Name: מדידה של לכידות צבירה ידי Tensiometry Surface רקמות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 49 s
Description: למדו כיצד למדוד לכידות תוך-תאית באגרגטים תלת-ממדיים דמויי רקמות באמצעות טנסיומטר. שיטה זו מאפשרת לכמת מתח פני רקמה ולקשרו להתפשטות גידולים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. הכנה מצטבר עבור מדידה של מתח הפנים רקמות. עבור תאים חסיד, spheroids יכול להיווצר באמצעות אחת השיטה טיפה תלויה או על ידי יצירת דף קוהרנטית של תאים כי אז יכול להיות חתך לתוך שברי 1 מ"מ. היווצרות צבירה בשיטת ירידה תלוי: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקרוב ומחוברות בתרביות תאים חסיד צריך להיות מבוגר כדי מפגש 90%, monolayers ואז יש לשטוף פעמיים עם PBS. לאחר ניקוז טוב, להוסיף 2 MLS (עבור 100 צלחות מ"מ) של 0.05% טריפסין-1 mM EDTA, ו לדגור על 37 מעלות צלזיוס עד תאים לנתק. עצור trypsinization ידי הוספת 2 MLS של המדיום להשלים בעדינות להשתמש פיפטה 5 מ"ל ל triturate את התערובת עד התאים בתרחיף. העברת התאים צינור חרוטי 15 מ"ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 40 μl של פתרון DNAse 10 מ"ג / מ"ל ​​מניות דגירה במשך 5 דקות ב RT. וורטקס בקצרה צנטריפוגות ב XG 200 במשך 5 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בטל supernatant ולשטוף עם גלולה 1 מ"ל להשלים בינוני רקמה תרבות. חזור, ואז התאים resuspend ב 2 MLS של המדיום רקמה שלמה תרבות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספירת התאים באמצעות hemacytometer, או נגד תא אוטומטיות ולהתאים הריכוז 2.5 x 10 6 תאים / מ"ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מכסה צלחת 60 מ"מ רקמת תרבות מקום 5 MLS של PBS בתחתית הצלחת. זה ישמש חדר הידרציה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך את המכסה להשתמש פיפטה 20 μl להפקיד 10 טיפות μl על החלק התחתון של המכסה. ודא כי טיפות ממוקמים מספיק מזה כדי לא לגעת. אפשר במקום לפחות 20 טיפות לכל מנה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך את המכסה על חדר-PBS מלא התחתונה לדגור על 37 ° CO 5 / 2% / 95% לחות, לעקוב אחר טיפות יומי לדגור עד או יריעות התא או אגרגטים יצרו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר בצורת יריעות, הם יכולים להיות מועברים מסביב לתחתית הכוס שייקר צלוחיות המכילות 3 של ה-MLS בינוני מלא מודגרות באמבט מים רועד ב 37 ° C ו 5% CO 2 עד טופס spheroids. </li></ol> היווצרות צבירה בשיטת גיליון התא: <ol start="9" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המתלים תא יחיד מוכנים כפי שתואר לעיל, אך ריכוז מותאם 1x10 6 תאים / מ"ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת 3 מ"ל של השעיה התא עד 10 מסביב לתחתית צלוחיות מ"ל (Belco, Vineland, NJ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה צלוחיות באמבט מים gyratory / שייקר (ניו ברונסוויק מדעי, אדיסון, ניו ג'רזי) בשעה 37 ° C, 5% CO 2 עבור 4H בסל"ד עד 120 תאים להתאושש trypsinization. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת התאים צינור עגול תחתית זכוכית צנטריפוגה צנטריפוגה ב X 200 גרם לתוך גלולה דק. דגירה של 24 שעות אחר עד לקבלת גיליון קוהרנטית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבולת בעדינות את הצינור התרבות כדי לסלק את הגיליון ושופכים את תוכנו של הצינור אל תוך התרבות קטן, רקמה סטרילית צלחת זכוכית תרבות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש אזמלים מיקרו לחתוך את גיליונות לרסיסים בגדלים שונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה שברי ב 37 ° C על waterbath gyratory שייקר בסל"ד 120 לפי 5% CO 2 על 2 עד 3 ימים או עד שהם הופכים כדורית. </li></ol> 2. מדידה של מתח הפנים המצרפי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משטח רקמה tensiometer. המכשיר מוצג תאנים. 