמקוקינטיים עם מינימום סבל לבעלי החיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ציור דם מן החולדות דרך וריד Saphenous ועל ידי נקר לב הערה: כל הנהלים חייב להיות מאושר על ידי טיפול בבעלי חיים במכון שלך, ועדה להשתמש. 1. שואבים דם בווריד saphenous <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הליך זה מבוצע ללא הרדמה דורש שני אנשים, מי מטפל חולדה, ומי מבצע את תיקו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך חרוט מתוך מגבת או להחזיק את העכברוש עם כפפות מכרסם טיפול, עוזב אחד הגפיים האחוריות חשוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את החלק האחורי של הרגל עם גוזם חשמלי עד הווריד saphenous גלוי. שבי שטח מספיק גדול, כך השיער לא יבוא במגע עם האתר לנקב. השתמש כמות קטנה של קרם שאינו ריחני יד כדי לשמור על השיער הלא מגולח מהמקום לנקב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקפידו דחיסה בבסיס של הרגל על ​​מנת להפוך את וריד saphenous בליטה החוצה (בדומה באמצעות חוסם עורקים כאשר זוב דם מבן אדם או חיה גדולה). את הווריד לנקב באמצעות מחט 20 גרם ו סקופ הדם כפי שהוא יוצא באמצעות microvette. שאיבה עם הרגל תסייע להקיז דם ועוד. לאחר שאספת מספיק דם, להחזיק לדחוס נקי באתר לנקב כדי לעצור את הדימום. </li></ol> 2. דם לצייר על ידי לנקב לב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הליך זה מחייב הרדמה היא סופנית. בעלי חיים צריכים להיות מורדמים מיד בסוף לנקב לב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן מזרק 5 מ&quot;ל עם מחט 23G1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עמוק anesthesize את העכברוש ולבדוק הרדמה על ידי חוסר תנועה ספונטנית, קצב נשימה איטי, חוסר תגובה לגירויים (כגון צובט אצבע). כדי להבטיח הרדמה ממושכת, במקום לחבית מזרק המכיל מגבת נייר ספוגה הרדמה נדיף על אפו של עכברוש במהלך ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את חולדה על גבו, מול ממך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם אתם ימניים, מקום לאצבע שמאל ברמה של הצלעות הנמוך ביותר, ללא החלת כל לחץ. הלב יהיה ממוקם ~ 1 ס&quot;מ מעל לנקודה זו, מעט ימינה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזקת המזרק שלך בזווית של 45 מעלות, להכניס את המחט בין שתי הצלעות לצפות טיפת דם להיכנס המחט. זו אינדיקציה לכך שאתה בלב. מבלי להזיז מזרק שלך, יש למשוך את הבוכנה כדי למלא את המזרק. לאחר מזרק מלא, בזהירות נתק אותו המחט ולרוקן אותו לתוך צינור. מזרק אז יכול להיות מחדש מחוברת המחט לציור יותר דם. זה צריך להיות אפשרי לצייר 50-10 מ&quot;ל של דם חולדה 120-180 גרם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיד להרדים את העכברוש. </li></ol>

