Name: עכבר דגם השלם הקיפאון של פקקת נחותים הווריד הנבוב (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-06-15T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 34 s
Description: למדו את מודל עכבר הקיפאון המלא של פקקת נחותים הווריד הנבוב לחקר תהליכי היווצרות פקקת ופתרונה. שיטה זו מאפשרת ניתוח כמותי של רקמת דופן הווריד והפקקת לאורך זמן.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. עכבר פרוצדורות הרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעלי חיים יוסרו מן הכלוב שלהם והניחו בתא טרום ניתוחית בהרדמה אינדוקציה לזירוז גז 5% isoflurane ו 100% חמצן, בקצב זרימה של 0.5 ליטר לדקה (מאדה מבוקר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים הם מסומם בחדר אינדוקציה הרדמה, להסיר קאמרית הבטן הגחון הוא מגולח עם קוצץ חשמלי, או לשמור בתוך החדר אם מקריח שיער משמש (1min). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אמנם עדיין תחת סדציה, הם שקלו, העיניים משומנים עם משחה עיניים סטריליות ואז להציב recumbancy הגב על מים חמים במחזור מכשיר החימום תחת הרדמה כללית, עם חרוט האף, באמצעות isoflurane וחמצן. בשלב זה בשיעור מופחת חמצן 0.2 ליטר לדקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבטן הוא ריסס עם פתרון chlorhexidine (diacetate chlorhexidine הוא bacterialcidal במהירות קבועה) וקינח עם גזה סטרילית שלוש פעמים או עד אתר כירורגי נקי. </li></ol> 2. עכבר מיקרו כירורגי ונהלים Recovery <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חתך קו האמצע הגחוני (2 ס&quot;מ) הוא עשה עם איריס מספריים דרך העור ואת דופן הבטן לחשוף את הבטן. גזה סטרילי מלוחים 2x2in ספוג משמש כדי לשקף את המעיים אל הצד השמאלי של החיה. עוצר העכבר לשים להדמיה מקום המאפשר של נחות הווריד הנבוב (IVC). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב זה, רמת התחזוקה של isoflurance 2% בשיעור 100% חמצן של 0.2 ליטר / דקה משמש לשארית ההליך הכירורגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דיסקציה בלאנט הוא הקל באמצעות ספוגית המוליך סטרילית עדינה במיוחד איריס מעוקל half מלקחיים רקמות. יש להקפיד בטיפול ברקמות העכבר כי הם שבירים מאוד. עם כניסתו חלל הבטן, להשתמש גזה סטרילי מלוחים 4x4in ספוג לשקף exteriorize את המעיים על וילון סטרילי, ובכך מאפשר הדמיה של IVC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל הסניפים בחזרה IVC, מן הוורידים כליות אל הסתעפות הכסל, הם צרוב בעוד סניפים לוואי ligated עם 7-0 לא מגיב התפרים prolene. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> IVC היא להפריד בין אבי העורקים, נחות רק כדי הוורידים כליות. 7-0 prolene משמש ולקשור IVC. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האתר laparotomy סגור באופן דו שכבה. המעבדה שלנו משתמשת 5-0 vicryl, תפר סינתטיים, דפוס מתמשך כדי לסגור את דופן הבטן. דבק דבק העור משמש כדי לסגור את העור. אין תפרים חיצוניים להסרה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכברים הם התאוששו אז בכלוב עכבר בודדות, ציין שלאחר הניתוח (45 דקות עד 2 שעות) תחת מנורת חימום (מרחק מינימלי-24 סנטימטרים ספורים כלוב), ואז חזר יחידות דיור המקורי שלהם. משככי כאבים ואנטי דלקתיים יכולים לשמש אם זה לא מפריע מטרת המחקר. ההצדקה המדעית לעכב בתרופות לשיכוך כאבים, וטרינרי, ואישור ICUCA נדרשים. המעבדה שלנו מצא כי עצירות, 0.05-0.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג SQ הוא משכך כאבים לפני ואחרי הניתוח מצוין עכברים. בנוסף, לידוקאין ב 4mg/kg (0.4 מ&quot;ל / ק&quot;ג של פתרון 1%) יכול להיות חדורים באתר חתך כאשר משככי כאבים מערכתית עשויה לבלבל תוצאות הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חיות שאם מכל קבוצת הניסוי לעבור את הניתוח לעיל המשמש לגישה ניתוחית, מלבד IVC או כל סניפי ניקוז אינם ligated או צרוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המתת החסד מתבצעת בהתאם להמלצות שנקבעו על ידי הנחיות האיגוד האמריקאי לרפואה וטרינרית על המתת חסד של מכרסמים. </li></ol>