1 ו -2. התא דחיסה (איור 3) מורכב משני חדרים. החדר החיצוני (OC) מחוברת משאבה 37 ° C במחזור המים, ומשמש לווסת את הטמפרטורה של החדר הפנימי (IC). החדרים בנויים Delrin הסתובבו ומכילים חלונות קוורץ להדמיה של המצרף. נמוך יותר (בלוס אנג'לס) הרכבה ברגים לתוך הבסיס של החדר הפנימי והוא משמש 1) עמדת המצרפי בחדר הפנימי; 2) חותם את החלק התחתון של החדר הפנימי: 3) להעלות את המצרפי ליזום דחיסה; ו (4 ) לשלוט על המרחק בין לוחות מקבילים ולכן דחיסה של המצרף. הליבה המרכזית (CC) האסיפה היא מתכווננת. קצה של הליבה המרכזית (הדום) מורכב חלקה טפלון משמש הצלחת דחיסה נמוך (LCP). צלחת דחיסה העליון (UCP) הוא גליל טפלון 15mm ארוך התלוי מהזרוע איזון (B) על ידי חוט להבה יישר ניקל כרום (NCW) *. במהלך ניסוי, במצטבר תא (A) ממוקם על הצלחת התחתונה וגדל עד שהוא קשר את הצלחת העליונה. צלחת העליון מחובר בזרוע איזון (B). דחיסה של מצרף גורמת תזוזה של היד איזון. האיזון הוא כאהן / Ventron מודל 2000 electrobalance הקלטה, הפועלת על עיקרון האיזון null. נקודת המשען של הזרוע האיזון יש עוגן בתוך שדה מגנטי קבוע. כאשר מאזן פועל, זה ללא הרף מודולציה עובר זרם דרך הרכבה האלקטרומגנטי, אשר בתורו שומר על איזון זרוע במצב אופקי. כאשר אובייקט הוא מושעה מהזרוע איזון, מתח, אשר חל איזון כדי לשמור על שלובי horizoעמדת ntal, הוא יחסי לשקול של האובייקט. מתח זה מודד את כוח דחיסה חיצוני להחיל במצטבר. הצורה של צבירה מנוטר על ידי תצפית ויזואלית באמצעות stereoscope 25 x SMZ10A Nikon מצמידים את המחשב מצויד grabber מסגרת. כדי למזער הידבקות של אגרגטים התא צלחות דחיסה, הן הצלחות דחיסה תחתון ועליון היו מצופים פולי (2-hydroxyethylmethacrylate) {פולי (המה)}, חומר פולימרי אשר התאים אינם דבקים 16. * חוט היא להבה יישר בתלייה באורך 15-inch של חוט מדוכן תשובה ו clamping קליפ קלסר קטן עד הסוף. מבער בונזן מנוהלת מלמעלה למטה, את אורך החוט עד חוט אדום זוהר. החוט יישר לאחר מכן ניתן לחתוך את אורכי המתאים. וו קטן נוצר על ידי כיפוף חוט כ ¼ סנטימטר מקצה באמצעות שני סכיני גילוח. בקצה השני מוכנס לתוך חבית אז הצלחת דחיסה נמוך יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צבירה דחיסה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החדר הפנימי מלא מראש חימם בינוני CO 2 עצמאית רקמה תרבות (Gibco / BRL, ניו יורק). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מצרפים החל בגודל כ 200-300 μ ממוקמים על הצלחת דחיסה נמוך יותר (איור 4 א). מצרפי נטענים על ידי aspirating צבירה במדיום רקמה תרבות בחצי הדרך קצה פיפטה פסטר מצוידת בנורה סיליקון, העברת פיפטה לחדר פנימי, ומיקום קצה פיפטה מעל LCP. המצרפי היא אז גורשו על ידי בעדינות בעדינות לוחצת את הנורה על LCP. לחלופין, במצטבר מותר ליפול על ידי כוח הכבידה על LCP. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צלחת דחיסה העליון (UCP) ממוקמת מעל במצטבר ואיפשר להתיישב, להקים טרום דחיסה בסיסית לכאורה משקל UCP. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> LCP הוא העלה אז עד המצרפי דחוס נגד UCP (איור 4 ב). התאמת גובה של הליבה הפנימית של המנגנון התחתון ישלוט דרגות שונות של דחיסה. דחיסה מנוטר על ידי תצפית דרך מיקרוסקופ לנתח מצויד במצלמת וידאו CCD. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמונות צבירה נלכדים, דיגיטציה, ונותחו באמצעות ImageJ. לכאורה לשנות UCP משקל נרשם ברציפות על מקליט רצועה תרשים, ההישג של שיווי משקל הצורה להיות מסומן על ידי off-פילוס התפוקה מתח את האיזון של כהן. המצרפי כל נתון 2 דרגות שונות של דחיסה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חישוב מתח הפנים המצרפי. בשיווי משקל, צורה, cohesivity של המצרפי של תאים דחוסים בין לוחות מקבילים אשר אין לדבוק ניתן לקבל משוואה יאנג-Laplace (איור 5), שם היא σ cohesivity, F הוא הכוח הפועל לדחוס את המצרפי , πr 3 2 הוא אזור של פני השטח של הצבירה שעליו מופעל כוח F, ו-R 2 ו R 3 הן, בהתאמה, רדיוס של קו המשווה של מצרף דחוס הרדיוס של קשת הגדרת פרופיל פני השטח שלו נורמלי על דחיסת צלחות הארכת ביניהם (איור 6). מדידת כוח דחיסה הגיאומטריה ועל כוח ושיווי משקל צורה ויישום מדידות אלה למשוואה יאנג-Laplace מייצר ערכים מספריים של מתח רקמות לכאורה על פני השטח. בהגיעם שיווי משקל וחישוב σ 1, אגרגטים הם decompressed ואיפשר גישה שיווי משקל השני σ 2 מחושב כמתואר לעיל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אישור נזילות המצרפי. מתח הפנים מחושב של צבירה נוזלי, כאשר נתון לשני עיסויים שונים יישאר קבוע. ב אגרגטים כזה יחס σ 2 / σ 1 יהיה שווה ל 1 ו יפחת היחס של הכוח ליישם דחיסה כל רצופים (F 2 / F 1). לעומת זאת, מתח הפנים מחושב המצרפי של אלסטית יצייתו חוק הוק ולהגדיל את יחסי הכוח ליישם. עבור אגרגטים אלסטי יחס σ 2 / σ 1 לא יהיה שווה ל 1 אבל יהיה במקום גישת היחס בין F 2 / F 1. מתח הפנים של אגרגטים נוזלי יהיה גם ללא תלות בגודל 2,17 המצרפי. מדידות היחיד שבו מתח פנים הוא עצמאי של כוח ליישם וגודל משמשים כדי לחשב σ הממוצע עבור כל קו התא. </li></ol> 3. נציג התוצאות: להלן טבלה של תוצאות TST אופייני אגרגטים של הערמונית fibroblasts חולדה (RPF) ו עכברוש תאים הערמונית שריר חלק (RPSMC). כפי שניתן לראות באיור. 