Name: אבחון חיצוני ו Endoparasites בחולדות מעבדה ועכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-09-06T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 3 s
Description: למד שיטות לאבחון פרזיטים בחולדות ועכברי מעבדה באמצעות בדיקת פרווה, צואה ותוכן מעיים. טכניקות אלו מסייעות לחוקרים לשמור על בריאות המושבות ועל שלמות המחקר.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Baker, D. G. Chapter 23. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBaker%2C+DG+%22The+Mouse+in+Biomedical+Research%3A+Diseases%22">The Mouse in Biomedical Research: Diseases</a>. Fox, J. Diseases Vol. 2, Academic Press. (2007).</li>
<li>Baker, D. G. Chapter 11. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBaker%2C+DG+%22Flynn%27s+Parasites+of+Laboratory+Animals%22">Flynn's Parasites of Laboratory Animals</a>. Baker, D. G. , Blackwell. 303-398 (2007).</li>
<li>Owen, D. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aOwen%2C+DG+%22Parasites+of+Laboratory+Animals%22">Parasites of Laboratory Animals</a>. 12, Royal Society of Medicine. (1992).</li>
<li>Pritchett, K. R. Chapter 22. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPritchett%2C+KR+%22The+Mouse+in+Biomedical+Research%3A+Diseases%22">The Mouse in Biomedical Research: Diseases</a>. Fox, J. Diseases Vol. 2, Academic Press. (2007).</li>
<li>Smith, P. H., Wiles, S. E., Malone, J. B., Monahan, C. M. Chapter 1. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSmith%2C+PH+%22Flynn%27s+Parasites+of+Laboratory+Animals%22">Flynn's Parasites of Laboratory Animals</a>. Baker, D. G. , Blackwell. 1-13 (2007).</li>
<li>Wasson, K. Chapter 21. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWasson%2C+K+%22The+Mouse+in+Biomedical+Research%3A+Diseases%22">The Mouse in Biomedical Research: Diseases</a>. Fox, J. Vol. 2, Academic Press. 517-550 (2007).</li>
</ol>

המחברים הם כל העובדים של צ&#39;ארלס ריבר, ספקית של בדיקות אבחון ריאגנטים, כולל הבדיקות שתוארו לעיל.