<ol><li>Naess, I. A., Christiansen, S. C., Romundstad, P., Cannegieter, S. C., Rosendaal, F. R., Hammerstrom, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+and+mortality+of+venous+thrombosis%3A+a+population-based+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Incidence and mortality of venous thrombosis: a population-based study.</a> J Thromb Haemost. 5, 692-699 (2007).</li>
<li>White, R. H., Keenan, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+race+and+ethnicity+on+the+incidence+of+venous+thromboembolism%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of race and ethnicity on the incidence of venous thromboembolism.</a> Thromb Res. 123, Suppl 4. S11-S17 (2009).</li>
<li>Heit, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+venous+thromboembolism+in+the+community%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of venous thromboembolism in the community.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28, 370-372 (2008).</li>
<li>Henke, P. K., Varga, A., De, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+vein+thrombosis+resolution+is+modulated+by+monocyte+CXCR2-mediated+activity+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Deep vein thrombosis resolution is modulated by monocyte CXCR2-mediated activity in a mouse model.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 24, 1130-1137 (2004).</li>
<li>McDonald, A. P., Meier, T. R., Hawley, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+is+associated+with+impaired+thrombus+resolution+in+a+mouse+model+of+stasis+induced+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Aging is associated with impaired thrombus resolution in a mouse model of stasis induced thrombosis.</a> Thromb Res. 125, 72-78 (2010).</li>
<li>Myers, D., Farris, D., Hawley, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selectins+influence+thrombosis+in+a+mouse+model+of+experimental+deep+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Selectins influence thrombosis in a mouse model of experimental deep venous thrombosis.</a> J Surg Res. 108, 212-221 (2002).</li>
<li>Myers, D. D., Hawley, A. E., Farris, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((P-selectin+and+leukocyte+microparticles+are+associated+with+venous+thrombogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">P-selectin and leukocyte microparticles are associated with venous thrombogenesis.</a> J Vasc Surg. 38, 1075-1089 (2003).</li>
<li>Myers, D. D. J. r, Rectenwald, J. E., Bedard, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+venous+thrombosis+with+an+oral+inhibitor+of+P+selectin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Decreased venous thrombosis with an oral inhibitor of P selectin.</a> J Vasc Surg. 42, 329-336 (2005).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

המודל השלם עכבר הקיפאון של פקקת נחותים הווריד הנבוב ניתן לבצע מספר רב של זנים של עכברים בגילים שונים. המודל המתאים ביותר לעכברים של לפחות 20 גרם במשקל. זה מודל חיה של פקקת ורידים מאפשר לחוקרים ללמוד אינטראקציות בין דלקת הווריד הקיר ואת פקיק ורידי occlusive. מניסיוננו, מצאנו כי 10 או יותר בעלי חיים לכל קבוצה יש צורך לקבל מובהקות סטטיסטית בין הקבוצות עבור משקולות פקיק, קיר וריד ספירת תאים דלקתיים, קיר חלבון וריד, וריד קיר ביטוי גנים, והניתוח כולו דם או פלסמה לפעילות מבחני.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> ספקי ציוד </td></tr><tr><td> Isoflurane גז </td></tr><tr><td> Prolene 7-0 תפר </td></tr><tr><td> Vicryl 5-0 תפר </td></tr><tr><td> עור דבק </td></tr><tr><td> עין סיכה </td></tr><tr><td> Nolvasan פתרון או פתרון bacteriostatic </td></tr><tr><td> Stereomicroscope היקף </td></tr><tr><td> MediCapture </td></tr><tr><td> כותנה Applicators </td></tr><tr><td> 2x2 גזה </td></tr><tr><td> כרית חימום </td></tr><tr><td> מכונת הרדמה </td></tr><tr><td> כלי זכוכית חרוז מעקר </td></tr><tr><td> מכשירי ניתוח מיקרו </td></tr><tr><td> בטן Restrainers </td></tr></tbody></table>