7 אגרגטים של תאים RPF יש מתח הפנים של 22.8 ± 1.1 dynes / ס"מ. יתר על כן, המתח מתכוון פני הערכים שנמדדו לאחר דחיסה 1 לאחר דחיסה 2 היו הזיהוי סטטיסטיתiCal בהשוואה ידי מבחן t מזווג. השווינו גם את היחס של σ 2 / σ 1 ו-F 2 / F 1 על מנת להבטיח כי אגרגטים אלה לא לציית לחוק של הוק, כפי שהם היו, אם הם התנהגו כמו מוצקים אלסטיים. כפי שמודגם בלוח 1, יחס של σ 2 / σ 1 אכן הגישה 1.0. יתר על כן, היחס בין F 2 / F 1 היה גבוה משמעותית מאשר σ 2 / σ 1 (לזווג מבחן t, P &lt;0.05), נוסף המאשר כי אגרגטים אלה אינם מקיימים את חוק הוק ולמעשה מתנהגים כמו נוזלים. ב RPSMCs בניגוד ציית חוק הוק. כפי שניתן לראות בלוח 1, יחס של σ 2 / σ 1 הוא גדול משמעותית מ 1 ולא היה שונה סטטיסטית מזו של F 2 / F 1. כדי להמשיך להפגין נוזל דמוי התנהגות, בחנו את הקשר בין מתח הפנים (σ) ונפח מצטבר. כפי שניתן לראות באיור. 8, נפח היא עצמאית של סיגמא עבור תאים RPF (קו רגרסיה אדום, r 2 = 0.002), בעוד נראה כי כמה התלות של סיגמא על היקף עבור RPSMCs (קו רגרסיה כחול, r 2 = 0.146). נתונים אלה מאשרים כי עוד אגרגטים RPF להתנהג באופן דמוי נוזל, בעוד שאלו של RPSMCs להופיע להתנהג יותר כמו מוצק אלסטי. רק mesurements אלה המתקבלים אגרגטים מתנהג כמו נוזלים יהיה להשתמש כדי לחשב מתח הפנים. <img src="/files/ftp_upload/2739/2739fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. סקירת tensiometer את פני השטח רקמות. <img src="/files/ftp_upload/2739/2739fig2.jpg" alt="איור 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> איור 2. תצוגה מפורטת יותר של החדר tensiometer (פאנל מימין). <img src="/files/ftp_upload/2739/2739fig3.jpg" alt="איור 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 3"> 3. תרשים סכמטי נוף של החדר tensiometer. <img src="/files/ftp_upload/2739/2739fig4.jpg" alt="איור 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 4"> איור 4. תמונות של (B) אגרגטים דחוס (א) ו דחוס. <img src="/files/ftp_upload/2739/2739fig5.jpg" alt="איור 5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 5"> איור 5. משוואת לפלס. <img src="/files/ftp_upload/2739/2739fig6.jpg" alt="איור 6" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 6"> איור 6. דיאגרמה של אגל נוזל דחוס בין שני לוחות מקבילים שהיא שומרת גרוע, בשיווי משקל צורה. R 1 ו R 2 הם רדיוסים two העיקרי של עקמומיות, בקו המשווה של אגל במטוס דרך ציר הסימטריה, בהתאמה. R 3 הוא הרדיוס של השטח החוזר של אגל של מגע עם צלחת או דחיסה. H הוא המרחק בין הלוחות דחיסה העליון והתחתון. X הוא צד אחד של משולש ישר זווית עם R 2 היתר הרחבת נקודת המגע בין פני השטח של אגל או צלחת דחיסה. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td></td><td> σ 1 (dynes / ס"מ ± SEM) </td><td> σ 2 (dynes / ס"מ ± SEM) </td><td> Pσ 1 vs σ 2 </td><td> σ 1,2 (dynes / ס"מ ± SEM) </td><td> σ 2 / σ 1 </td><td> F 2 / F 1 </td><td> Pσ 2 / σ 1 ו-F 2 נ 1 </td></tr><tr><td> RPF </td><td> 22.6 ± 1.7 </td><td> 22.9 ± 1.4 </td><td> &gt; 0.05 * </td><td> 22.8 ± 1.1 </td><td> 1.04 ± 0.04 </td><td> 1.47 ± 0.06 </td><td> &lt;0.05 </td></tr><tr><td> RPSMC </td><td> 15.0 ± 2.8 </td><td> 23.0 ± 3.2 </td><td> 0.039 </td><td> NA </td><td> 1.9 ± 0.3 </td><td> 1.6 ± 0.1 </td><td> 0.16 * </td></tr></tbody></table> איור 7. המדידות TST ואישור נזילות המצרפי אגרגטים של הערמונית fibroblasts חולדה ותאי שריר חלק. <img src="/files/ftp_upload/2739/2739fig8.jpg" alt="איור 8" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 8"> איור 8. הקשר בין סיגמא ונפח עבור מצרפי של RPF (קו אדום) RPSMCs (הקו הכחול).