<ol><li>Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C. J. W. M., Boere, H. A. G., Hesp, A. P. M., Van Lith, H. A., Schurink, M., Beynen, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sampling+from+the+retro-orbital+plexus%2C+the+saphenous+vein+and+the+tail+vein+in+rats%3A+comparative+effects+on+selected+behavioural+and+blood+variables%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables.</a> Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).</li>
<li>Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R. F., Reinhardt, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collecting+blood+from+rodents%3A+a+discussion+by+the+laboratory+animal+refinement+and+enrichment+forum%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Technology+and+Welfare%22%5BJournal%5D)">Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum.</a> Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).</li>
<li>Angelow, O., Schroer, R. A., Heft, S., James, V. C., Noble, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+two+methods+of+bleeding+rats%3A+the+venous+plexus+of+the+eye+versus+the+vena+sublingualis%5BTitle%5D)+AND+%22Jounal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis.</a> Jounal of Applied Toxicology. 4, 258-260 (2006).</li>
<li>Beeton, C., Wulff, H., Barbaria, J., Clot-Faybesse, O., Pennington, M., Bernard, D., Cahalan, M. D., Chandy, K. G., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+blockade+of+T+lymphocyte+K%2B+channels+ameliorates+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%2C+a+model+for+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad%22%5BJournal%5D)">Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis.</a> Proc. Natl. Acad. , 13942-13947 (2001).</li>
<li>Beeton, C., Pennington, M. W., Wulff, H., Singh, S., Nugent, D., Crossley, G., Khaytin, I., Chen, C. Y., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+effector+memory+T+cells+with+a+selective+peptide+inhibitor+of+Kv1.3+channels+for+therapy+of+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases.</a> Mol. Pharmacol. , 1369-1381 (2005).</li>
<li>Beeton, C., Wulff, H., Standifer, N. E., Azam, P., Mullen, K. M., Pennington, M. W., Kolski-Andreaco, A., Wei, E., Grino, A., Counts, D. R., Wang, P. H., LeeHealey, C. J., Andrews, B. S., Sankaranarayanan, A., Homerick, D., Roeck, W. W., Tehranzadeh, J., Stanhope, K. L., Zimin, P., Havel, P. J., Griffey, S., Knaus, H. G., Nepom, G. T., Gutman, G. A., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kv1.3+channels+are+a+therapeutic+target+for+T+cell+mediated+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. , 17414-17419 (2006).</li>
<li>Beeton, C., Barbaria, J., Devaux, J., Benoliel, A. -M., Gola, M., Sabatier, J. -M., Bernard, D., Crest, M., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+blocking+of+voltage-gated+K%2B+channels+treats+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+and+inhibits+T-cell+activation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation.</a> J. Immunol. , 936-944 (2001).</li>
<li>Devaux, J., Forni, C., Beeton, C., Barbaria, J., Beraud, E., Gola, M., Crest, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myelin+basic+protein-reactive+T+cells+induce+conduction+failure+in+vivo+but+not+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro.</a> Neuroreport. , 317-320 (2003).</li>
<li>Beeton, C., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+and+monitoring+of+adoptive+delayed+type+hypersensitivity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. 8, (2007).</li>
</ol>

ציור דם מהעורק saphenous הוא דרך נוחה לקבל כמויות קטנות של דם ללא הרדמה. אם הדגימה חזר נדרש, לבדוק את התקנות כדי לוודא שאתה לא למשוך יותר מדי דם מן עכברוש אחד. ציור דם על ידי לנקב לב הוא דרך נוחה לקבל כמויות גדולות של דם, אבל זה הליך סופנית. בעל חיים חייב להיות מורדמים בסוף לצייר את הדם. טכניקות אלו (כמו כל טכניקות בבעלי חיים) צריך להיעשות הראשון בנוכחות וטרינר או טכנאי וטרינרי אשר יוכלו להעריך כי החיות מטו...

<table><tbody><tr><td>מחט 20G 1/2</td><td>כלי</td><td>BD Biosciences</td><td>305176</td><td>לניקור הווריד הספנוס</td></tr><tr><td>Microvette 300</td><td>כלי</td><td>Sarstedt Ltd</td><td>20.1308.100</td><td>לאיסוף דם מהווריד הספנוס</td></tr><tr><td>קוצץ חשמלי</td><td>כלי</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>CLP-32130</td><td></td></tr><tr><td>מחט 23 G 1</td><td>כלי</td><td>BD Biosciences</td><td>305145</td><td>לניקור הלב</td></tr><tr><td>מזרק פלסטיק 5 ml, קצה חלק (slip tip)</td><td>כלי</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-826-12</td><td>לניקור הלב</td></tr></tbody></table>