עכבר דגם השלם הקיפאון של פקקת נחותים הווריד הנבוב

Mouse Complete Stasis Model of Inferior Vena Cava Thrombosis

תרומבואמבוליזם ורידי (VTE) כולל גם פקקת ורידים עמוקה (DVT) ו תסחיף ריאתי (PE). בארצות הברית (ארה&quot;ב), תחלואה ותמותה גבוהה ושיעורי לעשות VTE דאגה בריאותית רצינית 1-2. אחרי מחלות לב ושבץ, VTE הוא 3 third הנפוצים ביותר למחלות כלי הדם. בארה&quot;ב לבדה יש כ 900,000 אנשים מושפעים מדי שנה, עם 300,000 מקרי מוות מתרחשים מדי שנה 3. אמין במודל בבעלי חיים vivo ללמוד את המכניזם של מחלה זו הוא הכרחי. היתרונות של שימוש במודל עכבר קיפאון מוחלט של פקקת הווריד הנבוב נחותים הם מספר. המודל העכבר מאפשר ניהול של כמויות קטנות מאוד של סוכני הבדיקה המוגבלת זמינות, הקטנת עלויות באופן דרמטי. המבטיחים ביותר הוא פוטנציאל עכברים עם גן knockouts המאפשרים פונקציות מסוימות גורם דלקתי קרישה להיות התחום. מבחני מולקולרית נוכחי לאפשר quantitation החומה וריד, דם פקיק, שלם, פלזמה עבור מבחני. עם זאת, החשש העיקרי הכרוך מודל זה הוא אילוצי גודל הניתוח ואת פרירות הכלים. כמו כן, בשל המשקל IVC קטן מדגם (ממוצע 0.005 גרם) יש צורך להגדיל את מספר בעלי החיים לניתוח סטטיסטי מדויק של רקמות, פקיק, מבחני דם כגון תגובה בזמן אמת שרשרת פולימרז (RT-PCR), כתם המערבי, enzyme-linked immunosorbent (ELISA), zymography וריד קיר וניתוח הסלולר פקיק, ודם כל מבחני פלזמה 4-8. החיסרון העיקרי עם המודל קיפאון זה חוסר זרימת הדם מעכב את האפקט המקסימלי של סוכני טיפולית מערכתית מנוהל על פקיק ועל הקיר וריד.

המודל להשלים עכבר קיפאון של פקקת נחות הווריד הנבוב התשואות כמויות מדידים של רקמת עורק בקיר פקיק. זה הוכיח שימושי להערכת אינטראקציות בין הקיר וריד ואת פקיק occlusive והן להערכת התקדמות של דלקת כרונית חריפה.