<ol><li>Foty, R. A., Forgacs, G., Pfleger, C. M., Steinberg, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liquid+properties+of+embryonic+tissues%3A+Measurement+of+interfacial+tensions%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Rev+Lett%22%5BJournal%5D)">Liquid properties of embryonic tissues: Measurement of interfacial tensions.</a> Phys Rev Lett. 72, 2298-2301 (1994).</li>
<li>Foty, R. A., Pfleger, C. M., Forgacs, G., Steinberg, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+tensions+of+embryonic+tissues+predict+their+mutual+envelopment+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Surface tensions of embryonic tissues predict their mutual envelopment behavior.</a> Development. 122, 1611-1620 (1996).</li>
<li>Schotz, E. -M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+differences+in+tissue+surface+tension+influence+zebrafish+germ+layer+positioning%5BTitle%5D)+AND+%22HFSP+Journal%22%5BJournal%5D)">Quantitative differences in tissue surface tension influence zebrafish germ layer positioning.</a> HFSP Journal. 2, 42-56 (2008).</li>
<li>Jia, D., Dajusta, D., Foty, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+surface+tensions+guide+in+vitro+self-assembly+of+rodent+pancreatic+islet+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Tissue surface tensions guide in vitro self-assembly of rodent pancreatic islet cells.</a> Dev Dyn. 236, 2039-2049 (2007).</li>
<li>Schwarz, M. A., Zheng, H., Legan, S., Foty, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+Self-Assembly+is+Modulated+by+Tissue+Surface+Tensions%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Lung Self-Assembly is Modulated by Tissue Surface Tensions.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. , (2010).</li>
<li>Ryan, P. L., Foty, R. A., Kohn, J., Steinberg, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+spreading+on+implantable+substrates+is+a+competitive+outcome+of+cell-cell+vs.+cell-substratum+adhesivity%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Tissue spreading on implantable substrates is a competitive outcome of cell-cell vs. cell-substratum adhesivity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 98, 4323-4327 (2001).</li>
<li>Foty, R. A., Steinberg, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+differential+adhesion+hypothesis%3A+a+direct+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">The differential adhesion hypothesis: a direct evaluation.</a> Dev Biol. 278, 255-263 (2005).</li>
<li>Robinson, E. E., Foty, R. A., Corbett, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibronectin+matrix+assembly+regulates+alpha5beta1-mediated+cell+cohesion%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">Fibronectin matrix assembly regulates alpha5beta1-mediated cell cohesion.</a> Mol Biol Cell. 15, 973-981 (2004).</li>
<li>Robinson, E. E., Zazzali, K. M., Corbett, S. A., Foty, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((alpha5beta1+integrin+mediates+strong+tissue+cohesion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">alpha5beta1 integrin mediates strong tissue cohesion.</a> J Cell Sci. 116, 377-386 (2003).</li>
<li>Winters, B. S., Raj, B. K., Robinson, E. E., Foty, R. A., Corbett, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+culture+regulates+Raf-1+expression+to+modulate+fibronectin+matrix+assembly%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional culture regulates Raf-1 expression to modulate fibronectin matrix assembly.</a> Mol Biol Cell. 17, 3386-3396 (2006).</li>
<li>Caicedo-Carvajal, C. E., Shinbrot, T., Foty, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpha5beta1+integrin-fibronectin+interactions+specify+liquid+to+solid+phase+transition+of+3D+cellular+aggregates%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Alpha5beta1 integrin-fibronectin interactions specify liquid to solid phase transition of 3D cellular aggregates.</a> PLoS One. 5, e11830-e11830 (2010).</li>
<li>Foty, R. A., Steinberg, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+tumor+cell+cohesion+and+suppression+of+invasion+by+E-+or+P-cadherin%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Measurement of tumor cell cohesion and suppression of invasion by E- or P-cadherin.</a> Cancer Res. 57, 5033-5036 (1997).</li>
<li>Foty, R. A., Corbett, S. A., Schwarzbauer, J. E., Steinberg, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dexamethasone+up-regulates+cadherin+expression+and+cohesion+of+HT-1080+human+fibrosarcoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Dexamethasone up-regulates cadherin expression and cohesion of HT-1080 human fibrosarcoma cells.</a> Cancer Res. 58, 3586-3589 (1998).</li>
<li>Winters, B. S., Shepard, S. R., Foty, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biophysical+measurement+of+brain+tumor+cohesion%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Biophysical measurement of brain tumor cohesion.</a> Int J Cancer. 114, 371-379 (2005).</li>
<li>Foty, R. A., Cummings, K. B., Ward, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+surface+tensiometry%3A+a+novel+technique+for+predicting+invasive+potential+of+prostate+tumors+based+on+tumor+cell+aggregate+cohesivity+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Forum+L%22%5BJournal%5D)">Tissue surface tensiometry: a novel technique for predicting invasive potential of prostate tumors based on tumor cell aggregate cohesivity in vitro.</a> Surgical Forum L. , 707-708 (1999).</li>
<li>Folkman, J., Moscona, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+cell+shape+in+growth+control%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Role of cell shape in growth control.</a> Nature. 273, 345-349 (1978).</li>
<li>Foty, R. A., Forgacs, G., Pfleger, C. M., Steinberg, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liquid+properties+of+embryonic+tissues%3A+Measurement+of+interfacial+tensions%5BTitle%5D)+AND+%22Physical+Review+Letters%22%5BJournal%5D)">Liquid properties of embryonic tissues: Measurement of interfacial tensions.</a> Physical Review Letters. 72, 2298-2301 (1994).</li>
<li>Guevorkian, K., Colbert, M. J., Durth, M., Dufour, S., Brochard-Wyart, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aspiration+of+biological+viscoelastic+drops%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Rev+Lett%22%5BJournal%5D)">Aspiration of biological viscoelastic drops.</a> Phys Rev Lett. 104, 218101-218101 (2010).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