כאשר עובד במעבדה, בטיחות צריכה להיות תמיד דאגה. זכור ללבוש ציוד מגן מתאים כאשר עובדים עם בעלי חיים כדי לנקות תחנת העבודה שלך עם חומר חיטוי לפני ואחרי. שיטות אלה נועדו בעיקר כדי למצוא טפילים של מכרסמים במעבדה במקומות שנבדקו, כלומר, הם יכולים לזהות אקזוטיים או טפילים נדירים ביותר, כמו גם את ותולעי סיכה יותר נפוצים קרדית פרווה. למרות שהם חלים גם על מינים אחרים, מכרסמים בר ייתכן טפילים נוספים במקומות כגון subcutis הכבד, המוח, לא הוערכו על ידי השיטות הנ&quot;ל.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> קרש חיתוך </td><td> Thermo Electron Corp </td><td> חתול # 36114 </td><td></td></tr><tr><td> מספריים קטנים </td><td> ROBOZ </td><td> RS-5910, G204 </td><td> להבי 23mm, 3.5 &quot;אורך, ישר </td></tr><tr><td> בינוני מספריים </td><td> ROBOZ </td><td> RS-6808, G207 </td><td> 5 &quot; </td></tr><tr><td> מלקחיים-מעוקל </td><td> ROBOZ </td><td> RS-8254 (M1/21004) </td><td> 4.5 &quot;, משונן, עקומה קלה </td></tr><tr><td> מלקחיים-Microdissecting </td><td> ROBOZ </td><td> RS-5238 </td><td> הדסון-(אוולד) </td></tr><tr><td> מלקחיים, רקמות מלקחיים </td><td> ROBOZ </td><td> RS-8160 </td><td> עכברוש שן </td></tr><tr><td> מתכת בדיקה </td><td> VWR </td><td> חתול # 25778-000 </td><td></td></tr><tr><td> Hemostats </td><td> יתרון </td><td> V97-48 </td><td></td></tr><tr><td> המוליך מקלות </td><td> הפוריטנים </td><td> Applicators 6in, שופט # 807 </td><td></td></tr><tr><td> הביתור מיקרוסקופ </td><td> אולימפוס </td><td> SZ51, שוט, ACE1 </td><td></td></tr><tr><td> צלחת פטרי </td><td> VWR </td><td> חתול 100mm, # 3401PDNL </td><td></td></tr><tr><td> כיסוי תלושי </td><td> VWR </td><td> מיקרו זכוכית לכסות, חתול # 48366-067 </td><td></td></tr><tr><td> שקופיות </td><td> VWR </td><td> VistaVision שקופיות מיקרוסקופ חתול # 16004-368 </td><td></td></tr><tr><td> Inoculating לולאה </td><td> VWR </td><td> חתול # 50815-040 </td><td></td></tr><tr><td> מיקרוסקופ אור </td><td> אולימפוס </td><td> דגם # BX41TF </td><td></td></tr><tr><td> מעבדה בתנור </td><td> קווינסי מעבדה בע&quot;מ </td><td> 10 דגם מעבדה תנור </td><td></td></tr><tr><td> סרכזת </td><td> Beckman Coulter </td><td> אלגרה X-12R </td><td></td></tr><tr><td> Vortexer </td><td> VWR </td><td> ה-Mini-Vortexer </td><td></td></tr><tr><td> מבחנה </td><td> קימבל-Chase </td><td> צינור 15 מ&quot;ל צנטריפוגות חד פעמיות, חתול # 73790-15 </td><td></td></tr><tr><td> כיסוי תלושי </td><td> VWR </td><td> פלסטיק לכיסוי מיקרוסקופ מחליק, חתול 22mm, # 48376-049 </td><td></td></tr><tr><td> כובעי הלבן </td><td> VWR </td><td> חתול # 60869-089 </td><td></td></tr><tr><td> יוד </td><td> רולי ביוכימיים המכון </td><td> חתול # SO-364 </td><td></td></tr><tr><td> אבץ סולפט </td><td> סיגמא אולדריץ </td><td> חתול # 1000917519, Z4750-500 גרם </td><td></td></tr><tr><td> סוכרוז </td><td> Mallinckrodt כימיקלים </td><td> חתול # 8360-06 </td><td></td></tr><tr><td> פנול </td><td> EMD </td><td> חתול # PX0510-1 </td><td></td></tr><tr><td> צלופן סרט </td><td> סטייפלס </td><td> קלטת חתול הנעלמה, # 504712 </td><td></td></tr><tr><td> שמן מינרלי </td><td> Mallickrodt </td><td> חתול # 6358 </td><td></td></tr></tbody></table>

אבחון חיצוני ו endoparasites בחולדות מעבדה ועכברים

Diagnosis of Ecto- and Endoparasites in Laboratory Rats and Mice

טפילים פנימיים וחיצוניים להישאר דאגה משמעותית מתקני מכרסם מעבדה, מתקני מחקר רבים הנמל כמה חיות parasitized. לפני היציאה בדיקה של בעלי חיים טפילים, שני דברים צריך להיחשב. אחת: מה שימוש ייעשה במידע שנאסף, ושני: אשר הבדיקה המתאימה ביותר. בידיעה בעלי חיים parasitized יכול להיות משהו במתקן מקבל, אבל לעיתים קרובות יש צורך לטפל בבעלי חיים, ואז לקבוע את יעילות הטיפול. טפילים ניתן לזהות אצל בעלי חיים באמצעות טכניקות שונות, כולל דגימות שנלקחו מבעלי חיים או מורדמים. מבחינה היסטורית, עם רגישות בדיקות האבחון הגדולים הנדרשים המתת חסד של בעלי חיים, למרות PCR אפשרה רגישות גבוהה בדיקות עבור מספר סוגים של טפיל. מאמר זה מדגים את הליכי זיהוי של אנדו ו ectoparasites בעכברים וחולדות. ההליכים באותו החלות על מכרסמים אחרים, אם כי מינים של טפילים מצאו יהיה שונה.