תסביב תרומבואמבולי ורידי (VTE) כולל הן תרומבוזיס של ורידים עמוקים (DVT) והן תסביב ריאתי (PE). בארצות הברית (U.S.), התחלואה הגבוהה ו...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא לבצע ליגציה של ה-IVC כדי לגרום לעצירה מוחלטת של זרימת הדם שתוביל להיווצרות תרומבוס, במטרה לחקור תרומבוגנזה ורזולוציה. זאת מושג תחילה על ידי חשיפת ה-IVC באמצעות חתך ונטראלי בקו האמצע. לאחר מכן, מאתרים את כל ענפי הניקוז הגביים והצידיים, ואותם צורבים או קושרים באמצעות ליגציה.לאחר מכן, ה-IVC מופרד מהאורטה תחת הוורידים הרנליים ונקשר. לבסוף, ה-IVC וה thrombus נאספים בנקודות זמן שונות להערכה מולקולרית. בסופו של דבר, ניתן לקבל תוצאות המראות את מידת נטל ה-thrombus עד היום השישי.מודל העכבר של קשירת הווריד הנבוב התחתון (inferior vena cava ligation) פותח במעבדה שלנו כדי לחקור עכברים עם מחיקת גנים. הדגמה חזותית של מודל כירורגי זה היא קריטית, כיוון ששלבי הפרוצדורה קשים ללמידה בשל הטכניקות המיקרו-כירורגיות הנדרשות לביצוע פרוטוקול זה. לתחילתו, הרדימו את בעל החיים בתא השראה פרה-אופרטיבי בריכוז של 5% isof fluorine ו-100% oxygen בקצב של 0.5 liters per minute.הוצא את החיה מהתא, החזק אותה על גבה, וגלח את הבטן הצדדית (ventral abdomen) באמצעות מכונת תספורת חשמלית. לאחר מכן, שקול את החיה. לבסוף, שמן את העיניים בעזרת משחה עינית סטרילית.הנח את בעל החיים על גבו על משטח חימום במים חמימים תחת הרדמה כללית עם isof fluorine וחמצן. רסס את הבטן בתמיסת chlorhexidine ונגב בעזרת גזה סטרילית. חטא את הבטן עד שאתר הניתוח יהיה נקי כדי להתחיל בניתוח.באמצעות מספרי איריס, בצעו חיתוך בקו האמצע הגחוני דרך העור ודופן הבטן, וחשפו את בטן החיה באמצעות פדי גזה סטריליים ספוגים בתמיסת סליין. הסיטו את מעי החיה לצדה השמאלי. השתמשו במכשיר קיבוע לעכברים כדי לחשוף את הווריד החלול התחתון (IVC או CVA).משלב זה ועד לסיום הניתוח, שמרו על ההרדמה באמצעות 2% isof fluorine ו-100% oxygen בקצב של 0.2 liters per minute. בעזרת מקלון צמר סטרילי ופינצטת איריס עדינה במיוחד, בצעו דיסקציה קהה של הפסציה הבטנית כדי לחשוף את ה-IVC ואת כל ענפיו.ראשית, בצעו כויייה לכל הענפים האחוריים של ה-IVC מהורידים הרנליים ועד לפיסוק האיליאקי. לאחר מכן, קשרו את הענפים הצדדיים באמצעות תפרים של proline שאינם רב-תגובתיים במידה 7-0. הפרידו את ה-IVC מהאאורטה ממש מתחת לוורידים הרנליים.השתמש בתפרי proline במידה 7-0 כדי לקשור את ה-IVC. סגור את דופן הבטן באמצעות תפרי Vicryl סינתטיים במידה 5-0. לאחר מכן, מרח דבק עורי לסגירת העור.יש לעקוב אחר בעל החיים בכלוב התאוששות תחת מנורת חימום, ולאחר מכן להחזירו ליחידת הדיור המקורית שלו. ניתוח זה משווה בין עכברי בקרה לבין בעלי חיים שעברו קשירה של ה-IVC ותרומבוזה במועד ההמתה. ביום השני או ביום השישי, הוסרו קריש ה-IVC ודופן הווריד הנלווית לו ונשקלו.מדידת משקל הקריש מאפשרת לחוקר לתעד את מידת התסביב (thrombosis) ואת מידת נסיגתו לאורך זמן. היא מהווה אינדיקטור לאירוע הדלקתי הקשור להפעלה של תאי אנדותל. המדידה היא גם אינדיקציה שימושית ליעילותו של חומר טיפולי בהפחתת הדלקת ובצמצום כמות הקריש בדופן הווריד. במקרה זה, ה-IVC הוסר יחד עם האורטה.חתכים טבועים בפראפין המונחים על גשמיות ונצבעים בהמטין ואאוזין. גרף זה מייצג את מספר התאים הפולימורפוניוקלאריים או ה-PMNs ברקמות מעכברי ביקורת לעומת עכברי ניסוי. מדידה של אוכלוסיות תאי דלקת בדופן הווריד משמשת לתיעוד התגובה הדלקתית הטבעית, משלב חריף למסווג כרוני, בדופן הווריד בנוכחות קרישי ווריד; ביום השני של תגובה דלקתית חריפה, השכיחות צפויה להיות בעיקר של נויטרופילים.כפי שמוצג בדמות זו, אם לא קיימת זיהום, אוכלוסיית הנויטרופילים בדופן הווריד צפויה לרדת לאחר היום השני. במודל העכבר שלנו לפתורי ורידי. כאן, מוגש למשאל ההשוואה מספר המונוציטים בדופן הווריד.תגובה דלקתית תת-חריפה וכרונית יותר של דופן הווריד תראה עליות. באוכלוסיות מונוציטים בדופן הווריד, המונוציטים מפרישים אנזימים פרוטאוליטיים, אשר הוכח כי הם מקדמים את הרזולוציה הטבעית של הפקקת הווריד. עם הזמן, אם אין זיהום. מתוך סרטון זה, אמורה להיות לכם כעת הבנה טובה לגבי אופן ביצוע מודל הליגציה של ה-IVC שלנו.מודל זה מצוין לחקר תהליכי thrombogenesis ופירוק של קריש דם לאורך זמן.

mouse-complete-stasis-model-of-inferior-vena-cava-thrombosis

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אינדוקציה אלקטרוליטי של הפעלת האנדותל אל פני השטח הפנימי של תוצאות הנבוב נחותים קאווה להיווצרות סוג ורידי פקיק עקב הפעלת האנדותל בדם קיפאון חלקי, שני מרכיבים של השלישיה של וירצ'וב.