מדידת הלכידות המצרפי על ידי TST היא פשוטה יחסית. יש, עם זאת, שלבים עיקריים שיש שולט על מנת להפיק נתונים TST שמיש; 1) אגרגטים חייב להיות &quot;בריא&quot;. זה יכול להיות נשלט על ידי הקפדה היווצרות המצרפי מתחילה בתאים בנקודת המפגש אופטימלי לפני ניתוק. גודל זמן מצטבר ובתרבות חייב גם להיות מבוקרים כדי למזער את הפיתוח של ליבת נמקי בתוך המצרפי; 2) פרמטר נוסף שיכול להשפיע על מדידות TST היא מידת הדבקות של מצרף את צלחות דחיסה העליון או התחתון. לפיכך, ריכוז אופטימלי של פולי-המה בעבר המעיל צל...

<ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מי האמבט / שייקר (ניו ברונסוויק מדעי, אדיסון, ניו ג&#39;רזי) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 10 מ&quot;ל סביב תחתית צלוחיות (Belco, Vineland, NJ) </li></ul>

מדידה של לכידות צבירה ידי tensiometry surface רקמות

Measurement of Aggregate Cohesion by Tissue Surface Tensiometry

מדידה קפדנית של אנרגיית אינטר ניתן לבצע רק באמצעות שיטות מעוגנת בעקרונות תרמודינמיים של מערכות בשיווי משקל. פיתחנו משטח רקמה tensiometry (TST) במיוחד כדי למדוד את האנרגיה משטח ללא אינטראקציה בין תאים. המושגים הבסיסיים biophysical TST תוארו בעבר 1,2 פרט. השיטה מבוססת על התצפית כי תאי מלוכדת הדדית, אם נשמרת רועד תרבות, באופן ספונטני להרכיב לתוך אשכולות. במשך הזמן, אשכולות אלו עגול עד טופס התחומים. התנהגות זו עיגול למעלה מחקה את התנהגות המאפיינת מערכות נוזלי. אנרגיית אינטר נמדדת על ידי דחיסת אגרגטים כדורית בין לוחות מקבילים tensiometer אישית מעוצבת משטח רקמה. משוואה מתמטית אותה משמש כדי למדוד את מתח הפנים של טיפת נוזל המשמש למדידת מתח הפנים של רקמות כמו אגרגטים 3D כדורית. המקבילה הסלולרית של מתח פני הנוזל הוא אנרגיית אינטר, או באופן כללי יותר, cohesivity רקמות. מחקרים קודמים מהמעבדה שלנו הראו כי פני השטח רקמות מתח (1) מנבא כיצד שתי קבוצות של תאים עובריים יהיה אינטראקציה זה עם זה 1-5, (2) יכול מאוד להשפיע על היכולת של רקמות לתקשר עם biomaterials 6, (3) יכול לשנות לא רק באמצעות מניפולציה ישירה של לכידות cadherin מבוססי אינטר 7, אלא גם על ידי מניפולציה של מולקולות ECM מפתח כגון FN 8-11 ו 4) בקורלציה עם פוטנציאל פולשני של סרטן הריאות 12, fibrosarcoma 13, 14 ו - גידול במוח הגידול בערמונית שורות תאים 15. במאמר זה נתאר את מנגנון בפירוט את הצעדים הנדרשים כדי ליצור spheroids, כדי לטעון את spheroids החדרה tensiometer, ליזום דחיסה המצרפי, לנתח ולאמת את פני השטח רקמות מדידות המתח שנוצר.

אנו מתארים שיטה למדידת אנרגיה מחייב, כפי שבא לידי ביטוי מתח הפנים רקמות, בין תאים בתוך הרקמה, כמו אגרגטים 3D. הבדלים מתח הפנים רקמות הוכחו לתאם עם הפולשנות של ריאות, שרירים, גידולים במוח, הם הגורמים הבסיסיים של כינון יחסים מרחביים בין סוגי תאים שונים.

מדידה של לכידות צבירה ידי Tensiometry Surface רקמות

מדידה קפדנית של אנרגיית קישור בין-תאית אפשרית רק באמצעות שיטות המבוססות על עקרונות תרמודינמיים במערכות במצב שיווי משקל. אנו...