מאמר זה מתאר את ההליכים השונים חולדות ועכברים ההקרנה לזהות אנדו או ectoparasitism. מבחני אבחון כמה יהיה הפגינו, הן אלה מתאימים לשימוש בבעלי חיים לבין אלה המשמשים לאחר המתת חסד של החיה. צילומים לסייע בזיהוי של טפילים חולדה ועכבר ייכלל.

אבחון חיצוני ו Endoparasites בחולדות מעבדה ועכברים

טפילים פנימיים וחיצוניים נותרים מקור דאגה משמעותי במתקני מכרסמים למעבדה, ומתקני מחקר רבים מאכלסים אוכלוסיות מסוימות של בעלי חיים פנימיים...

המטרה הכללית של הליך זה היא לקבוע האם קיימים טפילים בחולדות או עכברים של מעבדה. ניתן לבצע זאת במגוון דרכים, כולל בדיקה של הפרווה, בדיקת העור, בדיקת הצואה ובדיקת תכולת המעיים. בסופו של דבר, ניתן להפיק תוצאות המספקות מידע חשוב על הבריאות הכללית של המושבה באמצעות בדיקה שגרתית של דגימות אלו.הדגמה חזותית של שיטות אלו היא קריטית, שכן אם הן אינן מבוצעות ביסודיות ובזהירות, עלולה להיפלט זיהום טפילי. בדרך כלל, אנשים שאינם מיומנים בשיטות אלו יתקשו, כיוון שגם אם הטכניקות בוצעו נכון, ייתכן שיהיה זיהוי שגוי של הטפילים.השיטות שנדגים יכולות לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בנוגע למצב הבריאותי של החולדות והעכברים המשמשים למחקריך. לפני לקיחת דגימות פרווה ודגימות פריאנליות, הכין לפחות שתי זכוכיות עבור כל חיה עם טיפות של שמן מינרלי. הרם את העכבר הרלוונטי מכלובו והנח אותו בחלקו הפנימי של מכסה הכלוב ההפוך.החזיקו את העכבר מהזנב. הדביקו בחוזקה רצועת סרט דבק סלופן באורך חמישה סנטימטרים לאזור הפרינאום והאזור הפריאנאלי של העכבר. אם הפעולה הצליחה, שיער אמור להידבק לסרט.המשיכו להחזיק את בעל החיים ואחזו בפרוותו בעזרת פינצטה. שלפו בעדינות דגימות פרווה מאזור השכמה, מהאזור הגבתי של הצוואר, מאזור בית השחי, מאזור המפשעה ומargmax גב העכוז. הניחו דגימות אלו על סרט דבק סלופנים באורך של חמישה סנטימטרים.עם כל דגימה שנלקחת, הצמידו את הסרט לפסלת כאשר הצד הדבקי פונה כלפי מטה. לאחר לקיחת כל הדגימות, טפטפו טיפה נוספת של שמן מינרלי על כל דגימה והניחו כיסויי זכוכית. בעת בדיקת הפסלות מהאזור הפריאנאלי, הסיכוי למצוא ביצים של טפיל אחר מלבד si facia הוא נמוך.לבדיקת צואה, אספו שתיים עד חמש כדורי צואה מכל חיה או מהכלוב. אם הדגימות יבשות במיוחד, לחח אותן עם 500 microliters של 0.9%saline. הניחו את הדגימות במבחנה של 10 milliliter או במכשיר לצפצוף צואה (fecal flotation device).