אלקטרוליטי נחותים הווריד הנבוב Model (EIM) של פקקת ורידים

סרטון זה מדגים את ההליך של שכפול שבץ טרומבוטי במודל עכבר על ידי חסימת עורק הצוואר המשותף הימני וחשיפת העכבר לסביבה דלת חמצן. תהליך זה מפחית את זרימת הדם והחמצן למוח, וגורם להיווצרות קרישי דם ולנזק מוחי.

גרימת שבץ טרומבוטי באמצעות היפוקסיה ואיסכמיה במודל עכבר

נתאר כאן היצרות ב הכלילי התחתון כמודל מאתר של פקקת ורידים עמוקה. מודל זה recapitulates הגבלת זרימת דם, אחד הגורמים המפעילים העיקריים של פקקת ורידים בבני אדם.

היצרות של הכלילי התחתון: מודל מאתר של פקקת ורידים עמוקה

בפרוטוקול הנוכחי מתאר את השלבים להשגת פקקת ורידים באמצעות מודל של ההקפאה. בנוסף, אנו משתמשים בשיטה לא פולשנית למדוד כגון היווצרות והרזולוציה לאורך זמן.

פקקת ורידים עמוקה שנגזרות Stasis בעכברים המנוטרת על-ידי בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה

Aortocaval פיסטולה נוצר על ידי לפרוץ את העורקים מורנה אינפרא כליות באמצעות שני הקירות לתוך הורקאווה הנחותים ולאחר מכן הבריאה של היצרות בתוך הזרימה שלה באמצעות הארכה חלקית של האובורד הנחותים. מודל זה ניתן לשימוש כדי ללמוד היצרות הורידים המרכזי.

מודל מורנה של היצרות הורידים המרכזית באמצעות Aortocaval פיסטולה עם היצרות זרימה יוצאת

כאן, אנו מקימים מודל עכברוש ספראג-דולי (SD) חדשני של פקקת סינוס קשת מעולה (SSS) באמצעות שיטת תסחיף חוט, ואת היציבות והאמינות של המודל אומתו.<br...

הקמת מודל עכברוש של חסימת קשת-סינוס מעולה באמצעות שיטת תסחיף חוט

מאמר זה נועד להציג שיטה אופטימלית להערכת פקקת ורידים במודל סרטן עכברים, באמצעות קליפסים וסקולריים להשגת קשירה ורידית. אופטימיזציה ממזערת את השונות במדידות הקשורות לפקקת ומשפרת את הרלוונטיות לפקקת ורידים הקשורה לסרטן אנושי.

בדיקת פקקת ורידית במודל עכבר של סרטן

הפרוטוקול מציג מודל הישרדות של מכרסמים לבדיקת התערבויות של בלון ארסי (VB) בוורידים עמוקים שאינם טרומבוטים, טרומבוטיים ופוסט-טרומבוטיים.

מכרסם נחות Vena Cava Venoplasty בלון מודל

כדי לשפר את הידע של היווצרות neotissue תאית ומולקולרית שלנו, מודל עכברי של TEVG פותח לאחרונה. השתלים הושתלו שתלי כחציצת וריד נבוב infrarenal בעכברי C57BL / 6. מודל זה משיג תוצאות דומות לאלה שהושגו בחקירה הקלינית שלנו, אבל לאורך זמן כמובן הרבה מקוצר.

השתלה של וריד נבוב חציצת שתל נחותה בעכבר דגם

הסרטן הוא מחלה מורכבת שמושפעת מהרקמות המקיפות את הגידול, כמו גם המתווכים פרו מקומיים ואנטי דלקתיים. לכן, דגמי הזרקת orthotropic, ולא מודלים תת עורי עשויים להיות שימושיים ללמוד התקדמות הסרטן באופן שהפתולוגיה אנושית מחקה טוב יותר.

הזרקת orthotopic של תאי סרטן השד לחלב שומן Pad של עכברים לחקר התפתחות גידול.

למדו את מודל עכבר הקיפאון המלא של פקקת נחותים הווריד הנבוב לחקר תהליכי היווצרות פקקת ופתרונה. שיטה זו מאפשרת ניתוח כמותי של רקמת דופן הווריד והפקקת לאורך זמן.

עכבר דגם השלם הקיפאון של פקקת נחותים הווריד הנבוב

גלה סרטונים נוספים