פרוצדורה זו מדגימה כיצד למדוד את חוזק הלכידות התאי-פנימית ברקמות תלת-ממדיות דמויות אגרגטים. השלב הראשון הוא יצירת אגרגטים כדוריים דמויי רקמה והעברתם לצלחת פטרי המולאה במצע גידול לרקמות. לאחר מכן, אגרגטים בודדים נשאבים באמצעות פסטורת ומונחים בלוח הדחיסה התחתון של תא הטנזיומטר.לאחר מכן, לוח הדחיסה העליון מחובר לחוט ניקל-כרום, המחבר אותו למאזניים אלקטרוניים וקובע משקל בסיס אפס המכונה F zero. הניסוי מתחיל בהרמת לוח הדחיסה התחתון עד שהאגרגט נדחס בין לוחות הדחיסה התחתון והעליון, ומסתיים כאשר האגרגטים מגיעים לשיווי משקל של צורה וכוח, או FEQ. השלבים האחרונים של הפרוצדורה הם לכידת תמונות, מדידת גיאומטריית האגרגט וכוח ההתנגדות, והזנת מדידות אלו למשוואת young LA place.בסופו של דבר, ניתן להגיע לתוצאות המראות שינויים בלכידות הרקמה וכיצד אלה עשויים להשפיע על התפשטות הגידול או על המיקום המרחבי בין אוכלוסיות תאים שונות, באמצעות בדיקות פיזור צברים או בדיקות מיון תאים, בהתאמה. לפיכך, שיטה זו יכולה לסייע במתן תשובות לשאלות מפתח בתחומי הביולוגיה של גידולים, ההתפתחות העוברית והנדסת רקמות. שאלות כגון כיצד לכידות הגידול משפיעה על פלישה ממאירה, והשכבה של שכבות העובר במהלך הגסטרוולציה?או כיצד ניתן להנדס לכידות כדי ליצור מבנים דמויי איברים תפקודיים In vitro. מניפולציות ניסיוניות הכוללות תרבית של תאים חיים יש לבצע בתנאים אספטיים בתוך מabilis זרימה למינרית ייעודי. יש להשתמש בתמיסות סטריליות ובכלי מעבדה סטריליים לאורך כל התהליך. כדי להתחיל בניסוי זה, קצרו תאי היצמדות ב-90% confluence.ראשית, שאבו את מצע התרבית ושטפו את גילי התאים פעמיים עם PBS. לאחר מכן, שאבו את ה-PBS והעבירו בעזרת פיפט שני מיליליטר של תמיסת 0.05%trypsin ב-EDTA על השכבה החד-שכבתית. הניחו את הצלחת באינקובטור לתרביות רקמה בטמפרטורה של 37 degrees Celsius והדגירו עד להסרת התאים.בשלב הבא, הוציאו את הפלטה מהאינקובטור ועצרו את התהליך על ידי הוספת 2 mL של מצע גידול מלא. השתמשו בפיפט של 5 mL כדי לערבב את התערובת עד שהתאים יהיו בסספנסיון מלא. לאחר מכן, העבירו את סספנסיון התאים למבחנה קונית של 15 mL.טפטף 40 µL של תמיסת DNA בריכוז 10 mg/mL אל תרחיף התאים והדגר בטמפרטורת החדר למשך חמש דקות. לאחר ההדגרה, ערבב את תרחיף התאים קצרות במכשיר vortex ולאחר מכן סבב במצנטריפוגה ב-200 ×g למשך חמש דקות. עם סיום הסבוב, שאב את supernatant והשלך אותו. לאחר מכן, השהה את המשקע ב-1 mL של מצע גידול מלא וחזור על הסבוב במצנטריפוגה כדי לשטוף את המשקע.שעלו את המשקע במיליליטר אחד של מצע מלא, לאחר מכן בצעו ספירת תאים ובמידת הצורך, התאימו את ריכוז תרחיף התאים לריכוז של שש תאים למיליליטר באמצעות מצע מלא ופיפט. העבירו שלושה מיליליטרים של תרחיף התאים לבקבוק בעגול בעל נפח של 10 מיליליטר והדגירו במקבץ מים רוטט בטמפרטורה של 37 °C ו-5% carbon dioxide למשך ארבע שעות ב-120 rotations per minute, עד שהתאים יתאוששו מהיוניזציה, כפי שניתן לראות מהידבקות התאים זה לזה ליצירת צבירים קטנים.בשלב הבא, העבירו את התאים למבחנה צנטריפוגית מזכוכית בעלת תחתית עגולה וסובבו בצנטריפוגה ב-200 ×g למשך ארבע דקות כדי ליצור שכבה דקה לאחר הצנטריפוגה. שחררו מעט את פקק המבחנה כדי לאפשר חילוף גזים, ולאחר מכן הניחו את המבחנה באינקובטור לתרביות רקמה. דגרו למשך 24 שעות, שלאחריהן השכבה אמורה להפוך לקוהרנטית.לאחר 24 שעות, נערנע בעדינות את מבחנת הצנטריפוגה כדי לשחרר את השכבה. לאחר מכן, שפוך את תכולת מבחנת התרבית לתוך צלח זכוכית סטרילי קטן לתרבית רקמות. השתמש במיקרו-סקלפלים כדי לחתוך את שכבת התאים למקטעים בגדלים שונים, ולאחר מכן העבר את המקטעים לבקבוק בעל תחתית עגולה בנפח 10 מיליליטר עם שלושה מיליליטר של מצע לתרבית רקמות.דגרו את המקטעים בטמפרטורה של 37 °C במכשיר טבילה רטט במהירות של 120 סל"ד תחת 5% carbon dioxide למשך יומיים עד שלושה ימים, או עד שיהפכו לכדוריים. ניתן לבצע את יצירת האגרגטים גם באמצעות שיטת הטיפה התלויה. על פי הפרוטוקול שפורסם בעבר, מערך ה-TENSIOMETER של פני הרקמה או ה-TST מורכב מתא הטנזיומטר הראשי המכיל את תא הדחיסה, אמבט מים לשמירה על טמפרטורת התא, מיקרוסקופ דיסקציה עם מצלמת CCD מחוברת, מאזנת חשמלית עם ספק כוח ורושם גרפי.תא הדחיסה של ה-TST מורכב משני תאים, תא חיצוני ותא פנימי. התא הפנימי מכיל את לוחית הדחיסה העליונה ואת לוחית הדחיסה התחתונה, המצופות ב-poly two hydroxyethyl methacrylate. ראשית, הגדירו את משאבת המים הצירקולטורית ל-37 °C וודאו שהצינורות מחוברים לפתחים בתא החיצוני.