הניחו את מבחנת האיסוף בתוך צלחת פטרי ומלאו את המבחנה עד לרבע מגובהה בתמיסת ציפה דחוסה. לאחר מכן, מעכו וערבבו את הצואה לתוך התמיסה במבחנה עד שלא יישארו חתיכות גדולות. המשיכו להוסיף תמיסת ציפה עד להיווצרות מניסקוס מעל שפת המבחנה.לאחר מכן, הנח את מכסה הזכוכית (cover slip) על המניסקוס והדגר את הבקבוקון בטמפרטורת החדר למשך 15 דקות. במהלך ההדגרה, טפילים, ביצים, פרוטאוזומים ואואסיסים עולים ונצמדים למכסה הזכוכית, אשר לאחר מכן מורכבת על סרטה (slide) לבדיקה נוספת. ניתן לבצע בדיקה זו בכלי פשוט כגון בקבוקון לתרופות.אם מקפיאים אינם זמינים, התחילו באיסוף של שני עד 10 גרגרי צואה לכל חיה, ואם הם מיובשים, השקו אותם מחדש ב-500 microliters של 0.9% saline. מלאו מבחנת צנטריפוגה מזכוכית של 15 milliliter עד לרבע מגובהה בתמיסת ציפה דחוסה וערבבו את הדגימה. סגרו את מבחנת הזכוכית באמצעות מכסה פלסטיק עם תפס, וערבבו את התערובת במערבל וורטקס למשך 15 עד 30 שניות עד לקבלת מראה הומוגני.כעת, הוסיפו תמיסת ציפה נוספת לכל מבחנת דגימה, כדי ליצור מניסקוס חיובי קל. הניחו כיסוי פלסטיק על כל מבחנה וודאו שהוא נמצא במגע מלא עם שפת המבחנה.לקבלת איטום מיטבי, נקו את המבחנה בעזרת מקלון. לאחר מכן, סבבו במערך צנטריפוגה את המבחנות ואת לבי דקות הזכוכית למשך 10 דקות. אם לבי דקות זכוכית אבדו או נשברו, החליפו אותם והטו בעדינות את המבחנות כך שהמניסקוס יבוא במגע עם לבי דקות הזכוכית החדש.לאחר מכן, הסירו את כל כיסויי הזכוכית והניחו אותם על תיתק מיקרוסקופ זכוכית נקי ומסומן. צביעה ביוד תסייע בזיהוי ציסטות בבעל חיים תחת הרדמה או לאחר הפסקה הומנית של החיים. גזרו את פרוות הגב סמוך לבסיס הזנב, את אזור הרקה של הראש או סביב כל נגע בעור או אתר אחר המיועד לגרידה, ובצעו גרידה עמוקה של העור באמצעות להב הגרידה בכיוון ההפוך לכיוון צמיחת הפרווה.פעולה זו שוחקת את האפידרמיס. נגב את הלהב בשמן מינרלי שהושם על שלגייה מסומנת. הוסף טיפת שמן נוספת במידת הצורך.לפני כיסוי הדגימה עם זכוכית כיסוי, הניחו בעל חיים שהורג בשיטה הומנית על לוח ניתוח נקי והשתמשו בפינצטה כדי להרים את דופן הבטן באזור איברי המין. לאחר מכן, בעזרת מספריים, חתכו בזהירות את דופן הבטן הגחונית מאזור איברי המין ועד לבסיס כלוב הצלעות, והסירו את העור ואת השרירים כדי לחשוף את המעיים. לאחר מכן, אספו חלק מהמעי העיוור (secum) ומהתריסריון (duodenum) אל תוך המכסה של צלחת פטרי.בצעו חתך לאורכו של כל מקטע מעי. כדי לחשוף את הרירית, הניחו שתי טיפות של 0.9%saline על זכוכית מיקרוסקופ אחת מסומנת. לאחר מכן, באמצעות לולאת תהליל סטרילית, גרדו את הרירית של השתוקף (duodenum) והעבירו את הגרד לתוך טיפה אחת של saline.