ציור דם מן החולדות דרך וריד saphenous ועל ידי נקר לב

Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture

ציור דם מכרסמים הוא הכרחי עבור מספר גדול של הן במבחנה במחקרים vivo. אתרים של דם שואבת הן רבות במכרסמים: לב רטרו מסלולית סינוס, וריד, וריד לסתי, וריד saphenous,. טכניקה לכל היתרונות והחסרונות שלה, וחלק אינם מאושרים יותר במדינות מסוימות (למשל, רטרו מסלולית שואבת בהולנד). דיון בטכניקות שונות של ציור דם הם 1-3 זמין. כאן, אנו מציגים שתי טכניקות ציור דם חולדות, כל אחד עם יישומים ספציפיים שלה. להקיז דם מהעורק saphenous, בתנאי שזה נעשה כראוי, גורמת מצוקה מינימלית בבעלי חיים ואינו דורש הרדמה. טכניקה זו מאפשרת חזר שואבת של כמויות קטנות של דם, כגון הצורך ללימודי פרמוקוקינטיים 4,5, בקביעת כימיה פלזמה, או ספירת דם 6. לנקב לב מאפשר איסוף כמויות גדולות של דם מבעל חיים אחד (עד 10 מ&quot;ל של דם ניתן להסיק חולדה ז 150). טכניקה זו שימושית מאוד ולכן כהליך סופני כאשר ציור דם saphenous לא יספק מדגם מספיק גדול. אנו משתמשים לנקב לב כאשר אנחנו צריכים כמות מספקת של בסרום של זן מסוים של חולדות לגדול קווי לימפוציטים T במבחנה 4-9.

שואב דם יש צורך במספר רב של מחקרים, למשל ללמוד את פרופיל פרמקוקינטיקה של תרכובת. כאן, אנו מדגימים כיצד להקיז דם מן החולדות באמצעות שתי טכניקות: להקיז דם מהעורק saphenous או לנקב לב.

ציור דם מן החולדות דרך וריד Saphenous ועל ידי נקר לב

שאיבת דם ממכרסמים נחוצה למספר רב של מחקרים, הן במודלים של in vitro והן במודלים של in vivo. קיימים אתרי דגימה רבים למשיכת דם ממכרסמים: ...

שלום, אני כריסטין ביטון. אני חוקרת סייעת במעבדתו של ג'ורג' צ'ן במחלקה לפיזיולוגיה וביופיזיקה באוניברסיטת קליפורניה באירוואין. ובסרטון שאתם עומדים לצפות בו, אעבוד עם סיועה של אדריאנה גרסיה, סטודנטית לדוקטורט במעבדה.אראה לכם שתי טכניקות לשאיבת דם מחולדות. הטכניקה הראשונה שנגלה לכם היא כיצד לשאוב דם מהוריד הספנוס (saphenous vein). זוהי טכניקה שימושית מאוד אם ברצונכם לשאוב כמויות קטנות של דם מחולדה ללא הרדמה.לדוגמה, אם אתם עורכים מחקר פרמקוקינטי, הדורש כמויות קטנות של דם הנלקחות במרווחי זמן קבועים. הטכניקה השנייה שנראה לכם היא דגימת דם באמצעות פנצ'ירה לבבית. זוהי טכניקה טרמינלית, ולכן יש להקריב את החולדה בסיום דגימת הדם.אך היתרון של טכניקה זו הוא שהיא יכולה לספק כמויות גדולות בהרבה של דם, מספר מיליליטרים. לאחר שפיספסנו את האזור, אנו מורחים תמרת עור רגילה בעיקר כדי למנוע השתחררות של פרוות שעלולות להיכנס לשפופרת וכן לגרום לקרישתו של הדם. לאחר מכן, אפעיל לחץ עם האגודל כדי שהוריד יבלוט מעט, ואז אדריאנה תנקב את הוריד. לעיתים הוריד מחליק הצידה ולכן לא מצליחים לפגוע בו, ובמקרה כזה נבצע דקירה חוזרת.כעת, לאחר שנקבנו את הווריד, טיפות דם יוצאות במרווחי זמן קבועים, לכן אנו אוספים אותן באמצעות מיקרו-צינורית, וחוזרים על הפעולה עד שנקבל מספיק דם עבור הבדיקה שלנו או עד שלא יצא דם נוסף. בהתאם לחולדה וא

drawing-blood-from-rats-through-saphenous-vein-cardiac

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

צנתור כרונית של כלי הדם עכברוש נדרשת לעתים קרובות מתן חומרים, יש לקבל דגימת דם על פני תקופה של זמן או ישירה מדידות לחץ דם בהכרה. צנתור עורקי הירך של מדידות חולדה המקביל לחץ דם החיה מודע יהיה הפגינו.