לאחר מכן, הפיגו את המכלול התחתון, המשמש להעלאת התערובת כדי להתחיל את הדחיסה, אל בסיס התא הפנימי. כעת, הכינו קטע של תיל ניקל-כרום שיושר בלהבה, תחילה על ידי תליית קטע תיל באורך 15 inch ממסדיב ומסמך קליפס קטן לקצהו. לאחר מכן, העבירו מבער בנזן במעלה ובמורד אורך התיל עד שהתיל זוהר באדום.השתמשו בקאטר חוטים כדי לחתוך את החוט שיושר לאורך המתאים. לאחר מכן, השתמשו בשני להבי תער כדי לכופף את החוט כרבע אינץ' מהקצה ליצירת וו קטן. לבסוף, מלאו את התא הפנימי של ה-TST במצע לתרבית רקמות ללא פחמן דו-חמטני, אשר עבר ניקוי גזים על ידי דגירה ב-37 °C למשך 24 שעות.השתמשו בפיפט כדי להוציא בועות אוויר שייתכן והיווצרו על לוח הדחיסה התחתון. מכשיר ה-TST מוכן כעת לניסוי דחיסת הצברים. השתמשו בפיפט כדי לשאוב צבר תאים בגודל של 200 עד 300 מיקרון מלוח התרבית.לאחר מכן, פלט בעדינות את הצבר אל על לוח הדחיסה התחתון בתא הפנימי של מכשיר ה-TST. מקם את הצבר קרוב ככל האפשר למרכז לוח הדחיסה התחתון על ידי דחיפה עדינה באמצעות צינור קפילרי המצויד בלולאת שיער קטנה. חבר את תיל הניקל-כרום של מכלול הלוח אל זרוע המאזניים של מאזני רישום חשמליים מדגם can venton Model 2000.כוון את מיקום המאזניים עד שהלוחיות העליונה והתחתונה של הדחיסות יהיו מקבילות ויהיו אחת מעל השנייה באופן ישיר. המתן עד שהלוחית העליונה תתייצב. לאחר מכן, אפס את רשומת התרשימים למשקל הבסיס שנקבע.השתמשו במיקרוסקופ הדיסקציה המצויד במצלמת CCD כדי ללכוד תמונה של האגרגט שאינו דחוס. לאחר מכן, כווננו את גובה מכשיר הליבה הפנימי כדי לשלוט בדרגת הדחיסה הרצויה, והרימו את פלטת הדחיסה התחתונה עד שהאגרגט יידחס כנגד פלטת הדחיסה העליונה. השתמשו במיקרוסקופ הדיסקציה המצויד במצלמת CCD כדי לנטר את הדחיסה וללכוד תמונות של האגרגט, כגון זו המוצגת כאן.הקליטו ברצף את השינוי המשקוללי הגלוי של לוח הדחיסה העליון במכשיר רישום גרפי (strip chart recorder) לאורך כל תהליך הדחיסה עד להשגת הצורה הרצויה. שיווי משקל יסומן על ידי התייצבות פלט מתח האיזון של הפחמים. השתמשו שוב במיקרוסקופ הדיסקציה המצויד במצלמת CCD כדי לצלם תמונה של התגרית הדחוסה.תמונה זו תשמש למדידת הגיאומטריה של האגרגט. לאחר לכידת התמונה, הורד את לוח הדחיסה כדי לשחרר את דחיסת האגרגט ולמדוד את כוח הדחיסה בשיווי משקל. קרא את רישום רשם התרשימים כהפרש בין הכוח שנמדד רגע לפני שחרור דחיסת האגרגט לבין קו הבסיס שהוגדר כאפס. חזור על התהליך תוך שימוש בדרגת דחיסה שונה כדי לקבוע את שיווי המשקל של הכוח הפעם.מדדו את כוח הדחיסה והגיאומטריה בשיווי משקל של הכוח, והשלימו את המדידות הללו, יחד עם המדידות לשיווי משקל של הצורה, אל משוואת Young-Laplace כדי להפיק ערכים מספריים של מתיחות פני השטח הנראית של הרקמה. בהתאם להוראות בפרוטוקול הכתוב, טבלה זו מציגה מדידות של מתיחות פני השטח של רקמה ואישור לנזילות אגרגטים עבור אגרגטים של פרוסטטה של חולדה, פיברובלסטים ותאי שריר חלק. לאגרגטים של תאי פיברובלסטים מפרוסטטה של חולדה יש מתיחות פני שטח של 22.8 ± 1.1 dines per centimeter.יתרה מכך, ערכי מתירות הפנים הממוצעים שנמדדו לאחר הדחיסה הראשונה ולאחר הדחיסה השנייה היו זהים מבחינה סטטיסטית כאשר השוואתם בוצעה באמצעות מבחן T לצמדים. השווינו גם את היחסים של סיגמא 2 חלקי סיגמא 1 ושל F2 חלקי F1 כדי לוודא שצברים אלו לא צייתו לחוק הוק, כפי שהיו עושים לו התנהגו כמו מוצקים אלסטיים, כפי שמוצג בטבלה 1. היחס של סיגמא 2 חלקי סיגמא 1 אכן שואף ל-1.יתרה מכך, היחס בין F two ל-F1 היה גדול משמעותית מ-sigma two חלקי sigma one, מה שמאשש עוד יותר שצבירים אלה אינם מצייתים לחוק הוק ובפועל מתנהגים כנוזלים. לעומת זאת, כפי שניתן לראות בטבלה one, היחס בין sigma two ל-sigma one של תאי שריר חלק של ערמונית חולדה גדול משמעותית מ-1 ולא היה שונה סטטיסטית מזה של F two חלקי F1. כדי להדגים עוד יותר התנהגות דמוית נוזל, בחנו את הקשר בין מתח הפנים לנפח הצבירים, כפי שניתן לראות כאן. הנפח אינו תלוי ב-sigma עבור תאי RPF, כפי שמתואר על ידי קו הרגרסיה האדום, בעוד שנראה כי קיימת תלות מסוימת של sigma בנפח עבור תאי שריר חלק של ערמונית חולדה, כפי שמתואר על ידי קו הרגרסיה הכחול.נתונים אלו מאשרים עוד כי אגרגטים של פיברובלסטים מפרוסטטה של חולדה מתנהגים באופן דמוי נוזל, בעוד שאלו של תאי שריר חלק מפרוסטטה של חולדה נראים כמתנהגים יותר כמו מוצקים אלסטיים. לפיכך, לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך עבור חוקרים בתחומי ההתפתחות העוברית, הפלישה הממאירה והנדסת רקמות לחקור את תפקידה של לכידות הרקמה בקביעת מדורים וגבולות בין סוגי תאים שונים במהלך התפתחות שכבות הנבט העובריות, במהלך אינטראקציה של תאי סטרומה בגידולים וסידור מחדש של תאי אייlets בלבלב במספר מודלים שונים של בעלי חיים, כולל דו-חיים, זבובים, עופות ומודלים אנושיים.