חזור על התהליך, והעבר דגימה מהמעי העיוור (cecum) לטיפה השנייה. הסר את שאר המעיים. התחל מהתריסריון (duodenum) והמשך עד למעי הגס היורד (descending colon).העבירו את המעיים לתחתית של צלחת פטרי בנפח 100 מיליליטר. השתמשו במספריים כדי לחתוך את המעיים למקטעים קטנים יותר. הוסיפו לצלח מספיק מי ברז כדי לשקוע באופן חלקי את הרקמה שנאספה.דגרו את תערובת הדגימה בטמפרטורה של 35 עד 40 °C למשך 10 דקות לפחות. פעולה זו תשחרר ותחשוף את ה-luminal helmets בזמן דגימת המעי המעוכשת מדגרת. השתמשו במיקרוסקופיית ניגודיות פנים (phase contrast microscopy) כדי לבחון את דגימות התריסריון וה-SQL לאיתור טפילים.לאחר השלמת האינקובציה של דגימת המעי המלאה, בחנו את תוכן הצלחת תחת מיקרוסקופ סטריאו (dissecting microscope). בצעו בדיקה יסודית באמצעות פרוב. תולעי מעיים (Pinworms) ייראו כתולעים לבנות קטנות דומות לשערות.תולעי סרט יופיעו כתולעים שטוחות בעלות פלגמנטים. אספו תולעים או חומרים חשודים באמצעות פינצטה קטנה והניחו אותם על תיתק. לבדיקה נוספת תחת מיקרוסקופ אור, הניחו את העכבר או החולדה שהורגשו ישירות על במה של מיקרוסקופ dissection תחת עדשה של 10x, השתמשו במקל יישום כדי להפריד את הפרווה ובדקו את בסיס השערות.טפילים חיצוניים עשויים להיראות כקשקשים או כהצטברות שעוות צהובה בבסיס מושב השערה או ישירות על העור. יש לחפש טפילים חיצוניים לכל הפחות באזור הגולגולת, ובאזורים המפשעים והבתיים.בדקו בקפידה בין העיניים, בין העפעפונים, בין השכמה ותחת הלסת. העבירו בעזרת פינצטה קטנה אקטופרזיטים אפשריים וחומרים חשודים אחרים לזכוכית כיסוי.הטמעו אותם בשמן מינרלי לצורך זיהוי. פרוצדורות אלו יאפשרו למצוא טפילים נפוצים רבים. להלן מספר דוגמאות.אלו הן ביצי SE facia שנמצאו מדגימות סרט דבק פרינאליות. בתוך פקק פרווה נמצאה קרדית myopia musculi מהכנה של סרטיזציית צואה. אלו הן ביצי picis tetter.בבדיקה ישירה זו של רירית המעי, ניתן לראות תולעים. בדיקה של מעיים שעברו מaceration חשפה תולעי שרוך בוגרות אלו. לאחר השליטה בטכניקה, בדיקה מלאה זו לטפילים עשויה להימשך פחות משעה. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיו בעלי הבנה טובה של אופן ביצוע בדיקות שונות לטפילים בחולדות ועכברים. אל תשכחו כי חלק מהטפילים הללו עלולים לעבור לבני אדם.הקפידו תמיד על כללי הבטיחות הבסיסיים במעבדה.