צנתור עורקי ורידי הירך עבור דגימה דם, והתרופות ולחץ דם מודעת דרג מדידות הלב

דגימות דם שימושיות להערכת סמנים ביולוגיים של מצבים פיזיולוגיים או מחלה in vivo. כאן אנו מתארים את המתודולוגיה לדגימת דם מווריד הזנב הצדדי בחולדה. שיטה זו מספקת דגימות מהירות עם מינימום כאב ופולשניות.

דגימת דם מוריד הזנב לרוחב של העכברוש

כאן, אנו מתארים שיטה פשוטה הזנב וריד דם הדגימה בחולדות שאינם מרדימים באמצעות מערכת צינור שאיבת ואקום. שיטה זו מפחיתה את הסיכון בחשיפה ישירה דם ומפשטת לקיחת דגימות מרובים venipuncture יחיד.

חזר על איסוף דם של וריד הזנב של חולדות שאינם מרדימים עם מערכת איסוף דם ואקום

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לאסוף דגימות דם מן הווריד בריחי של חולדה.

בריחי וריד לנקב כאמצעי חלופי של איסוף דגימת דם בחולדות

טכניקות מיקרוכירורגיות מפורטות מודגמות כדי להקים מודל עכברוש קנביטציה וריד הצוואר לטווח ארוך יותר עבור איסוף דם רציף באותה חיה. פרמטרים פיזיולוגיים והמטולוגיים היו במעקב במהלך שלב ההתאוששות של החולדה. מודל זה יושם כדי ללמוד פרמקוקינטיקה של פוליפנול דרך הפה מבלי לגרום ללחץ בעלי חיים.

מיומנויות מיקרוכירורגיות של הקמת קנדול וריד הצוואר קבוע בחולדות עבור דגימת דם סדרתית של תרופה מנוהלת דרך הפה

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה פשוטה ויעילה לאיסוף בזמן אמת ודינמי של דם לב חולדה באמצעות טכניקת המיקרודיאליזה.

שאיבת דם דינמית רציפה מלב חולדה באמצעות טכניקת מיקרודיאליזה לא פולשנית

כאן, אנו מציגים פרוטוקול המציע חלופות איסוף דם מהירות, קלות ואמינות עבור מודל החולדות. אנו מתארים שלוש שיטות שונות לדגימת דם בהתאם להקשר: ניקוב וריד הזנב בהרדמה או בעל חיים בהכרה, וניקור ורידים בפין הגבי בהרדמה.

וריד זנב שונה וניקוב ורידים פין לדגימת דם במודל החולדה

כאן אנו מציגים שילוב של הגבלת חולדות יעילה ושיטות ניקור ורידים תת-קרקעיות המאפשרות איסוף דם מהיר, בטוח וחוזר בחולדות ללא הרדמה.

דגימת דם של ורידים תת-קלאביים בחולדות מודעות

ניקור לב תת-בריחי הוא שיטה פשוטה ואמינה לאיסוף דם סופי בעכברים. הוא קל לתפעול ומבטיח דגימות בעלות טוהר גבוה.

איסוף דם לבבי באמצעות ניקוב תת-בריחי בעכברים

תאים הרוצח טבעי הם אוכלוסייה קטנה של לימפוציטים. כאן אנו מראים כיצד לבודד תאים אלה מהדם האנושי על ידי סלקציה שלילית, באמצעות ערכת מן StemCell טכנולוגיות. התאים המתקבלים הם קיימא ללא פגע על ידי נוגדנים, ולכן מוכן לשמש במשך מספר הליכים.

והעשרה של תאים NK מ דם אדם עם קיט RosetteSep מ StemCell טכנולוגיות

למד שתי טכניקות לקיחת דם מחולדות: דרך הווריד הספנוס והנקר הלב. שיטות אלו מסייעות למחקרים פרמקוקינטיים עם מינימום סבל לבעלי החיים.

ציור דם מן החולדות דרך וריד Saphenous ועל ידי נקר לב

גלה סרטונים נוספים