measurement-of-aggregate-cohesion-by-tissue-surface-tensiometry

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

בדיקת Microtensile לסביבה מבוקרת של nanocomposites הפולימר מכאני-מסתגל ל<em&gt; לשעבר vivo</em&gt; אפיון

שיטה משופרת למכאניים מעגן עצם בדיקה למשטחי שתל מועמד מוצגת. שיטה זו מאפשרת ליישור של כוח השיבוש בדיוק בניצב, או במקביל, למישור של פני השטח השתל, ומספקת אמצעים מדויקים לכוון את כוחות ההפרעה לאזור פרי שתל מדויק.

מכונות בדיקת שיטה משופרת להערכת Anchorage עצם השתל

חומרים פולימריים סופר-הידרופוביים דו-ממדיים ותלת-ממדיים מוכנים על ידי אלקטרו-ספינינג או ריסוס אלקטרו פולימרים מתכלים מעורבבים עם פולימר בעל אנרגיית פני שטח נמוכה יותר בעל הרכב דומה.

בודה חומרים פולימריים עבור יישומים ביו-הידרופובי

ביומכניקה של רקמות חשובה לשמירה על צורת התא ותפקודו ולקביעת פנוטיפ. דוח זה מדגים פרוטוקולים מכניים לא הרסניים לאפיון תכונות אלסטיות וצמיגות של רקמות רכות אנושיות, שניתן ליישם ישירות על מצעים מהונדסי רקמות כדי לאפשר התאמה קרובה של חומרים מהונדסים לרקמות טבעיות.

אפיון ביומכנית של רקמות רכות אדם באמצעות זחה ו מתיחת בדיקה

מאמר זה מתאר שיטה לכימות התנהגות הייבוש הדינמית תכונות מכאניות של שכבה קרנית על ידי מדידה נפתרה מרחבית ב-מטוס התקות ייבוש של דגימות רקמה עגולות דבקות מצע אלסטומר. טכניקה זו יכולה לשמש כדי למדוד עד כמה שונה טיפולים כימיים לשנות תכונות מכאניות ייבוש ורקמות.

מדידת דוגמנות התכווצות ייבוש אנושי שכבה קרנית

מצעים עם נוקשות ב קילו פסקל-הטווח שימושיות ללמוד תגובת התאים נוקשות סביבת מיקרו רלוונטי מבחינה פיזיולוגית. שימוש רק מיקרוסקופ זריחה widefield, האלסטיות של ג'ל סיליקון רך יכול להיקבע באמצעות ההזחה עם כדור מתאים.

מידה נוקשות של סובסטרטים סיליקון רך Mechanobiology מחקרים באמצעות מיקרוסקופ זריחה Widefield

אנו מציגים את התפוקה הגבוהה כוח המתיחה שיטת המציא עם גומי סיליקון (PDMS). העיבוד החדשני הזה מתאים ללימוד שינויים פיזיים בתהליך ביולוגי ומחלות בתהליכים ביולוגיים וביורפואיים שונים. אנו מדגימים את כלי השירות של שיטה זו על-ידי מדידת העליה התלויה של TGF-β במהלך המעבר האפיתל-למסמצ'אל.

תפוקה גבוהה המתיחה כוח מיקרוסקופ באמצעות PDMS מגלה השפעות תלויי מינון של שינוי מקדם הצמיחה-β על המעבר אפיתל-to-מעבר משנה

בדיקה במהלך ניתוח ארתרוסקופיה נעשית בדרך כלל כדי להעריך את המצב של הרקמה הרך, אבל גישה זו תמיד היה סובייקטיבי ואיכותי. דו ח זה מתאר מכשיר גישוש שיכול למדוד את עמידות הרקמה הרכה באמצעות חיישן כוח תלת-צירית במהלך ארתרוסקופיה.

מכשיר בודק למדידת תכונות מכניות של רקמות רכות במהלך ארתרוסקופיה

מוצג כאן פרוטוקול ליצירת רקמות חיבור מהונדסות לתרבות מקבילה של 48 רקמות בלוח רב-בארות עם מוטות כפולים, המתאימים למחקרים מכאניסטיים, מידול מחלות ויישומי סינון. הפרוטוקול תואם פיברובלסטים מאיברים ומינים שונים ומודגם כאן עם פיברובלסטים לב ראשוניים אנושיים.

פיברובלסט נגזר רקמת חיבור מהונדסת אנושית עבור יישומי הקרנה

משטח TGT הוא פלטפורמה חדשנית לחקר גורם גדילה-אינטגרין crosstalk. תכנון הבדיקה הגמיש, הספציפיות של ליגנד ההדבקה והמודולציה המדויקת של תנאי הגירוי מאפשרים הערכות כמותיות חזקות של יחסי הגומלין בין EGFR-integrin. התוצאות מדגישות את EGFR כ'מכנו-מארגן' המכוון את מכניקת האינטגרין, ומשפיע על מכלול הידבקות המוקד ועל התפשטות התאים.

מד מתח קשירה בדיקות לכימות גורם גדילה מתווך מכניקת אינטגרין והדבקה

פיתחנו צינור הדמיה מכנו כדי לחקור את תכונות הרובד הטרשתי ההטרוגני, המבני והמכני. צינור זה מאפשר התאמה של הזווית המקומית הדומיננטית ופיזור כיוון סיבי הקולגן, התנהגות הקרע וטביעות האצבע המאמץ של רקמת הרובד הסיבי.

שיטה לחקר הקשר בין מבנה הקולגן המקומי לבין התכונות המכניות של רובד טרשתי ברקמה סיבית

למדו כיצד למדוד לכידות תוך-תאית באגרגטים תלת-ממדיים דמויי רקמות באמצעות טנסיומטר. שיטה זו מאפשרת לכמת מתח פני רקמה ולקשרו להתפשטות גידולים.

מדידה של לכידות צבירה ידי Tensiometry Surface רקמות

גלה סרטונים נוספים