diagnosis-of-ecto-and-endoparasites-in-laboratory-rats-and-mice

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

זיהום Trichuris muris הוא מודל מעיים של חסינות Th2 שבו עכברים עמיד ליצור תגובת Th2 מגן עכברים רגישים ליצור תגובה פתולוגית Th1.

Trichuris muris זיהום: מודל של חסינות סוג 2, דלקת במעיים

מאמר זה מתאר את ההליכים לביצוע בדיקה שלאחר המוות הבסיסי של עכבר או חולדה, ואת אוסף של איברים בסיסיים, כמו גם סוגי המדגם מאתגר יותר מ להערכה היסטולוגית, מיקרוביולוגית, ו-PCR.

Necropsy לאבחון רקמות אוסף נבחר מדגם של חולדות ועכברים

מחלת ליים היא המחלה וקטור הנישא ביותר המדווח בדרך כלל בצפון אמריקה. הסוכן סיבתי, Borrelia burgdorferi הוא חיידק החיידק מועבר על ידי קרציות Ixodid. הילוכים וזיהוי של זיהום במודלים של בעלי חיים מותאם על ידי השימוש בהאכלה לתקתק, שאנו מתארים כאן.

האכלה של קרציות בבעלי חיים להילוכים וXenodiagnosis במחקר מחלת ליים

אנו מתארים שיטות לניטור אורך של יעילות הטיפולים לטיפול בפתולוגיות של המעי הגס בעכברים באמצעות אנדוסקופ קשיח. פרוטוקול זה יכול לשמש בקלות לאפיון התגובה הטיפולית של גידול בודד בעכברים חיים וגם לניטור הישנות פוטנציאלית של המחלה.

הערכה לא פולשנית של היעילות של ניו Therapeutics למעי פתולוגיות שימוש הדמיה אנדוסקופי סידורי של עכברים חיים

בשל הדמיון הבולט של מחזור החיים ביולוגיה של טפילים מלריה מכרסמים לטפילים מלריה אדם, מודלים מלריה מכרסם הפכו חיוניים למחקר מלריה. בזאת, אנו מתוקננת כמה מן הטכניקות החשובות ביותר בשימוש בניתוח פנוטיפ של פראי סוג ומלריה מכרסם הטרנסגניים.

ניתוח פנוטימית של מלריה מכרסם טפיל מינית ושלבי דם מיניים ושלבי יתוש

פיתחנו מערכת פשוטה ופסיביות ניזונים קרציות קשה מעבדה ארנבים. פרוטוקול שאינו מפרך שלנו משתמשת בחומרים נגיש בקלות, ניתן להתאים בהתאם לדרישות של ההגדרות ניסיוני שונים. השיטה מאפשרת ניטור נוח ו/או דגימה של קרציות במהלך תקופת האכלה כולה.

מודל רב תכליתי של שנתות קשה שרץ על ארנבים מעבדה

פרוטוקול זה מציג שיטה של הכלוב שינוי חולדות באמצעות השלט הדרכה. חולדות למד את ההתנהגות הרצויה, לא רק על ידי הדרכה ישירה, אלא גם על ידי למידה תצפיתית. היישום של פרוטוקול זה מהיר וקל עשויה לסייע לשיפור רווחתו והיגיינה במתקני מכרסמים.

באמצעות השלט ההדרכה והתבוננות חברתית ללמד חולדות בהתנדבות לשנות את הכלובים

שאיפה מחט פיין היא טכניקה, לפיו התאים מתקבלים מפצע או איבר באמצעות מחט דקה. חומר מנושפי מרוח, מוכתם ונבדק תחת מיקרוסקופ לאבחון או משמש לביולוגיה מולקולרית, לצילנסה או לניתוח מבחנה. הוא זול, פשוט, מהיר וגורם לטראומה מינימלית.

איתור של Extravascular טריאנוסומה טפילים על ידי שאיפה מחט פיין

סטרונגילואידס ראטי היא נמטודה טפילית הגורמת לזיהומים חולפים בעכברי מעבדה, ומציגה שלבי נדידת רקמות וחיי מעיים. כאן, אנו מציגים פרוטוקול לשמירה על מחזור הטפילים בחולדות והדבקה ניסיונית בעכברים, כולל כימות טפילים בראש, בריאות ובמעי.

זיהום ניסיוני של עכברים בנמטודה הטפילית Strongyloides ratti

כאן אנו מתארים את העכברוש orthotopic איבר האחוריות, הליך ההשתלה, אשר נראה כי תקן...

השתלת orthotopic לימב הינד-בחולדות

למד שיטות לאבחון פרזיטים בחולדות ועכברי מעבדה באמצעות בדיקת פרווה, צואה ותוכן מעיים. טכניקות אלו מסייעות לחוקרים לשמור על בריאות המושבות ועל שלמות המחקר.

אבחון חיצוני ו Endoparasites בחולדות מעבדה ועכברים

גלה סרטונים נוספים